@article{article_1344361, title={Neuroprotective effect of Cistus laurifolius on hydrogen peroxide-induced neurodegeneration in differentiated SH-SY5Y cells}, journal={Biological Diversity and Conservation}, volume={16}, pages={229–236}, year={2023}, DOI={10.46309/biodicon.2023.1344361}, author={Eciroğlu, Hamiyet and Yıldız, Fatma and Yücel, Ersin}, keywords={neuroprotective effect, Cistus laurifolius, SH-SY5Y, MAP2, NeuN, cytotoxicity}, abstract={Neuroprotective effect of Cistus laurifolius on hydrogen peroxide-induced neurodegeneration in differentiated SH-SY5Y cells Hamiyet ECIROGLU1*, Fatma YILDIZ1, Ersin YUCEL2 ORCID: 0000-0002-3555-3946; 0000-0002-9270-9062; 0000-0001-8274-7578 1Department of Medical Laboratory Techniques, Vocational School of Health Services, Alanya Alaaddin Keykubat University, Antalya, Turkey 2Department of Biology, Faculty of Science, Eskisehir Technical University, Eskişehir, Turkey (ORCID: 0000-0001-8274-7578) Abstract Neurodegeneration is an important finding of various neurological diseases such as Alzheimer’s Disease and Parkinson’s Disease. MAP2 and Rbfox3/NeuN genes are also two important neuronal markers. In this study, our aim is to investigate the neuroprotective effect of Cistus laurifolius L. extract in neurodegeneration caused by H2O2 treatment in differentiated SH-SY5Y (f-SH-SY5Y) cells. In the study, the effects of H2O2 (62.5-1000µM) and Cistus laurifolius (15.62-1000mg/ml) doses on cell viability were determined by the MTT method. The effect of Cistus laurifolius in d-SH-SY5Y cells followed by H2O2 treatment on cell viability was determined by the MTT test. The effect of the extract on MAP2 and Rbfox3/NeuN gene expressions in 24-hour periods was evaluated by the RT-qPCR method. According to our findings, Cistus laurifolius extract significantly reduced cell viability in SH-SY5Y cells at 24 h and 48 h (p <0.05). H2O2 caused a decrease in d-SH-SY5Y cell viability at all doses (p <0.05). We showed that Cistus laurifolius extract applied for 24 hours and 48 hours before toxicity significantly increased cell viability at doses of 31,25 and 62,5 mg/ml in 24 hours compared to the H2O2 group. In d-sH-SY5Y cells, MAP2 gene expression in the H2O2 group was significantly decreased compared to the control group, however, it was upregulated in Cistus laurifolius groups at 31,25 and 62,5 mg/ml administered before toxicity compared to the H2O2 group (p <0.05). However, there was no significant difference between the groups in terms of NeuN gene expression (p>0.05). The neuroprotective effect of Cistus laurifolius in the in-vitro neurodegeneration model has been extensively investigated for the first time. According to the data we obtained, Cistus laurifolius increased the cell viability and MAP2 gene expression and showed a neuroprotective effect. However, further studies are still needed to confirm the therapeutic value of the extract. Keywords: SH-SY5Y, Cistus laurifolius, neuroprotective effect, MAP2, NeuN, cytotoxicity Özet Nörodegenerasyon Alzheimer ve Parkinson gibi çeşitli nörolojik hastalıkların önemli bir bulgusudur. MAP2 ve Rbfox3/NeuN genleri de çeşitli nörodejeneratif hastalıkların patogenezinde rol alan iki önemli nöronal belirteçtir. Bu çalışmada amacımız olgun nöron benzeri hücreye farklılaşmış SH-SY5Y (f-SH-SY5Y) hücrelerinde H2O2 muamelesi kaynaklı gelişen nörodejenerasyonda Cistus laurifolius L. ekstresinin nöroprotektif etkisinin araştırılmasıdır. Çalışmada H2O2 (62.5-1000uM) ve Cistus laurifolius (15.62-1000mg/ml) dozlarının hücre canlılığı üzerine etkileri MTT yöntemi ile belirlendi. f-SH-SY5Y hücrelerinde Cistus laurifolius’nin, ardından H2O2 uygulamasının hücre canlılığı üzerindeki etkisi MTT testi ile belirlendi. Ekstraktın 24 saatlik periyotlarda MAP2 ve Rbfox3/NeuN gen ifadeleri üzerindeki etkisi RT-qPCR yöntemi ile değerlendirildi. Bulgularımıza göre Cistus laurifolius ekstresi uygulaması ile SH-SY5Y hücrelerinde 24 ve 48 saatte hücre canlılığı anlamlı düzeyde azalmıştır (p <0,05). H2O2 tüm dozlarda d-SH-SY5Y hücre canlılığında azalmaya neden olmuştur (p <0,05). Toksisite öncesi 24 saat ve 48 saatlik sürelerde uygulanan Cistus laurifolius ekstresinin 24 saatte 31,25 ve 62,5 mg/ml’lik dozlarda hücre canlılığını H2O2 grubuna göre anlamlı derecede artırdığını gösterdik. d-sH-SY5Y hücrelerinde, H2O2 grubunda MAP2 gen ekspresyonu kontrol grubuna göre anlamlı derecede azaldı, buna karşılık toksisite öncesinde uygulanan 31,25 ve 62,5 mg/ml’lik Cistus laurifolius gruplarında H2O2 grubuna göre MAP2 gen ekspresyonu upregüle edildi (p <0,05). Ancak gruplar arasında NeuN gen ekspresyonu açısından anlamlı bir fark görülmedi (p>0,05). Cistus laurifolius’nin in vitro nörodejenerasyon modelindeki nöroprotektif etkisi ilk kez kapsamlı bir şekilde araştırılmıştır. Elde ettiğimiz verilere göre Cistus laurifolius hücre canlılığı ve MAP2 gen ekspresyonunda artışa neden olmuş ve nöroprotektif etki göstermiştir. Bununla birlikte, Cistus laurifolius ekstresinin terapötik değerini doğrulamak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır. Anahtar Kelime: SH-SY5Y, Cistus laurifolius, nöroprotektif etki, MAP2, NeuN, sitotoksisite 1. Introduction The most prominent feature of neurological diseases such as Alzheimer’s disease (AD), and Parkinson’s dise}, number={3}, publisher={Ersin YÜCEL}