TY  - JOUR
T1  - Isolation and Culturing of Primary Neurons from Newborn Mouse Cortex Tissue
TT  - Yeni Doğan Farelerden İzole Edilen Korteks Dokusundan Primer Nöron Elde Edilmesi
AU  - Ayşit, Nese
PY  - 2024
DA  - December
Y2  - 2024
DO  - 10.47493/abantmedj.1479470
JF  - Abant Medical Journal
JO  - Abant Med J
PB  - Bolu Abant Izzet Baysal University
WT  - DergiPark
SN  - 1305-4392
SP  - 98
EP  - 104
VL  - 13
IS  - 3
LA  - en
AB  - Objective: This study aimed to establish a reliable protocol for obtaining healthy and long-lived cortical neurons from newborn mice, providing a valuable model for studying neuronal function.Materials and Methods: Cortical regions of P0 mice were isolated and healthy neurons were obtained by enzymatic and mechanical dissociation. On the seventh day of incubation, the presence of neurons was detected by staining with neuron-specific antibodies. Transgenic mice expressing fluorescent proteins specific to neurons, glia and oligodendrocytes were also used for culture.Results: Almost all the neurons had adhered to the petri dish bottom by the second hour of incubation. Most of the neurons were healthy and started to grow extension quickly.Conclusion: Neuron cultures are an important tool in research and are invaluable for studying the behaviour of cells. Nanoparticles facilitate genetic manipulation of these cultures for various biotechnological applications. In particular, they have great potential in areas such as the delivery of genetic material into cells, drug delivery and targeted treatment methods. Such techniques have the potential to open up new avenues for the study and treatment of neurological diseases.
KW  - Cortex
KW  - Newborn Mice
KW  - Cell Culture
KW  - Neuron Culture
KW  - Central Nervous System.
N2  - Amaç: Bu çalışma, yeni doğmuş farelerden sağlıklı ve uzun ömürlü kortikal nöronlar elde etmek için güvenilir bir protokol geliştirmeyi ve elde edilen nöronları kullanarak nöron fonksiyonlarını incelemeyi hedeflemiştir.Gereç ve Yöntemler: P0 farelerin korteks bölgeleri izole edilerek enzimatik ve mekanik ayrıştırma uygulanarak sağlıklı nöronlar elde edildi. İnkübasyonun yedinci gününde nörona özgü antikorlar ile boyama yapılarak nöronların varlığı gösterildi. Ayrıca nöron, glia ve oligodendrositlere özgü floresan proteinleriifade eden transgenik farelerden de kültür yapıldı.Bulgular: İnkübasyonun ikinci saatinde nöronların neredeyse tamamının kültür kabına yapıştığı gözlemlendi. Elde edilen nöronların büyük kısmının sağlıklı olduğu ve uzantılarının hızlıca büyümeye başladığı gözlemlendi.Sonuç: Bu protokolü diğer protokollerden ayıran temel özellik, geliştirme sürecini destekleyecek hiçbir faktör veya serum kullanılmamasıdır. Nöron kültürleri, araştırmalarda önemli bir araç olarak kullanılır ve hücrelerin davranışlarını incelemek için oldukça muazzam olanak sağlar. Nanoparçacıklar, bu kültürler üzerinde çeşitli biyoteknolojik uygulamalar için genetik manipülasyonları kolaylaştırır. Özellikle, hücrelere genetik materyal taşıma, ilaç salınımı ve hedeflenmiş tedavi yöntemleri gibi alanlarda büyük potansiyele sahipler. Bu tür teknikler, nörolojik hastalıkların araştırılması ve tedavisi için yeni yollar açabilir. Ayrıca kısa sürede farklı amaçlar için tasarlanan nanoparçacık, biyoteknolojik araçlarla genetik manipülasyonlara olanak sağlar Geliştirilen protokol, bir nöronal gelişim, fizyolojik bir nöronal aktivite sergileyen tekrarlanabilir kültürler sağlar.
CR  - Mcconnell SK. cerebral cortex. 1995;105:129–43.
CR  - Lesuisse C, Martin LJ. Long-Term Culture of Mouse Cortical Neurons as a Model for Neuronal Development , Aging , and Death ABSTRACT : 2002;
CR  - Iii GMJB, Lee S hye, Singh D, Yuan Y, Ng Y gie, Reichardt LF, et al. Culturing pyramidal neurons from the early postnatal mouse hippocampus and cortex. Nat Protoc. 2012;7(9):1741–54.
CR  - Baroncelli L, Lunghi C. Neuroplasticity of the visual cortex : in sickness and in health. Exp Neurol [Internet]. 2021;335(October 2020):113515. Available from: https://doi.org/10.1016/j.expneurol.2020.113515
CR  - Morales M. Single Central Nervous System Neurons in Culture. 1998;293–302.
CR  - Ahlemeyer B, Baumgart-Vogt E. Optimized protocols for the simultaneous preparation of primary neuronal cultures of the neocortex, hippocampus and cerebellum from individual newborn (P0.5) C57Bl/6J mice. J Neurosci Methods. 2005 Dec 15;149(2):110–20.
CR  - Brewer GJ. Isolation and culture of adult rat hippocampal neurons. Vol. 71, Journal of Neuroscience Methods. 1997.
CR  - Ulusoy C, Öztürk G, Tüzün E. Effect of LGI1 antibody-positive IgG on hippocampal neuron survival : a preliminary study. 2018;1:1–7.
CR  - Demir O, Aysit N, Onder Z, Turkel N, Ozturk G, Sharrocks AD, et al. Biochimica et Biophysica Acta ETS-domain transcription factor Elk-1 mediates neuronal survival : SMN as a potential target. BBA - Mol Basis Dis. 2011;1812(6):652–62.
CR  - Moutin E, Hemonnot A laure, Seube V, Linck N, Rassendren F, Perroy J, et al. Procedures for Culturing and Genetically Manipulating Murine Hippocampal Postnatal Neurons. 2020;12(April):1–16.
CR  - Viesselmann C, Ballweg J, Lumbard D, Dent EW. Nucleofection and primary culture of embryonic mouse hippocampal and cortical neurons. J Vis Exp. 2010;(47):9–12.
CR  - Hu CY. Differences between cultured cortical neurons by trypsin and papain digestion. 2022;(February):93–9.
CR  - Sammoura FM, Popova D, Morris A, Hart RP, Richardson JR. Current Research in Neurobiology Methods for shipping live primary cortical and hippocampal neuron cultures from postnatal mice. Curr Res Neurobiol [Internet]. 2023;4(December 2022):100069. Available from: https://doi.org/10.1016/j.crneur.2022.100069
CR  - Manuscript A. NIH Public Access. 2009;37(2):376–87.
CR  - Eroglu C, Barres BA. HHS Public Access. 2015;468(7321):223–31.
CR  - Jr AS, Elahi H, Ploski JE. Genetically Engineering the Nervous System with. 2020;7(April).
UR  - https://doi.org/10.47493/abantmedj.1479470
L1  - https://dergipark.org.tr/en/download/article-file/3910014
ER  -