Çalışmada, Laetiporus
sulphureus’un sitotoksite, apoptik ve nekrotik etkileri incelenmiştir.
Laboratuvardaki basidiokarplardan alınan parçalar malt ekstrakt agarda doku
kültürü yöntemiyle geliştirildi. Primer ve sekonder miseller 27°C’de,
karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edilerek elde edildi. Sekonder misellerden
3’er pelet nutrientbroth’da 27°C’de, 140 rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı.
Numuneler soxlet cihazında 80°C, %70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon
edilerek sitoksite, apoptik ve nekrotik çalışmalar için hazırlandı. Sitoksite
çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları
0.5mg/ml, 0.25mg/ml, 0.125mg/ml,0.0625mg/ml, 0.03125mg/ml olarak uygulandı.
WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda 440nm dalga boyunda mikroplate
okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama deneyi ile aynı hücre hattında
apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama solüsyonu hazırlanarak MCF-7 ve L929
Fibroblast hücrelere aynı konsantrasyonlarda uygulandı. İnkübasyon sonucunda
florasanataçmanlı mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm
yapıldı. Kullanılan 0.25 dozajda MCF-7 hücre hatlarında %10 sitotoksitite
gözlenmiş. Kullanılan tüm dozajlarda L929 Fibroblast hücre hatlarında canlılık
oranları artmıştır. Örneklerde apoptik ve nekrotik etki gözlenmiştir.
Subjects | Health Care Administration |
---|---|
Journal Section | Articles |
Authors | |
Publication Date | October 11, 2017 |
Published in Issue | Year 2017 Volume: 12 Issue: 4 |