@article{article_551222, title={Brucella melitensis dış membran protein geni Omp31’in klonlanması}, journal={Van Veterinary Journal}, volume={30}, pages={103–108}, year={2019}, author={Oryaşın, Erman and Türkyılmaz, Süheyla}, keywords={Brucella melitensis,klonlama}, abstract={<p> <span style="font-size:12pt;line-height:150%;font-family:’Times New Roman’, serif;">Bruselloz hayvanlardan veya hayvansal ürünlerden insanlara bulaşan en
önemli zoonotik hastalıklardan birisidir. <i>Brucella
melitensis, </i>brusella cinsi içerisinde en patojen türlerden birisidir. <i>B. melitensis </i>’in dış membran proteini 31
(Omp31) koruyucu bir immünojen ve önemli bir aday aşı olarak kabul
edilmektedir. Bu çalışmada, <i>B. melitensis </i>
Rev 1 suşundan Omp31’i kodlayan genin ( <i>omp </i>31)
klonlanması amaçlandı. Çalışmada materyal olarak <i>B. melitensis </i> REV-1 canlı aşı suşu kullanıldı. Suşun
canlandırılmasının ardından, DNA ekstraksiyonu yapıldı. Dış membran proteini
kodlayan gen bölgesi, gen bankasından bulundu. Bu bölgeyi klonlamak için
gerekli primerler manuel olarak dizayn edildi. Primer dizaynından sonra
polimeraz zincir reaksiyonu yoluyla çoğaltılan gen bölgesi, pET28a ekspresyon vektörüne
klonlanarak <i>Escherichia coli </i> BL21
bakterisine transformasyonu gerçekleştirildi. <i>E. coli </i> BL21’den plazmid ekstraksiyonu yapıldı. Klonlama için
kullanılan restriksiyon enzimi ile kesim sonucunda insert ve plazmid ayrı
olarak gözlemlendi. Beklenen büyüklükte (790 bp) bulunan insert, tekrar
klonlama primeri ile çoğaltılarak doğrulamak amacıyla sekans analizi yapıldı.
Sekans analizi sonrasında elde edilen dizi gen bankası ile karşılaştırıldı ve
insertin <i>B. melitensis </i> dış membran
proteini olduğu doğrulandı. Bundan sonraki yapılacak çalışmalarla da klonlanan
rekombinant dış membran proteini Omp31 (rOmp31)’in antijenik özelliğinin
araştırılarak aşı adayı olma potansiyelinin belirlenmesi gerekmektedir. </span> <br /> </p>}, number={2}, publisher={Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi}