Gender Determination of Ten Days Chick Embryo by PCR

Abstract

Sex of one-day-old chicks are determined by feather characteristics (length or colour) of the breed or line, or vent sexing by highly trained specialist. DNA-based methods are being developed to accurately identify sex in early period of the chick embryos. One of these is the PCR method in which primers are designed according to the sequences of poultry sex chromosomes (ZZ male and ZW female). In this study, Xhol repeat sequence on the W chromosome and specific DNA sequences of the 18S ribosomal gene were amplified by PCR using DNA obtained from amniotic fluid of 10 day old embryos (n=30). On the band image of the gel PCR products, samples generating a single band (256 bp) were determined as male and samples giving two bands (256 and 415 bp) were determined as females.  The gender determination in the early stages of the chick embryo can be done accurately and fast by PCR method. 

Keywords

• Sex Determination,Embryo,Fowl,PCR,DNA

On Günlük Civciv Embriyosunda PCR ile Cinsiyet Tayini

Abstract

Günlük civcivlerin cinsiyet ayrımı, ırka özgü tüy rengi veya tüy gelişim hızına bağlı olarak ya da özel eğitimli seksörler tarafından kloaktan yapılmaktadır. Civciv embriyosunun erken döneminde, cinsiyetin doğru bir şekilde tanımlaması için DNA’ya dayalı yöntemler geliştirilmektedir. Bu yöntemlerden biri olan PCR tekniğinde kanatlı cinsiyet kromozomların dizilerine (ZZ erkek ve ZW dişi) göre dizayn edilen primerler kullanılır. Bu araştırmada 10 günlük embriyo (n=30) amniyotik sıvılarından elde edilen DNA kullanılarak yapılan PCR çalışmasında W kromozomu üzerindeki Xhol tekrar dizisi ve 18S ribozomal gene ait belirli bölgeler çoğaltılmıştır. Araştırmamızda, PCR ürünlerinin agaroz jel elektroforez bant görüntüsüne göre tek bant (256 bç) veren örnekler erkek, iki bant (256 ve 415 bç) veren örnekler dişi olarak belirlenmiştir. PCR yöntemi ile embriyonun erken dönemlerinde cinsiyet tespiti doğru ve hızlı bir şekilde yapılabilmektedir.  

Keywords

• Cinsiyet belirleme,Embriyo,Tavuk,PCR,DNA

References

1. Aksoy, F.T., Atasoy, F., Onbaşilar, E.E., Apaydin, S., 2002. Denizli Irkı Günlük Civcivlerde Tüylenme Özelliklerinden Yararlanarak Cinsiyeti Belirleme Olanaklar. Turk J Vet Anim Sci, 26: 567-575.
2. Benowitz-Fredericks, Z.M., Kitaysky, A.S., Wingfield, J.C., 2005. Steroids in Allantoic Waste: An Integrated Measure of Steroid Exposurein Ovo. Annals of the New York Academy of Sciences, 1046(1): 204-213.
3. Chue, J., Smith, C.A., 2011. Sex determination and sexual differentiation in the avian model. FEBS J, 278(7): 1027-34.
4. Clinton, M., Haines, L., Belloir, B., McBride. D., 2001.Sexing chick embryos: a rapid and simple protocol. Br Poult Sci, 42(1): 134-8.
5. Clinton, M., Nandi, S., Zhao, D., Olson, S., Peterson, P., Burdon, T., McBride, D.,2016. Real-Time Sexing of Chicken Embryos and Compatibility with in ovo Protocols. Sex Dev, 10(4): 210-216.
6. Göger, H., 2017.Civciv Cinsiyetini Kuluçkadan Çıkmadan Önce veya Günlük Yaşta Belirleme Yöntemleri. Tavukçuluk Araştırma Dergisi 14(1): 13-19.
7. Griffiths, R., Double, M. C., Orr, K., Dawson. R. J., 1998. A DNA test to sex most birds. Mol Ecol 7: 1071-1075.
8. Haunshi, S., Pattanayak, A., Bandyopadhaya, S., Saxena, S.C., Bujarbaruah, K.M., 2008. A Simple and Quick DNA Extraction Procedure for Rapid Diagnosis of Sex of Chicken and Chicken Embryos. J Poult Sci 45: 75-81

9. Kalina, J., Mucksová, J., Yan, H., Trefil, P., 2012. Rapid sexing of selected Galliformes by polymerase chain reaction. Czech J. Anim. Sci., 57(4): 187-192.
10. Minematsu, T., Misato, S., Yumiko, T., Atsushi, T., Yukio, K., 2004. Simplified DNA Extraction Methods for Sexing Chick Embryos. J Poult Sci 41: 147-154.
11. Naito, M., Sano, A., Kasashima, T., Nakamichi, H., Haumi, T., Matsubara, Y., Kuwana, T. A., 2003. A Simple Method for Sexing Chicken Embryos at Stage X. J Poult Sci 40: 226-230.
12. Turkyilmaz, M.K., Karagenc, L., Fidan, E., 2010. Sexing of newly-hatched chicks using DNA isolated from chorio-allantoic membrane samples by polymerase chain reaction in Denizli chicken. Br Poult Sci, 51(4): 525-9.
13. Türkoğlu, M., Sarıca, M., 2009. Tavuk genetiği ve ıslahı., Tavukçuluk Bilimi, Yetiştirme, Besleme ve Hastalıklar, Edi.: M. Türkoğlu and M. Sarıca, p: 317-352. Bey Ofset Matbaacılık, Ankara.
14. Wan, Z., Lu, Y., Rui, L., Yu, X., Li, Z., 2017. Sexing chick mRNA: A protocol based on quantitative real-time polymerase chain reaction. Poult Sci, 96(3): 537-540. Yetişir, R., 2014. Cinsiyete Bağlı Tüylenme Genleri (k+, K) ve Günlük Yaşta Cinsiyet Ayırımına İmkan Veren Ebeveyn Soylar Geliştirme, Ulusal Kümes Hayvanları Kongresi, Elazığ.