Daphne oleoides subsp. kurdica’nın antimikrobiyal ve antifungal etkilerinin araştırılması

Abstract

Veteriner mikrobiyolojisinde antimikrobiyal direncin (AMR) artışı, hayvan sağlığı için ciddi bir tehdit oluşturmakta ve sentetik antibiyotiklerin kontrolsüz kullanımı çoklu ilaca dirençli (MDR) suşların ortaya çıkmasına neden olmaktadır. Bu küresel halk sağlığı sorunu, insan, hayvan ve çevre sağlığını bütünleştiren “Tek Sağlık” (One Health) yaklaşımının zorunluluğunu vurgulamaktadır. Bu kapsamda, geleneksel tedavilere alternatif olacak yeni, güvenilir antimikrobiyal ajanların araştırılması büyük önem taşımaktadır. Bu çalışmada, Türkiye’ye endemik bir alt tür olan, Tunceli-Ovacık, Munzur Dağları’ndan toplanan Daphne oleoides subsp. kurdica’nın hem yaprak hem de sap-gövde kısımlarının antimikrobiyal potansiyeli araştırıldı. Etanol ile ekstraksiyonu yapılan bitkilerin antibakteriyel aktivitesinin belirlenmesi için Agar Dilüsyon Yöntemi, antifungal aktivitesinin belirlenmesi için Sıvı Makrodilüsyon Yöntemi kullanıldı ve Minimum inhibisyon konsantrasyon (MİK) değerleri belirlendi. MİK değerleri, veteriner hekimlikte klinik öneme sahip bakteri (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Proteus mirabilis, Escherichia coli ve Klebsiella pneumoniae) ve mantar (Candida albicans, Pichia kudriavzevii, Candida tropicalis, Candida globrata, Malassezia pachydermatis, Microsporum canis ve Trichophyton mentagrophytes) etkenleri için ayrı ayrı değerlendirildi. Yapılan testlerin sonucunda hem yaprak hem de sap-gövde ekstraktlarının bakteri ve mantar etkenlerine karşı herhangi bir inhibisyon etkisi göstermediği, sadece M. canis’e karşı (sap-gövde ekstraktı 10100 µg/ml, yaprak ekstraktı 5050 µg/ml) düşük seviyede bir etki gösterdiği belirlendi. Bitkinin potansiyel antimikrobiyal özelliklerini daha kapsamlı bir şekilde ortaya koymak için, gelecekteki çalışmaların farklı çözücüler kullanılarak hazırlanmış ekstraktları ve daha düşük MİK değerlerini saptayabilecek yöntemlerle test edilmesi önerilmektedir.

Keywords

• antibakteriyel
• antimikotik
• Daphne oleoides subsp. kurdica
• Minimal İnhibisyon Konsantrasyonu

Investigation of antibacterial and antifungal effects of Daphne oleoides subsp. kurdica

Abstract

The increase in antimicrobial resistance (AMR) in veterinary microbiology poses a serious threat to animal health, and the uncontrolled use of synthetic antibiotics has led to the emergence of multidrug-resistant (MDR) strains. This global public health issue highlights the necessity of the “One Health” approach, which integrates human, animal, and environmental health. In this context, the investigation of new, reliable antimicrobial agents that may serve as alternatives to conventional treatments has become increasingly important. In the present study, the antimicrobial potential of both the leaf and stem parts of Daphne oleoides subsp. kurdica, an endemic subspecies collected from the Munzur Mountains (Tunceli–Ovacık, Türkiye), was investigated. Ethanol extracts were prepared, and antibacterial activity was assessed using the Agar Dilution Method, while antifungal activity was evaluated using the Liquid Macrodilution Method. Minimum inhibitory concentration (MIC) values were determined for each extract. The MIC values were evaluated separately for bacterial pathogens of clinical relevance in veterinary medicine (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Proteus mirabilis, Escherichia coli, and Klebsiella pneumoniae) and for fungal agents (Candida albicans, Pichia kudriavzevii, Candida tropicalis, Candida glabrata, Malassezia pachydermatis, Microsporum canis, and Trichophyton mentagrophytes). The results indicated that neither the leaf nor the stem extracts exhibited inhibitory effects against the tested bacterial and fungal agents, except for a low level of inhibition against M. canis (10100 µg/ml for stem extract and 5050 µg/ml for leaf extract). To more comprehensively elucidate the potential antimicrobial properties of this plant, future studies should include extracts prepared with different solvents and employ methods capable of detecting lower MIC values.

Keywords

• Antimicrobial
• Antifungal
• Daphne oleoides subsp. Kurdica
• Minimum Inhibitory Concentration (MIC)

References

1. Balkan, I. A., Taşkın, T., Dogan, H. T., Deniz, I., Akaydın, G., & Yeşilada, E. (2017). A comparative investigation on the in vitro anti-inflammatory, antioxidant and antimicrobial potentials of subextracts from the aerial parts of Daphne oleoides Schreb. subsp oleoides. Industrial Crops and Products, 95, 695–703. https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2016.11.038
2. Can, T. H. (2019) Sıyırcık(Daphne gnidioides) ve sırımbalığı(Daphne pontica) bitki ekstraktlarının biyolojik etkinliğinin incelenmesi, (Yüksek Lisans Tezi) Kastamonu Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Genetik ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı, Türkiye.
3. CLSI (2024). M100 Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 34th ed. CLSI guideline M100. Clinical and Laboratory Standards Institute.
4. Cos, P., Vlietinck, A. J., Berghe, D. V., & Maes, L. (2006). Antiinfective potential of natural products: How to develop a stronger in vitro ‘proof-of-concept’. Journal of Ethnopharmacology, 106(3), 290–302.
5. Eloff, J. N. (2019). Avoiding pitfalls in determining antimicrobial activity of plant extracts and publishing the results. BMC Complementary Medicine and Therapies, 19, 106.
6. Hussain, H., Hussain, J., Al-Harrasi, A., & Krohn, K. (2012). Efficacy of Daphne oleoides subsp. kurdica used for wound healing: identification of active compounds through bioassay guided isolation technique. Journal of Ethnopharmacology, 141(3), 1058–1070. https://doi.org/10.1016/j. jep.2012.04.001
7. Mousavi, F., Shirzadi Karamolah, K., & Mahmoudi, H. (2019). Antimicrobial Effect of Extracts of Daphne Oleoides on Bacteria Isolated from Dental Plaque. Journal of Mazandaran University of Medical Sciences, 29(175), 185-195.
8. Palma, E., Tilocca, B., & Roncada, P. (2020). Antimicrobial Resistance in Veterinary Medicine: An Overview. International Journal of Molecular Sciences, 21(6), 1914. https://doi.org/10.3390/ijms21061914

9. Potočnik, T. L., Kolar, M. H., & Korošec, K. (2014). Antimicrobial activity and HPLC analysis of Daphne blagayana L. (Thymelaeceae) extracts. Acta Veterinaria (Beograd), 64(4), 493–502.
10. Süntar, I., Akkol, E. K., Keles, H., Yesilada, E., Sarker, S. D., Arroo, R., & Baykal, T. (2012). Efficacy of Daphne oleoides subsp. kurdica used for wound healing: identification of active compounds through bioassay guided isolation technique. Journal of Ethnopharmacology, 141(3), 1058- 1070.
11. Tackling Antimicrobial Resistance using the One Health approach: The animal health perspective. (2024). World Organisation for Animal Health (WOAH). Retrieved from https://www.woah.org/app/uploads/2024/06/ tackling-amr-using-the-one-health-approach.pdf