Comparing The Different Fixatives For Examination of Liver Tissue Ultrastructure

Abstract

Keywords

• -

Farklı Fiksatiflerin Karaciğer Dokusunda İnce Yapı Düzeyinde Etkilerinin Karșılaștırılması

Abstract

Amaç: Enfeksiyonlar ve depo hastalıkları gibi karaciğer patolojilerinde dokunun ince yapı düzeyinde incelenmesi önem tașımaktadır. Bu çalıșma; çeșitli tespit sıvılarının etkinliğini ve birbirine olan üstünlüğünü araștırarak, dokunun değișken laboratuvar yöntemlerinden etkilenmesini en aza indirmek üzere planlanmıștır. Yöntemler: Çalıșmada 5 adet Wistar Albino rat kullanıldı. Ratların %4 paraformaldehitle perfüzyonundan sonra dokular çıkarıldı ve dört farklı tespit solusyonuyla takip edildi: I- Trump’s solüsyonu %4 paraformaldehit (P) ve %1 gluteraldehit (G ), II- % 2 PFA ve % 2.5 G, 2,5 mM CaCl içeren, III- % 2 PFA ve % 2,5 G, IV- % 2,5 G. I, II, III. Yöntemlerde fosfat tampon kullanılırken, IV. yöntemde kakodilat tamponlu fiksatif kullanıldı. Diğer ișlemler bilinen elektron mikroskobi takip yöntemiyle sürdürüldü ve geçirimli elektron mikroskobunda incelendi. Örnekler skorlanarak istatistiksel olarak değerlendirildi. Bulgular: Plazma zarı ve hücreler arası bağlantı kompleksleri grup I ve II’ de daha iyi korundu. Grup IV mitokondriyon yapısının en iyi izlendiği grup olarak belirlendi. İnce yapının değerlendirildiği beș kritere göre yapılan skorlama ve istatistiksel sonuçlara göre karaciğer için en iyi tespit solusyonu sıralaması I, IV, II ve III olarak belirlendi. Sonuç: Uygulanan diğer fiksatiflere göre değerlendirildiğinde Trump’s solusyonun karaciğer dokusu tespitinde daha iyi olduğu bulundu.

Keywords

• Fiksatifler, karaciğer, teknik, geçirimli elektron mikroskobu

References

1. Dykstra M.J. A manual of applied techniques for biological electron microscopy, Plenum Press. New York & London; 1993.
2. Glauert A.M. Fixation, Dehydration and Embedding of Biological Specimens (Practical Methods in Electron Microscopy). Volume 1, 5th repr. PA: Elsevier Science. 1987. p.77-79.
3. Yankah A.C., Yacoub M.H., Hetzer R. Cardiac Valve Allografts II: Science and Practice, 1st ed. Steinkopff-Verlag Darmstadt. 1998. p.4-8.
4. Hayat M.A. Principles and Techniques of Electron Microscopy: Biological Applications, Volume 1, 1sted. PA: Litton Educational Publishing. 1970. p.8-12.
5. Maser MD., Powell TE., 3rd Philpott CW. Relationships among pH, osmolality, and concentration of fixative solutions. Stain Technol 1967;42(4):175-82.
6. Elbers PF. Ion permeability of the egg of Limnea stagnalis L. on fixation for electron microscopy. Biochim. Biophys Acta 1966;112:318-29.
7. Tahmisian TN. Use of the freezing point method to adjust the tonicity of fixing solutions. J Ultrastructure Res 1964;10:182-88.
8. Fahimi HD, Drochmans P. Essais de standardisation de la fixation au glutrarldehyde. II. Influence des concentrations en aldehyde et de l’osmolalite. J Microscopie 1965;4:737-48.

9. Saito Y, Tanaka Y. Glutaraldehyde fixation of fish tissues for electron microscopy. J Electron Microsc 1980;29(1):1-7.
10. Wood RL., Luft JH. The influence of buffer systems on fixation with osmium tetroxide. J. Ultrastructure Res 1965; 12:22-45.
11. Reith A, Kraemer M, Vassy J. The influence of mode of fixation, type of fixative and vehicles on the same rat liver: a morphometric/stereologic study by light and electron microscopy. Scan Electron Microsc 1984;2:645-51.
12. David H, Uerlings I. Quantitative ultrastructure of the rat liver by immersion and perfusion fixations. Exp Pathol 1983;23(3):131-41.
13. Palade GE. A study of fixation for electron microscopy. J Exp Med. 1952;95(3):285-98.
14. Kraemer M, Vassy J, Chalumeau MT, Reith A. Effect of paraformaldehyde fixation on the qualitative preservation and stereological parameters of the adult rat liver. Arch Anat Microsc Morphol Exp 1983;72(4):279-97.
15. Romert P, Matthiessen ME. Swelling of mitochondria in immersion-fixed liver tissue. Effect of various fixatives and of delayed fixation. Acta Anat (Basel) 1981;109(4):332-8.
16. Fahimi HD. Perfusion and immersion fixation of rat liver with glutaraldehyde. Lab Invest 1967;16(5):736-50.
17. Bohman SO, Maunsbach AB. Effects on tissue fine structure of variations in colloid osmotic pressure of glutaraldehyde fixatives. J Ultrastruct Res 1970;30(1):195-208.