Karsinoembriyonik Antijene Özgül İmmün Yanıtların HLA-A*0201 Transjenik Fare Modelinde Ölçülmesi ve Değerlendirilmesi
Abstract
Amaç: Karsinoembriyonik antijen (CEA) geni taşıyan bir rekombinant vektör aracılığı ile immünize edilen transjenik farelerde, CEA’e karşı oluşan özgül T lenfosit yanıtını ölçmek ve deneysel parametreleri irdeliyerek değerlendirmek. Gereç ve Yöntem: Rekombinant vektör, ALVAC-CEA ile immünize edilen HLA-A*0201 (A2) transjenik farelerden dalak hücreleri izole edildi. Kültürlerde özgül CD8+ sitotoksik T lenfositleri aktive etmek ve çoğaltmak için, hücreler iki farklı CEA peptidi ile veya kontrol peptid ile uyarıldı. CEA’e özgül T lenfosit yanıtlarının ölçülmesinde standart bir değerlendirme işlemi için optimum parametreleri bulmak amacıyla, faklı peptid konsantrasyonları ve farklı hücre sayıları test edildi. T lenfosit cevabı, IFN-γ salgısı olarak ELISPOT yöntemi ile ölçüldü. Bulgular: ALVAC-CEA ile aşılanan transjenik fareler, CEA’e özgül olan etkin T lenfosit yanıtları oluşturdu. Oluşan yanıtların optimal seviyelerde ölçülebilmesi için, hücre sayısı ve uyarıcı peptid miktarı gibi parametre değerlerinin kullanılan yöntem açısından önemli olduğu saptandı. Sonuç: CEA’e özgül yanıtların ölçülmesinde deneysel parametreler tam olarak optimize edilmelidir. Özgül T lenfosit yanıtlarının oluşumunda etkin bir vektör olan ALVAC-CEA, CEA eksprese eden tümörlerin tedavisinde kullanılabilir
Keywords
References
- Horig H, Medina FA, Conkright WA, et al. Strategies for cancer therapy using car- cinoembryonic antigen vaccines. Expert Rev Mol Med 2000; 2:1-24.
- Kass E, Schlom J, Thompson J, et al. In- duction of protective host immunity to carcinoembryonik (CEA), a self antigen in CEA transgenic mice, by immunizing with a recombinant vaccinia-CEA virus. Cancer Research 1999; 59:676-683.
- Haga S, Watanabe O, Shimizu T, et al. The clinical value of tissue carcinoembryonic antigen in breast cancer. Surgery Today 1991; 21:278-283.
- Neil L. Berinstein. Carcinoembryonic an- tigen as a target for therapeutic anticancer vaccines: a review. Journal of Clinical On- col. 2002; 20:2197-2207.
- Borenstein SH, Graham J, Zhang X-Let al. CD8+ T Cells are necessary for recogni- tion of allelic, but not locus-mismatched or xeno-, HLA Class I transplantation an- tigens. Journal of Immunol. 2000; 165: 2341-2353.
- Schmitz J, Reali E, Hodge JW, et al. Iden- tification of an interferon-γ-inducible car- cinoembryonic antigen (CEA) CD8+ T-cell epitope, which mediates tumor killing in CEA transgenic mice. Cancer Research 2002; 62:5058–5064.
- Wada S, Tsunoda T, Baba T, et al. Ration- ale for antiangiogenic cancer therapy with vaccination using epitope peptides derived from human vascular endothe- lial growth factor receptor 2. Cancer Re- search 2005; 65: 4939-4946.
- Kan-Mitchell J, Bisikirska B, Wong-Staal F, et al. The HIV-1 HLA-A2-SLYNTVATL is a help-independent CTL epitope. Journal of Immunology 2004; 172: 5249–5261.
- Arlen P, Tsang KY, Marshall JL, et al. The use of a rapid ELISPOT assay to analyze peptide-specific immune responses in 13. Cornish GH, Sinclair LV, and Cantrell DA. carcinoma patients to peptide vs. recom- binant poxvirus vaccines. Cancer Immu- nol Immunother. 2000; 49: 517-529.
- Linnemann T. Wiesmüller KH, Gellrich S. et al. A T-cell epitope determined with random peptide libraries and combinato- rial peptide chemistry stimulates T cells specific for cutaneous T-cell lymphoma. Annals of Oncology 2000; 11, Supple- ment 1,95-99.