Trombosit-lökosit fonksiyonel etkileşiminin in-vitro koşullarda incelenmesi
Abstract
Amaç: Trombositler ve nötrofiller hemostatik ve inflamatuvar cevapların önemli hücreleridir. Nötrofillerin serbest oksijen radikalleri aracılığı ile doku faktörü üretimi ve trombosit aktivasyonunu düzenleyerek ateroskleroz ve tromboz patogenezinde önemli rol oynayabileceği vurgulanmaktadır. Diğer yandan trombositlerin de inflamasyonda rolü olabileceği düşünülmektedir. Sunulan çalışmada sağlıklı genç erişkinlerden alınan kan örneklerinde trombosit-nötrofil fonksiyonel etkileşiminin in-vitro koşullarda araştırılması planlanmıştır.Gereç ve Yöntem: 19 ile 26 yaşları arasında, sağlıklı 14 erkek gönüllü çalışmaya alındı. Çalışmanın ilk aşamasında trombositten zengin plazmaya eklenen nötrofil süspansiyonunun impedans tekniği ile ölçülen hücreler arası agregasyona etkisi araştırıldı. İkinci aşamada trombinle inkübe edilen trombositlerden elde edilen süpernatantın nötrofil süspansiyonunda agregasyona ve kemiluminesansa etkisi araştırıldı. İmpedans tekniği kullanılarak değerlendirilen nötrofil agregasyonu ve lumi-agregometre kullanılarak nötrofil kemiluminesansı ölçüldü. Üçüncü aşamada N-formyl-Lmethionyl-L-Leucyl-L-Phenylalanine (FMLP) ile uyarılan nötrofillerden elde edilen süpernatantın trombosit süspansiyonunda agregasyon ve ATP sekresyonu üzerine etkisi araştırıldı.Bulgular: Çalışmanın ilk aşamasında yüzeye (elektrodlara) tutunmuş trombositlere nötrofil eklenmesinin agregasyon şiddeti üzerine etki göstermediği gözlendi. İkinci aşamada trombinle inkübe edilen trombositlerin sekretuvar ürünlerinin nötrofil agregasyonunu azalttığı (p < 0.05), oysa nötrofil kemiluminesansını artırdığı (p < 0.05) saptandı. Çalışmanın üçüncü aşamasında FMLP ile uyarılan nötrofillerden elde edilen süpernatantın trombosit agregasyonu ve ATP sekresyonu üzerine etkisinin olmadığı saptandı.Sonuç: Sunulan çalışma trombosit kökenli ürünlerin nötrofil fonksiyonlarını etkilediğini gösterdi. Çok basamaklı ve karmaşık bir süreç olan nötrofil aktivasyonunda bu ürünlerin rollerinin ayrı ayrı incelenmesi gerektiği sonucuna varıldı.
Keywords
Trombosit agregasyonu, trombosit sekresyonu, nötrofil agregasyonu, nötrofil kemiluminesansı
References
- Maschio D, Dejena E, Bazzoni G. Bidirectional modulation of platelet and polymorphonuclear leukocyte activities. Ann Hematol 1993; 67:23-31.
- Cadrey Y, Dupovy D, Boneu B et al. Polymorphonulear leukocytes modulate tissue factor production by mononuclear cells: role of reactive oxygen species. J Immunol 2000; 164:3822-3828.
- Klebanoffs CRA. Neutrophil-platelet interaction mediated by myeloperoxidase and hydrogen peroxidase. J Immunol 1980; 124:399.
- Brandt E et all. The (TG and PF4; blood platelet-derived CXC chemokines with divergent roles in early neutrophil regulation. Leukoc Biol 2000; 67:471-478.
- Ehlert JE et all. Down-regulation of neutrophil functions by the ELR(+) CXC chemokine platelet basic protein. Blood 2000; 96:2965-2972.
- Napota K et all. Activated platelets induce superoxide anion release by monocytes and neutrophils P-selectin. J Immunol 1993; 151:3267-3273.
- Ruf A. et al. Contact-induced neutrophil activation by platelets in human cell suspensions and whole blood. The American Society of Hematology 1992; 80:1238-46.
- Ruf A. et al. Platelet-induced neutrophil activation: platelet- expressed Şbrinogen induces the oxidative burst in neutrophils by an interaction with CD11c/CD18. Br J Haematol, 1995; 90:791- 96.
- Aziz KA, Cawley JC, Zuzel M. Platelets prime PNL via released PF4. mechanism of priming and synergy with GM-CSF. British Journal of Haematology 1995; 91:846-853.
- Packham MA, Kinlough-Rathbone RL, Mustard JF. Thromboxane A2 Causes Feedback AmpliŞcation Involving Extensive Thromboxane A2 Formation on Close Contact of Human Platelets in Media With a Low Concentration of Ionized Calcium. Blood 1987; 70:647-51.