Abstract
Bitki hücrelerinde amino asitlerin membranlardan geçişi genellikle taşımayı proton taşıma gücüne bağlayan bir amino asit taşıyıcısı gerektirir. Son yıllarda çeşitli moleküler ve biyokimyasal yaklaşımlar kullanılarak bir çok amino asit taşıyıcısı karakterize edilmiştir. Genleri tanımlamak için yaygınca kullanılan bir başka yöntem ise T-DNA ile mutasyona uğratılmış tohumların arasında mutant fenotipler aramaktır. Bu çalışmada bir T-DNA mutantı tohum populasyonu yüksek valin ihtiva eden ortamda taramaya tabi tutularak bir valin taşıma eksikliği gösteren mutant bitki izole edildi. Southern Blot metoduyla yapılan analiz, mutant bitkinin genomuna sadece bir T-DNA molekülünün eklendiğini gösterdi. Radyoaktif karbonla (14C) işaretlenmiş amino asitlerle yapılan ‘tüm fide taşıma’ deneyinin, mutant bitkinin dokularına valin alımının azalmış olduğunu göstermesi, mutasyona uğramış olan genin bir valin taşıyıcısı olduğu hipotezini güçlendirmektedir
Keywords
Physiological and Molecular Analysis of a Valine Resistant Mutant in Arabidopsis thaliana
Abstract
The passage of amino acids across membrane barriers in plant cells usually requires an amino acid transporter which links the transport to the proton motive force. In recent years many amino acid transporters have been characterized using various molecular and biochemical approaches. Another commonly used approach to identify genes, is to look for mutant phenotypes in T-DNA insertion mutagenized plants. A TDNA tagged Arabidopsis seed population was screened with high concentrations of valine, and a putative valine transport mutant was isolated. Southern blotting displayed a single T-DNA insertion in the genome. Valine uptake deficiency of the mutant plant revealed by the whole seedling uptake assays using 14C-labeled amino acids supports the hypothesis that the mutated gene is a valine transporter
Keywords
