Heat Shock Protein 70 extraction from human tooth for ELISA
Abstract
Abstract
Protein extraction from bone is extremely difficult task because the bone tissue is hard to dissolve. Special care must be taken during extraction to prevent protein degradation and/or unfolding. Boiling is a traditional method for extracting protein from bones, but heat denaturation during this process destroys tertiary structure of some proteins irreversibly. Dental sciences employ tooth based research and extraction of proteins or other macromolecules from tooth are required most of the time. A new method was developed in our laboratory to extract proteins from tooth. This method overcomes heat or chemical denaturation of proteins and requires couple days. Although the method extract relatively less protein, the total amount of protein is sufficient for ELISA and proteomics.
Keywords: Heat Shock Protein 70, tooth, ELISA
Özet
ELISA için insan dişinden ısı şok protein 70 ekstraksyonu
Kemikten protein ekstraksyonu kemik dokusunun çözülmesi oldukça kısıtlı olduğundan zor bir işlemdir. Ekstraksyon sırasında protein yıkımı ve/veya katlanmasını engellemek için özel önlem alınmalıdır. Kaynatmak kemiklerden protein çıkartmak için geleneksel bir yöntemdir fakat bu işlem süresince ısı kaynaklı denatürasyon bazı proteinleri geri dönüşümsüz üçüncül yapılarını bozarlar. Diş bilimleri çoğu kez diş ile ilgili çalışmalar, dişten protein veya diğer moleküllerin ekstraksiyonunu gerektirir. Laboratuarımızda dişten protein ekstraksyonu için yeni bir metot geliştirildi. Bu metot ısı ve kimyasal denaturasyonun önüne geçer ve bir kaç gün gerektirir. Yeni metot göreceli az protein ekstrakte etsede, elde edilen toplam protein ELISA ve proteomik çalışmaları için yeterlidir.
Anahtar Sözcükler: Isı şok protein 70, diş, ELISA
Keywords
References
- Jiang X, Ye M, Jiang X, Liu G, Feng S, Cui L, Zou H. Method development of efficient protein extraction in bone tissue for proteome analysis. J Proteome Res. 2007 Jun;6(6):2287-94. Epub 2007 May 8. 2007 Nov;6(11):4528.
- Sens DA, McGuirt JP, Khan W, Howell RM, Todd JH. Expression of hsc 70, but not hsp 70, in human third molar dental pulp. Eur J Oral Sci. 1997 Jun;105(3):271-7.
- Sharma D, Masison DC. Protein Pept Lett. 2009;16(6):571-81. Review. Hsp70 structure, function, regulation and influence on yeast prions.
- Tutar Y, Song Y, Masison DC. Genetics. 2006 Feb;172(2):851-61. Epub 2005 Nov 19. Primate chaperones Hsc70 (constitutive) and Hsp70 (induced) differ functionally in supporting growth and prion propagation in Saccharomyces cerevisiae.
- Sharma D, Martineau CN, Le Dall MT, Reidy M, Masison DC, Kabani M. Function of SSA subfamily of Hsp70 within and across species varies widely in complementing Saccharomyces cerevisiae cell growth and prion propagation. PLoS One. 2009 Aug 14;4(8):e6644.
- Song Y, Wu YX, Jung G, Tutar Y, Eisenberg E, Greene LE, Masison DC. Role for Hsp70 chaperone in Saccharomyces cerevisiae prion seed replication. Eukaryot Cell. 2005 Feb;4(2):289-97.
- Tutar L, Tutar Y. Heat Shock Proteins; An Overview. Curr Pharm Biotechnol. 2010 Feb 16.
- Bukau B., Deuerling E., Pfund C. and Craig E. A. Getting newly synthesized proteins into shape. Cell. 2000 101:119–122
Details
Primary Language
English
Subjects
-
Journal Section
-
Authors
Publication Date
April 5, 2013
Submission Date
April 5, 2013
Acceptance Date
-
Published in Issue
Year 2010 Volume: 1 Number: 2