Evaluation of etiologic agents in bacterial vaginosis by molecular methods

Abstract

Abstract

Aim. To investigate the distribution of etiologic agents in bacterial vaginosis (BV) by conventional and molecular methods and evaluate the pros and cons for each method. Methods. One hundred sexually active women with vaginal discharge and 100 sexually active healthy women were enrolled in a cross-sectional case control study. Vaginal swabs were obtained from all women, and aerobic cultures and multiplex polymerase chain reaction (PCR) was used for evaluation. The outcomes of two groups were compared for each diagnostic method. Results. In the study group (n=100), G. vaginalis (10%), M. hominis (5%), U. urealyticum (2%), E. coli (8%), C. albicans (8%), and other candida species (4%) were detected by aerobic culture; and G. vaginalis (72%), A. vaginae (39%), M. mulieris (6%), B. fragilis (2%), M. curtisii (2%) were detected by PCR. In the control group (n=100), U. urealyticum (7%), M. hominis (6%), E. coli (4%), C. albicans (3%), and other candida species (4%), and Klebsiella spp. (1%) were detected by aerobic culture; and G. vaginalis (68%), A. vaginae (25%), M. curtisii (12%), B. fragilis (6%), and M. mulieris (3%) were detected by PCR. A. vaginae was positive in 39% and 25% of women in study and control groups, respectively. (p=0.048) M. curtisii was positive in 2% and 12% of women in study and control groups, respectively. (p=0.012). Conclusions. Conventional culture is more effective for G. vaginalis in distinguishing between symptomatic and asymptomatic women. PCR may be a good alternative for rare BV agents, since their growth in conventional culture is difficult and anaerobic culture is time consuming.

Keywords: Gardnerella vaginalis, bacterial vaginosis, polymerase chain reaction, vaginal flora

Özet

Amaç. Bakteriyel vaginoza neden olan etiyolojik ajanların dağılımını saptamak ve buna bağlı olarak ampirik tedavide kullanılabilecek antimikrobiklere yönlendirme açısından yardımcı olmak. Yöntem. Çalışmamızda İstanbul Üniversitesi Cerrahpaşa Tıp Fakültesi Kadın Doğum Polikliniği’ne başvuran cinsel aktif, vaginal akıntı şikayeti olan 100 kadın hasta çalışma grubu olarak alınmıştır. Herhangi bir şikayeti olmayan, kontrol amacıyla polikliniğe gelen cinsel aktif 100 kadın kontrol grubu olarak alınmıştır. Örneklere aerob kültür yapılmış ve anaerob etkenler için multiplex PZR (polimeraz zincir reasiyonu) yapılmıştır. Bulgular. Kültür ile hasta grubunun 10’unda (%10) G. vaginalis, 5’inde (%5) M. hominis, 2’sinde (%2) U. urealyticum, 5’inde (%5) E. coli, 8’inde (%8) C. albicans ve 6’sında (%6) Candida spp. üredi. PZR ile hasta grubunun 72’sinde (%72) G. vaginalis, 39’unda (%39) A. vaginae, 6’sında (%6) M. mulieris, 2’sinde (%2) B. fragilis ve 2’sinde (%2) M. curtisii pozitif olarak bulundu. Kontrol grubu kültürlerinin ise 7’sinde (%7) U. urealyticum, 6’sında (%6) M. hominis, 4’ünde (%4) E. coli, 1’inde (%1) Klebsiella spp., 3’ünde (%3) C. albicans ve 4’ünde (%4) Candida spp. üredi. Kontrol grubunun da PZR ile 68’inde (%68) G. vaginalis, 25’inde (%25) A. vaginae, 12’sinde (%12) M. curtisii, 6’sında (%6) B. fragilis ve 3’ünde (%3) M. mulieris’in pozitif olduğu saptandı. PZR yöntemiyle hasta grubunun 39’unda (%39) A. vaginae, 2’sinde (%2) M. curtisii pozitif bulunurken, kontrol grubunun 25’inde (%25) A. vaginae, 12’sinde (%12) M. curtisii pozitif olarak saptandı ve gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı fark bulundu. Sonuçlar. G. vaginalis enfeksiyonlarında kültür, semptomatik ile asemptomatik olguları ayırmakta PZR’ye göre daha etkindir. Nadir bacterial vaginosis etkenlerinin kültürde üretilmesinin zor olması ve özellikle anaerob kültür yönteminin zahmetli olması nedeniyle, PZR iyi bir alternatif olabilir.

Anahtar sözcükler: Gardnerella vaginalis, bakteriyel vajinozis, polimeraz zincir reaksiyonu, vajinal flora.

Keywords

• Gardnerella vaginalis, bacterial vaginosis, polymerase chain reaction, vaginal flora

-

Öz

Amaç. Bakteriyel vaginoza neden olan etiyolojik ajanların dağılımını saptamak ve buna bağlı olarak ampirik tedavide kullanılabilecek antimikrobiklere yönlendirme açısından yardımcı olmak. Yöntem. Çalışmamızda İstanbul Üniversitesi Cerrahpaşa Tıp Fakültesi Kadın Doğum Polikliniği’ne başvuran cinsel aktif, vaginal akıntı şikayeti olan 100 kadın hasta çalışma grubu olarak alınmıştır. Herhangi bir şikayeti olmayan, kontrol amacıyla polikliniğe gelen cinsel aktif 100 kadın kontrol grubu olarak alınmıştır. Örneklere aerob kültür yapılmış ve anaerob etkenler için multiplex PZR (polimeraz zincir reasiyonu) yapılmıştır. Bulgular. Kültür ile hasta grubunun 10’unda (%10) G. vaginalis, 5’inde (%5) M. hominis, 2’sinde (%2) U. urealyticum, 5’inde (%5) E. coli, 8’inde (%8) C. albicans ve 6’sında (%6) Candida spp. üredi. PZR ile hasta grubunun 72’sinde (%72) G. vaginalis, 39’unda (%39) A. vaginae, 6’sında (%6) M. mulieris, 2’sinde (%2) B. fragilis ve 2’sinde (%2) M. curtisii pozitif olarak bulundu. Kontrol grubu kültürlerinin ise 7’sinde (%7) U. urealyticum, 6’sında (%6) M. hominis, 4’ünde (%4) E. coli, 1’inde (%1) Klebsiella spp., 3’ünde (%3) C. albicans ve 4’ünde (%4) Candida spp. üredi. Kontrol grubunun da PZR ile 68’inde (%68) G. vaginalis, 25’inde (%25) A. vaginae, 12’sinde (%12) M. curtisii, 6’sında (%6) B. fragilis ve 3’ünde (%3) M. mulieris’in pozitif olduğu saptandı. PZR yöntemiyle hasta grubunun 39’unda (%39) A. vaginae, 2’sinde (%2) M. curtisii pozitif bulunurken, kontrol grubunun 25’inde (%25) A. vaginae, 12’sinde (%12) M. curtisii pozitif olarak saptandı ve gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı fark bulundu. Sonuçlar. G. vaginalis enfeksiyonlarında kültür, semptomatik ile asemptomatik olguları ayırmakta PZR’ye göre daha etkindir. Nadir bacterial vaginosis etkenlerinin kültürde üretilmesinin zor olması ve özellikle anaerob kültür yönteminin zahmetli olması nedeniyle, PZR iyi bir alternatif olabilir.

Anahtar Kelimeler

• Gardnerella vaginalis, bakteriyel vajinozis, polimeraz zincir reaksiyonu, vajinal flora

References

1. References
2. Atasu T., Sahmay S. [Article in Turkish] Jinekoloji (Kadin Hastaliklari), Nobel Tip Kitabevleri,2001; 231-241.
3. Balci O., Capar M. [Article in Turkish] Vaginal enfeksiyonlar. Turk Jinekoloji ve Obstetrik Dernegi derg. 2005; 2(5): 14-20.
4. Duran N., Culha G., Cetin M., Zeteroglu S., Gungoren A., Hakverdi A.U. [Article in Turkish] Genital enfeksiyon suphesi olan adolesan ve yetiskin kadinlarda enfeksiyon etkenleri. Tip arastirmalari dergisi 2005; 3(2): 13-19
5. Aydin F., Tosun I., Kaklikkaya N., Yazici Y. Frequency of bacterial vaginosis among women attending for intrauterine device insertion at an inner-city family planning clinic. Eur J Contracept Reprod Health Care. 2003 Sep; 8(3): 135-138.
6. Barbone F., Austin H., Low W.C., Alexander W.J. A follow-up study of methods of contraception, sexual activity and rates of trichomoniasis, candidiasis and bacterial vaginosis. Am J Obstet Gynecol 1990; 163: 510-514.
7. Borekci B., Ingec M., Aktas O. [Article in Turkish] Jinekolojik sikayetleri olan hastalarda vaginal mikroflora uzerine bir arastirma. MJAU 2003; 35: 57-60.
8. Bump R. C., Buesching W. D. Bacterial vaginosis in virginal and sexually active adolescent females: evidence against exlusive sexual transmission. Am. J obstet Gynecol. 1988; 158: 935-939.

9. Erdem H., Cetin M., Timuroglu T., Cetin A., Yanar O., Pasha A. Identification of yeasts in public hospital primary care patients with or without clinical vaginitis. Aust NZJ Obset Gynaecol, 2003; 43(4): 312-6.
10. Ling Z., Kong J., Liu F., Zhu H., Chen X., Wang Y., Li L., Nelson K.E., Xia Y., Xiang C. Molecular analysis of the diversity of vaginal microbiota associated with bacterial vaginosis. BMC Genomics. 2010;11 :488.
11. Bahar H., Torun M.M., Ocer F., Kocazeybek B. Mobiluncus species in gynaecological and obstetric infections: antimicrobial resistance and prevalence in a Turkish population. Int J Antimicrob Agents. 2005; 25(3): 268-271.
12. Findik D., Guler L., Soysal S. [Article in Turkish] Vagina akintisi orneklerinin mycoplasma ve nonspesifik bakteriler yonunden degerlendirilmesi. Infeksiyon Dergisi 1996; 410(1): 51-54.
13. Pingmin W, Yuepu P, Jiwen Z. Prevalence survey on condom use and infection of urogenital mycoplasmas in female sex workers in China. Contraception. 2005 Sep;72(3):217-20.
14. Yavuzdemir S., Bengisun S., Gungor C., Ciftcioglu N., Ozenci H., Vardar G. [Article in Turkish] Vaginal akintisi olan kadinlarda G. vaginalis, Mikroplazma ureaplazma T. vaginalis, maya N. gonorrhoeae ve diger bakterilerin sikligi. Mikrob Bult. 1992; 26: 139 -143.
15. Holst E., Goffeng A.R., Andersch B. Bacterial vaginosis and vaginal microorganisms in idiopathic premature labor and association with pregnancy outcome. J Clin Microbiol. 1994; 32(1): 176-86.
16. Hillier S.L., Krohn M.A., Rabe L.K., Klebanoff S.J., Eschenbach D.A. The normal vaginal flora H2O2 producing lactobacili and bacterial vaginosis in pregnant women. Clin. Infec. Dis. 1993; 16: (Suppl) 273-278.
17. Hillier S. L., Cassen E., Easterling T. R., Rabe L. K., Eschenbach D. A. The role of bacterial vaginosis and vaginal bacteria in amniotic fluid infection in women in preterm labor with intact fetal membranes. Clin. Infect. Dis. 1995; 20(Suppl. 2): 276-278.
18. Haznedaroglu T., Hakbilen S., Baysallar M., Kisa O., Basustaoglu A., Gun H. [Article in Turkish] Vaginit etkeni olabilecek mikroorganizmalarin sikligi ve tani yontemlerinin karsilastirilmasi. Infek. Derg. 1995; 9: 121-124
19. Ermis H., Baysal B., Isildaksoy N., Ibrahimoglu L. [Article in Turkish] Normal vaginal floranin servikal erozyon ve bazi kontraseptif yontemlerle degisimi. Haseki Tip Bulteni, 1995; 33(1): 13-16.