Bu çalışmada deney hayvanı olarak
kullanılan farelerde in vitro fertilizasyon için
önerilen yöntemlerin denenınesi ve in vitro yolla
fertilizasyon olgusunun gerçekleştirilmesi amaç-
lanmıştır.
Çalışmada ovum elde etmek amacıyla
seksüel olgunluğa ulaşmış İsviçre albinosudişi farelere
48 saat ara ile önce PMSG daha sonra HCG
hormonu enjekte edilerek süperovulasyon
oluşturuldu.
Ovumlar, HCG enjeksiyonundan 16 saat
sonra fareler öldürilierek cumulus oophorus
hücrP.lert ile birlikte elde edildi ve sıvı paratin ile
kaplanm_lş, ortasında 0.4 ml vasat bulunan petri
kabındaki vasat içerisine kondu.
Sperinatozoitler ise İsviçre albinosu olgun
erkek farelelin cauda epididimislerinden sağlandı
ve 37°C'dek! '?';) 5 co2 ·H etüvde 1.5-2 saat süreyle
tnkübe edildi. !nkübasyon vasatı olarak glukoz,
sodyum ptruvat, sığır serum albumini ve antibiyotikleri
ihtiva eden TiiY vasatı kullanıldı.
Daha sonra önceden hazırlanmış bulunan
spermatozoit süspansiyonundan ı 0-20 J.L]. bir pipet
yardımıyla alınarak ovumlann bulunduğu petri
kabına ilave edildi ve 6 saat süreyle birarada
inkübasyona bırakıldılar. Bunu takiben ilk deneme
grubundaki fertilize ovumlar aynı vasat içerisinde
bırakılmalanna karşın ikinci deneme grubundaki
fertilize ovumlar gelişme vasatı olan, ancak sodyum
laktat içermeyen Modifiye Whitten's vasatma
nakledildi ve 37°C'deki % 5 C02'li etüvde
inkübasyonu takiben mikroskop altında kontrol
edildiler.
Sonuç olarak Ovum ve spermatozoitlerin birarada
inkübasyonlan sonucu ovumlann fertilizasyonlan
sağlanmış ancak daha ileri bölünme
aşarnalanna kadar geliştirilememiştir.
The aim of this study was to test
the recommended techniques of in vitro fertilization
in Iriice as an expeıimental animaL
Adult female mice of Swiss albino strain
were superovulated by intrapeıitonal injection of
PMSG and HCG 48 hours apart. They were killed
16 hours after injection of HCG and their eggs
were recovered under warm oil in a plastic dish
containing 0.4 ml of ineubatian medium.
Sperms recovered from cauda epididymis of
adult males of the same strairi were suspended in
a medtum and incubated at 37° C under % 5 co2
in air for 1.5-2 hours before they were used for insemination.
The ineubatian medium was TifY medium
containing glucose, sodium pyruvate, bovine
albumtn and antibiotics.
At the time of insemination, a drop of sperm
suspension (10-20 J.L].) was added to the medium
contatning egg clot. Eggs and sperms were incubated
in ineubatian medium for 6 hours. In the fırst
group, fertilized eggs were left into the ~ame medium.
In the second group they were transferred to
the development medium (Modifıed Whitten's) without
sodium lactate and incubated until they were
examtned under stereo-microscope.
As a conclusion, in this study fertilized eggs
and 2-cell stage embıyos were obtained but further
stage of embıyos {morulae, blastocyst) couldn't be
reached.
Other ID | JA74DG98TU |
---|---|
Journal Section | Research |
Authors | |
Publication Date | March 1, 1990 |
Published in Issue | Year 1990 Volume: 6 Issue: 1 |