Triamsinolonun Subretinal Sıvıda Valide Edilmiş HPLC Yöntemi ile Tayini

Year 2005, Issue: 2, 71 - 78, 01.06.2005

Emirhan Nemutlu Filiz Sayın Umut Altuner Nursabah Başçı

Abstract

Triamsinolonun subretinal sıvıdan tayini için ters faz yüksek performanslı sıvı kromatografik yöntem tanımlanmıştır. Triamsinolon ve iç standart prednisolon Nucleosil 100-5 C18 150 x 4.6 mm, 5 μm i.d. ters faz kolonu metanol:su 60:40, h/h içeren hareketli faz ile elue edilmiştir. Hareketli faz akış hızı 1.5 ml dak-1 ve fotodiyot array dedektör dalgaboyu 250 nm dir. Triamsinolon ve IS alıkonma zamanları sırasıyla 4.0 and 2.9 dakikadır. Yöntemin doğrusallık aralığı 0.017-1.00 μg mL–1 arasındadır. Saptama sınırı LOD ve tayin alt sınırı LOQ sırasıyla 12 ng mL–1 ve 17 ng mL–1’dir. Triamsinolonun subretinal sıvıdan geri kazanımı %99.30 ± 0.63 olarak hesaplanmıştır. Geliştirilen yöntemin gün içi ve günler arası tekrarlanabilirlik çalışmalarında yüzde bağıl hata %2.5’den küçük ve yüzde bağıl standart sapma % 2’den küçük bulunmuştur. Ayrıca, yöntem hastalardan sağlanan subretinal sıvı numunelerinin analizinde başarıyla uygulanmıştır.

Keywords

Triamsinolon, HPLC, Validasyon, Subretinal sıvı

Determination of Triamcinolone in Subretinal Fluid by a Validated HPLC Method

Abstract

A reversed-phase high-performance liquid chromatographic method is described for the determination of triamcinolone in subretinal fluids. Triamcinolone and the internal standard prednisolone IS were determined using a reversed-phase column Nucleosil 100-5 C18, 150 x 4.6 mm, 5 μm i.d. eluted with a mobile phase containing methanol:water 60:40, v/v at a flow-rate of 1.5 mL min-1. Photodiode array detector was set to 250 nm. The retention times for triamcinolone and IS were 4.0 and 2.9 min, respectively. The linearity range was found to be in the range of 0.017-1.00 μg mL–1. LOD and LOQ values were 12 ng mL–1 and 17 ng mL–1, respectively. The recovery of triamcinolone from subretinal fulid was 99.30 ± 0.63 %. In intra-day and inter-day studies, the developed method was found to be accurate and precise with a bias value less than 2.5 % and the RSD value less than 2 %. In addition, the method was successfully applied to the analysis of triamcinolone in subretinal samples obtained from patients.

Keywords

Triamcinolone, HPLC, Validation, Subretinal fluid