Sıçan Dorsal Kök Ganglion Sinir Hücre Kültürlerinde Hücre İçi Kalsiyum Depolarında Kafeine Duyarlı Kalsiyum Salıverilmesinin Elektrofizyolojik Ve Farmakolojik İncelenmesi

Abstract

Electrophysiological and Pharmacological Investigation of Caffeine-Sensitive Calcium Release From Intracellular Calcium Stores in Cultured Rat Dorsal Root Ganglion Neurones The aim of this study was to investigate the actions of caffeine on intracellular calcium stores in cultured rat dorsal root ganglion (DRG) neurones using whole cell variant of the patch clamp and calcium imaging techniques. Extracellular caffeine (ImM) application activated inward currents in the presence and absence of extracellular Ca2+ but fail to activate any current when intracellular Ca2+ buffering capacity increased (using 20 mM EGTA), dantrolen or ryanodine was applied to the cells by the patch pipette solution. Calcium imaging studies using fura-2 confirmed the electrophysiological findings and provided further piece of evidence for ■ caffeine-induced Ca2+ calcium release from ryanodine/dantrolene-sensitive intracellular Ca2+ stores. In conclusion caffeine releases Ca2+ from intracellular stores in DRG neurones and this effect of caffeine is sensitive to dantrolene. Bu çalışmanın amacı sıçan dorsal kök gangliyon (DKG) sinir hücre kültürlerinde kafeinin hücre içi kalsiyum depolarına etkisini tüm hücre diyaliz patch kenetleme ve kalsiyum görüntüleme teknikleri kullanılarak araştırmaktır. Kafein (İmM) uygulaması hem eks-trasellüler kalsiyum varlığında hem de kalsiyumsuz ekstrasellüler kayıt solüsyonu kullanıldığında içe yönelik membran akımlarını aktive etti. Hücre içi kalsiyum bağlama kapasitesinin 20 mM EGTA kullanılarak artırılması, dantrolen veya ryanodinin hücre içine uygulanması ile kafeinin etkisi önlendi. Fura-2 kullanılarak gerçekleştirilen kalsiyum görüntüleme deneyleri elektrofizyolojik bulgularla uyumlu olarak kafeinin bu hücrelerde hücre içi ryanodin/dan trol ene duyarlı Ca2+ depolarından kalsiyum salıverilmesine yol açtığını gösterdi. Sonuç olarak kafein sıçan DKG sinir hücrelerinde hücre içi depolardan kalsiyum salıvermektedir ve kafeinin bu etkisi dantrolene duyarlıdır.

Keywords

• -