Enteral beslenme ürünlerindeki toplam vitamin C miktarının HPLC yöntemi ile belirlenmesi

Öz

Amaç: Belli bir beslenme gereksinimi bulunan hastaların diyetlerini düzenlemek amacıyla tıbbi gözetim altında kullanılan özel olarak üretilmiş veya formüle edilmiş enteral beslenme ürünleri; suda çözünen vitaminler ile yağda çözünen vitaminleri içermektedirler. Suda çözünen vitamin grubu içinde yer alan vitamin C bir başka adıyla askorbik asit, pek çok vücut fonksiyonu için önemli bir vitamindir. Bu çalışmada, söz konusu ürünlerdeki toplam vitamin C miktarının tayinine yönelik olarak UV dedektörü 280 nm ile kolay, spesifik, duyarlı yüksek basınçlı sıvı kromatografi HPLC yönteminin uygulanabilirliğini tespit etmek amaçlanmıştır.Yöntem: Toplam 28 adet enteral beslenme ürünündeki toplam vitamin C miktarının belirlenmesi için HPLC yöntemi kullanılmıştır. Kromatografik sistem; C–18 kolon 250x4,60 mm-5µ ve 280 nm’ye ayarlı UV dedektör kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Mobil faz olarak 1 ml/dak akış hızında hekzansülfonik asit sodyum tuzu içeren tampon ve metanol 98:2 kullanılmıştır. Enteral beslenme ürünlerinde belirlenen toplam vitamin C miktarı ile ürün etiketlerinde beyan edilen miktarlar arasındaki ilişki bağımsız gruplarda T-testi kullanılarak, istatistiksel yönden değerlendirilmiştir.Bulgular: Enteral beslenme ürünlerindeki toplam vitamin C miktarı HPLC yöntemi ile belirlenmiş ve toplam vitamin C miktarı 3,9–52,20 mg/100 ml arasında bulunmuştur. İstatistiksel değerlendirme ile bulunan değerlerin ürün etiketlerinde beyan edilen değerlere uygunluk gösterdiği belirlenmiştir p>0,05 . Toplam vitamin C’nin alıkonma süresi yaklaşık beş dakika olarak tespit edilmiştir. Dedeksiyon limiti LOD ise 0,005 mg/100 ml olarak saptanmıştır.Sonuç: Enteral beslenme ürünlerindeki toplam vitamin C miktarının belirlenmesinde HPLC-UV yönteminin kullanılabileceği görülmüş ve yöntemin duyarlı olması, uygulama süresi ile kolaylığı açısından avantajlı olduğu düşünülmüştür. Ayrıca, bu ürünler için beyan edilen vitamin C miktarının doğruluğu onaylanmıştır

Anahtar Kelimeler

• Enteral beslenme, diyet formülasyon, vitamin C (askorbik asit), HPLC

Quantitative determination of total vitamin C in enteral nutrional products by using HPLC

Abstract

Objective: Enteral nutritional products intended for the dietary management of patients and require to be used under medical supervision are specially processed or formulated. These products contain water soluble and fat soluble vitamins. The vitamin C ascorbic acid which is one of the water soluble vitamins is a important vitamin for many body functions. The aim of this study is to determine the applicability of UV detection 280 nm method by the simply, specific and sensitive high pressure liquid chromatography HPLC for quantitative estimation of total vitamin C levels in enteral nutritional products. Method: HPLC method was used for quantitative determination of total vitamin C in total 28 enteral nutritional products. The chromatographic system was done on a C18 column 250x4.60 mm-5 µ with UV detection at 280 nm. Buffer containing hexanesulphonic acid sodium salt and methanol 98:2 was used as the mobile phase at a flow rate of 1 mL/min. In statistical evaluation; the relationship between the values determined for enteral nutrition products and the values declared on the labels of the products was made according to independent samples T-Test.Results: HPLC method was used for quantitative determination of total vitamin C in enteral nutritional products. The values of total vitamin C of the products ranged from 3.9 to 52.20 mg/100 ml. In the statistical evaluation, it was observed that the values determined for enteral nutrition products were similar to the values declared on the labels of the products p>0.05 . The retention time of vitamin C was determined as ca. five min. It was also found that the detection of limit LOD is 0.005 mg/100 ml. Conclusion: It was showed that HPLC-UV can be applied for the quantitative determination of total vitamin C levels in enteral nutritional products. This had the advantages of improved simplicity, sensitivity and shorter application times. Also, it is approved that the values of total vitamin C declared on the labels of these products are accurate.

Keywords

• Enteral nutrition, diet formulation, vitamin C (ascorbic acid), HPLC

References

1. Arslan P. Enteral beslenme ürünleri. In: Sağlık Bakanlığı. Gıda Denetçi Eğitim Materyali. 1. Basım. Ankara: Aydoğdu Ofset Baskı, 1998: 515-6.
2. Özdener H, Çelik C. Vitamin C’nin metabolik ve klinik önemi, yeni yaklaşımlar. T Klin Tıp Bilimleri, ; 13: 200-10. Okiei W, Ogunlesi M, Azeez L, Obakachi V, Osunsanmi M, Nkenckor G. The voltammetric and titrimetric determination of ascorbic acid levels in tropical fruit samples. Int J Electrochem Sci, 2009; : 276-87.
3. Sultan SM, Abdennabi AM, Suliman FE. Flow injection colorimetric method for the assay of vitamin C in drug formulations using tris, 1-10- phenanthroline-iron (III) complex as an oxidant in sulfuric acid media. Talanta, 1994; 41 (1): 30.
4. Sultan SM, Walmsley AD. Simultaneous kinetic method for the determination of vitamin C, citrate and oxalate employing the kalman fitler. Analyst, ; 122: 1601-4.
5. Danielczuk J, Pietrzykowski R, Zieliński W. Comparative study of the enzymatic method for determination of vitamin C with routine methods according to ISO. Pol J Food Nutr Sci, 2004; 13/54 (1): 41-6.
6. Bajaj KL, Kaur G. Spectrophotometric determina- tion of L-ascorbic acid in vegetables and fruits. Anaylst, 1981; 106: 117-20.
7. Hernanz A. High-performance liquid chromatog- raphic determination of ascorbic acid in serum using paired-ion chromatography and UV spectrop- hotometric detection. J Clin Chem Clin Biochem, ; 26 (7): 459-61.
8. Ertaş E. Yüksek basınçlı sıvı kromatografi tekniği uygulamaları eğitim notları. Gebze: TÜBİTAK MAM Gıda Bilimi ve Teknolojisi Araştırma Enstitüsü. ; 1-34.

9. Speek AJ, Schrijver J, Schreurs WHP. Fluorometric determination of total vitamin C in whole blood by high-performance liquid chromotography with pre-coloumn derivatization. J Chromatogr B, 1984; (1): 53-60.
10. Heudi O, Kilinc T, Fontannaz P. Separation of water-soluble vitamins by reversed-phase high performance liquid chromatography with ultra- violet detection: application to polyvitaminated premixes. J Chromatogr A, 2005; 1070 (1-2): 49-56.
11. Gazdik Z, Zitka O, Petrlova J, Adam V, Zehnalek J, Horna A, et al. Determination of vitamin C (as- corbic acid) using high performance liquid chroma- tography coupled with electrochemical detection. Sensors, 2008; 8: 7097-112.
12. Kaynar P, Canbolat M, Bingöl M, Polat A. Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 miktarının HPLC ile belirlenmesi. Türk Hij Den Biyol Derg, 2007; 64 (3): 5-9.
13. Friel JK, Bessie JC, Belkhode SL, Edgecombe C, Steele-Rodway M, Downton G, et al. Thiamine, riboflavin, pyridoxine and vitamin C status in premature infants receiving parenteral and enteral nutrition. J Pediatr Gastr and Nutr, 2001; : 64-9.
14. Gökmen V, Acar J. HPLC ile gıdalardaki toplam vitamin C miktarının saptanması. Gıda San Derg, ; 39: 19-20. Behrens WA, Madere R. Ascorbic and dehydroascorbic acid content of infant formula. J Food Compos and Anal, 1989; 2 (1): 48-52.
15. Fontannaz P, Kilinç T, Heudi O. HPLC-UV determination of total vitamin C in a wide range of fortified food products. Food Chem, 2006; 94 (4): 626-31.
16. Odriozola-Serrano I, Hernández-Jover T, Martin- Belloso O. Comparative evaluation of UV-HPLC methods and reducing agents to determine vitamin C in fruits. Food Chem, 2007; 105 (3): 1151-8.
17. Sanchez-Mata FC, Camara-Hurtado M, Diez- Marques C, Torija-Isasa ME. Comparison of high-performance liquid chromatography and spectrofluorimetry for vitamin C analysis of green beans (Phaseolus vulgaris L.). Eur Food Res Techn, ; 210 (3): 220-5.
18. Vinci G, Botrè F, Mele G, Ruggieri G. Ascorbic acid in exotic fruits: a liquid chromatographic investigation. Food Chem, 1995; 53: 211-4.