Hemostatik Ajan Olarak Kullanılan Mecsina Hemostopper®, Ankaferd Blood Stopper® ve Tranexamic Asidin İmmunolojik Özelliklerinin Farklılıklarının Hücre Kültürü Çalışması ile Araştırılması

Öz

Amaç: Tıp ve diş hekimliğinin birçok dalında kanama komplikasyonu, gerçekleştirilen tedaviler sonrası veya sırasında, yapılan işlemin büyüklüğünden bağımsız olarak gelişebilir. Cerrahi işlemler öncesinde ve sonrasında, tıp ve diş hekimliği uygulama prosedürlerinde bir çok biyomalzeme kullanılmıştır. Bu çalışmada kanama durdurucu ajan olarak kullanılan Ankaferd Blood Stopper, Tranexamic acid ve yeni bir kanama durdurucu olan Mecsina Blood Stopper ’ın immünolojik etkinliklerinin ve etkilerinin karşılaştırılması amaçlanmıştır.

Yöntem: Çalışma için insan unbrikalkord hücreleri olan pıhtılaşma ve fibrin oluşumu üzerinde en çok çalışma yapılan HUVEC (Human Umbilical Vein  Endothelial Cell ) ölümsüz hücre hatları ticari olarak satın alındı. Her flaska her bir ilaç için 5000 hücre olacak şekilde 5 gruba (ankaferd, Tranexamic acid, mecsina, distile su uygulanan negative ve hiçbir sey uygulanmayan kontrol ) hücreler dağıtıldı.

Bulgular: Elde ettiğimiz verilere göre 1:2 ve 1:10 konsantrasyonda; mecsina uygulaması yapılan hücrelerde TNF alpha (Tümör Nekrozis Faktör Alfa) seviyeleri diğer ilaç gruplarına göre daha düşük olduğu görülmüştür (p<0,05). IL-1B (İnterlökin 1B) ve IL6 (İnterlökin 6) seviyelerinde hem 1:2 hem de 1:10 konsantrasyonlarında ki tüm ilaç uygulamalarında kontrol grubuna kıyasla anlamlı derecede artış olduğu gözlenmiştir (p<0,05).  TNF alpha seviyelerinde ise 1:2 konsantrasyonda tüm ilaç uygulamalarında kontrole göre artış (p<0,05) gözlenmişken, 1:10 konsantrasyonda mecsina uygulamasında anlamlı bir ilişki görülmemiş (p>0,05) ancak tranexamic acid (TA)  ve ankaferd uygulamalarında ise anlamlı derecede artış olduğu belirlenmiştir (p<0,05).

Sonuç: Sonuç olarak, HUVEC hücre gruplarında farklı konsantrasyonlarda uygulanan farklı anti hemorajik ajanların hücre içi sitokin seviyelerinde önemli ölçüde bir artış meydana getirdiği görülmüştür. Sonuçlar göz önüne alındığında MH (Mecsina Hemostopper) uygulamasının ABS (Ankaferd Blood Stoper) ve özellikle TA (Tranexamic Acid) uygulamalarına kıyasla daha etkili bir anti hemorajik ajan olduğunu söyleyebilmekteyiz. 

Anahtar Kelimeler

• HUVEC,Interleukin-6,Interleukin-1B,Tnf-alpha

Investigation of the Differences of Immunological Characteristics of Mecsina Hemostopper®, Ankaferd Blood Stopper® and Tranexamic Acid Used as Haemostatic Agents with Cell Culture Study

Öz

Objective: Hemorrhagic complications may develop in many branches of medicine and dentistry after or during the treatment independently of the extent of the procedure performed. Various biomaterials have been used in the medical and dental practice procedures before and after surgical procedures. The aim of this study was to compare the immunological efficacies and effects of Ankaferd Blood Stopper, Tranexamic acid used as anti-hemorrhagic agents and Mecsina Blood Stopper, a new anti-hemorrhagic agent.

Method: The immortalized HUVEC (Human Umbilical Vein Endothelial Cell) cell lines, which are human umbilical cord cells and used in many studies on coagulation and formation of fibrin, were commercially purchased for the study. The cells, 5000 cells per flask for each drug, were distributed into the 5 groups (ankaferd, Tranexamic acid, mecsina, distilled water-administered negative and control without any administration).

Results: According to the data we obtained, TNF alpha (Tumor Necrosis Factor Alpha) levels were found to be lower in the cells, to which mecsina was administered at concentrations of 1: 2 and 1:10, than other drug groups (p<0,05). There was a significant increase in IL-1B (Interleukin 1B) and IL6 (Interleukin 6) levels in all drug administrations at both concentrations of 1: 2 and 1: 10 compared to the control group (p <0,05).   While there was no significant increase in TNF alpha levels in all drug administrations at a concentration of 1: 2 (p <0,05), there was no significant correlation in mecsina administration at a concentration of 1:10 (p> 0,05), but a significant increase was found in tranexamic acid (TA) and ankaferd administrations (p <0.05).

Conclusion: In conclusion, it has been observed that different anti-hemorrhagic agents administered at different concentrations in HUVEC cell groups produced a significant increase in intracellular cytokine levels.  Considering the results, we can say that MH (Mecsina Hemostopper) administration is a more effective anti-hemorrhagic agent than administrations of ABS (Ankaferd Blood Stoper) and especially TA (Tranexamic Acid). 

Anahtar Kelimeler

• HUVEC,Interleukin-6,Interleukin-1B,Tnf-alpha

Kaynakça

1. Simsek HO, Tuzum MS, Baykul T, Gurer IE, Bassorgun CI. Experimental investigation of the effects of a blood stopper agent (ankaferd blood stopper) on bone surfaces. Turkish Journal of Hematology 2013; 30(2): 177-183.
2. Lee SJ, Umano K, Shibamoto T, Lee KG. Identification of volatile components in basil (Ocimum basilicum L.) and thyme leaves (Thymus vulgaris L.) and their antioxidant properties. Food Chem 2007; 91(1): 131-137.
3. Goker H, Haznedaroglu IC, Ercetin S, Kirazli S, Akman U, Ozturk Y, et al. Haemostatic actions of the folkloric medicinal plant extract, Ankaferd Blood Stopper. J Int Med Res 2008; 36(1): 163–170.
4. Emes Y, Aybar B, Vural P, Issever H, Yalcın S, Atalay B, et al. Effects of hemostatic agents on fibroblast cells. Implant Dent 2014; 23(6): 641-647.
5. Nuttall GA, Gutierrez MC, Dewey JD, Johnson ME, Oyen LJ, Hanson AC, et al. A preliminary study of a new tranexamic acid dosing schedule for cardiac surgery. J Cardiothorac Vasc Anesth 2008; 22(2): 230-235.
6. Henry DA, Carless PA, Moxey AJ, O'Connell D, Stokes BJ, McClelland B, et al. Anti-fibrinolytic use for minimising perioperative allogeneic blood transfusion. Cochrane Database Syst Rev 2007; 17(4): CD001886.
7. Balvers K, Van Dieren S, Baksaas-Aasen K, Gaarder C, Brohi K, Eaglestone S, et al. Combined effect of therapeutic strategies for bleeding injury on early survival, transfusion needs and correction of coagulopathy. Br J Surg 2017; 104(3): 222-229
8. Cole E, Davenport R, Willett K, Brohi K. Tranexamic acid use in severely injured civilian patients and the effects on outcomes: a prospective cohort study. Ann Surg 2015; 261(2): 390-394.

9. Jimenez JJ, Iribarren JL, Lorente L, Rodriguez JM, Hernandez D, Nassar I, et al. Tranexamic acid attenuates inflammatory response in cardiopulmonary bypass surgery through blockade of fibrinolysis: a case control study followed by a randomized double-blind controlled trial. Crit Care 2007; 11(6): R117.
10. Yılmaz E, Gülec ŞS, Torun D, Haznedaroglu IC, Akar N. The effects of Ankaferd® Blood Stopper on transcription factors in HUVEC and the erythrocyte protein profile. Turk J Hematol 2011; 28(4): 276-285.
11. Bilgili H, Captug O, Kosar A, Kurt M, Kekilli M, Shorgabi A, et al. Oral systemic administration of Ankaferd Blood Stopper has no short-term toxicity in an in vivo rabbit experimental model. Clin Appl Thromb Hemost 2010; 16(5): 533-536.
12. Porte RJ, Leebeek FW. Pharmacological strategies to decrease transfusion requirements in patients undergoing surgery. Drugs 2002; 62(5): 2193-2211.
13. Murkin JM, Falter F, Granton J, Young B, Burt C, Chu M. High-dose tranexamic acid is associated with nonischemic clinical seizures in cardiac surgical patients. Anesth Analg 2010; 110(2): 350-353.
14. Later AF, Sitniakowsky LS, Van Hilten JA, Van De Watering L, Brand A, Smit NP, et al. Antifibrinolytics attenuate inflammatory gene expression after cardiac surgery. J Thorac Cardiovasc Surg 2013; 145(6): 1611-1616.
15. Jones KL, De Kretser DM, Patella S, Phillips DJ. Activin A and follistatin in systemic inflammation. Mol Cell Endocrinol 2004; 225(1-2): 119-125.
16. Lange J, Sapozhnikova A, Lu C, Hu D, Li X, Miclau T et al. Action of IL-1β during fracture healing. J Orthop Res 2010; 28(6): 778-784.
17. Amanvermez R, Gunay M, Piskin A, Keles G, Tomak L. TNF-α, IL-1β, and oxidative stress during fracture healing with or without ankaferd. Bratisl Lek Listy 2013; 114(11): 621-624.