SIĞIRLARIN SERUM FERRİTİN SEViYESİNi TAYİN ETMEK İÇİN FERRİTİN RADIOIMMUNOASSAY (RIA) YÖNTEMİNİN GELİŞTİRİLMESİ

Abstract

Ferritin, sığır dalağından izole edildi, saflaştmldı ve sığırlann serum ferritin seviyesini tayin etmek için radioimmunoassay (RIA) yönteminin geliştirilmesinde kullanıldı. Ferritin izolasyonu ve safIandınıması sırasında safIık kontrolü demir: protein oranları ve % 6'lık poliakrilamit disk gel elektroforez (PAGE) ile gösterildi. Sephadex G-200 kolon kromatografisinden sonra-sığır dalağı ferritininin demir: protein oranının 0,153 olduğu bulundu. Ferritinin % 6'lık ,PAGE geııerinin protein boyaması (NH4)2S04 saturasyon u ve dializden, Sepharose 6B-100 ve Sephadex G-200 kolon kromatografilerinden sonra sırasıyla altı, dört ve üç bant gösterdi. Oysa, PAGE'de bütün basamakların demir boyaması ile üç bant gözlendi. Ferritinin direk ve indirek iyotlama yöntemleri ile iyotlanma verimlerinin sırasıyla % 17 ve % 8 olduğu hesaplandı. Tavşanlarda üretilen sığır antiferritin antikorları, çift antikorlu titre tayini yönteminde 1:10. 000 antiserı}m seyreltmesi ile % 40 bağlanma gösterdi. RIA standart eğrisi 2-400 ng / mi arası sığır serum ferritin seviyelerini ölçmek için çizildi. Geliştirilen ferritin RtA yönteminin geçerli kılmak ve güvenirliğini göstermek için yöntemin duyarlılığı, özgüııüğü, doğruluğu, presisyonu ve tekrarlanabilirliği incelendi. Yeni geliştirilen sığır serum ferritini RIA yöntemi ile on boğa serumunda normal serum ferritin seviyesi 40 :l: 2,4 ng / ml olarak tayin edildi.

Keywords

• sığır
• serum
• RİA

References

1. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi