İki çalı çekirgesi üzerinde doğal bağışıklık parametrelerinden fenoloksidaz aktivitesi ile litik aktivitenin ve hemolimfteki protein konsantrasyonunun yöntemsel olarak belirlenmesi
Öz
Omurgasızlarda doğal bağışıklık sistemi patojenlere karşı aktive olan oldukça çeşitli ve özgün tepkiler içeren humoral aktivitelere sahiptir. Böceklerde, bu önemli anahtar immün parametrelerden ikisi fenoloksidaz yolağı ve litik aktivitedir. Lizozimler bakteri hücre duvarındaki peptidoglikanları çözen bir grup enzim olup pek çok böcek grubunda bakteri savunması ile bağlantılıdır. Litik aktivite bakteri hücrelerinin hemolimfteki tahrip yeteneğinin in vitro olarak ölçülmesiyle saptanabilir. Fenoloksidaz omurgasızların immün sisteminde anahtar bir enzim olup, hemolimfte yabancı bir cisim saptandığında salgılanır. Dolayısıyla fenoloksidaz aktivitesi (PO) organizmaların yabancı istilacılara karşı savunmada rol alan immün sistemin yeteneğiyle ilişkilidir. Bu çalışmada ilk kez barbitistin (Orthoptera: Phaneropterinae) çalıçekirgelerinden iki türde (Isophya speciosa, Poecilimon similis), bu iki anahtar immün parametrenin ölçülmesi yöntemi sınanmıştır. Her iki tür için aynı yaştaki 10 erkek 10 dişiden mikroşırınga ile çekilen farklı miktarlardaki hemolimf konsantrasyonundaki (3, 6, 8, 10 μl) PO ve litik aktiviteler optik yoğunluk bakımından mikroplaka okuyucu ile ölçülmüştür. Buna ilave olarak her iki tür için hemolimfteki protein konsantrasyonu da belirlenmiştir. Çalışma sonucunda daha önce grillid ve bazı diğer böcek gruplarında uygulanan yöntemlerin, küçük değişikliklerle çalıçekirgeleri için de kullanılabileceği önerilmiştir. Ancak, hemolifteki toplam litik aktivitenin ölçümünde daha iyi sonuçlar elde etmek için daha fazla hemolimf miktarına gerek duyulduğu anlaşılmıştır. Bu çalışma barbitistin çekirge türleri üzerinde ileride yapılacak immün çalışmalar için yol gösterici olacaktır.
Anahtar Kelimeler
References
- Adamo, S. A., 2004. Estimating disease resistance in insects: phenoloxidase and lysozyme-like activity and disease resistance in the cricket Gryllus texensis. Journal of Insect Physiology, 50: 209-216.
- Adamo S. A, Jensen M., Younger M., 2001. Changes in lifetime immuno competence in male and female Gryllus texensis (formerly G. integer): trade-offs between immunity and reproduction. Animal Behavior. 62:417–425.
- Adamo, S. A., Lovett, M.M.E., 2011. Some like it hot: the effects of climate change on reproduction, immune function and disease resistance in the cricket Gryllus texensis. Journal of Experimental Biology, 214: 1997-2004.
- Asada, N., Yokoyama, G., Kawamato, N., Norioka, S., Hatta, T., 2003. Prophenol oxidase A3 in Drosophila melanogaster: activation and the PCR based cDNA sequence. Biochemical Genetics, 41: 151-163.
- Asano, T., Ashida, M., 2001. Cuticular pro-phenoloxidase of the silk worm, Bombyx mori. The Journal of Biological Chemistry, 276: 111000-11112.
- Bailey, N. W., 2011. A test of the relationship between cuticular melanism and immune function in wild-caught Mormon crickets. Physiological Entomology, 36: 155-164.
- Beckage, N. E. 2008. Insect Immunology, Academic Press/Elsevier.
- Berggren, A. 2010. Testing the effect of individual color morphology on immune response in bush-crickets. Insect Science, 17: 400-405.
Details
Primary Language
Turkish
Subjects
-
Journal Section
Research Article
Authors
Publication Date
June 1, 2016
Submission Date
October 23, 2015
Acceptance Date
-
Published in Issue
Year 2016 Volume: 5 Number: 1