CTBP1 ve NF2 Gen Ekspresyonlarının Prostat Kanser Hücrelerinde KDM6A/B Aracılı Epigenetik Regülasyonunun İncelenmesi
Abstract
Amaç: Çalışmanın amacı, epigenetik regülatörlerden lizin demetilaz 6A (KDM6A) ve/veya lizin demetilaz 6B’nin (KDM6B) prostat kanseri oluşumu ve progresyonunda rol oynayan C Terminal bağlayıcı protein1 (CTBP1) ve Nörofibromatozis Tip2 (NF2) ekspresyonlarının regülasyonu üzerindeki modüle edici rolünün aydınlatılmasıdır.
Yöntemler: Prostat kanseri metastatik hücreleri LNCaP’lere KDM6 ailesi selektif inhibitörü GSK-J4 uygulanıp, total RNA izolasyonu ve cDNA sentezi yapılarak; CTBP1 ve NF2 mRNA düzeylerindeki değişiklikler reverse transcription-quantitative real time PCR (RT-qPCR) ile gösterilmiştir. Saptanan değişikliklerin transkripsiyonel inhibisyondan kaynaklanıp kaynaklanmadığını araştırmak üzere CTBP1 ve NF2 pre-spliced mRNA düzeylerindeki değişiklikler RT-qPCR ile ölçülmüştür. KDM6A ve/veya KDM6B’nin (KDM6A/B) small interfering RNA (siRNA) aracılı susturulduğu hücrelerde CTBP1 ve NF2 mRNA düzeylerindeki değişiklikler RT-qPCR ile gösterilerek bu genlerin KDM6 enzimlerinin hangisi tarafından regüle edildiği belirlenmiştir.
Bulgular: CTBP1 ve NF2 rölatif mRNA düzeyleri GSK-J4 ile %45 ve %49 azalmıştır. Saptanan azalmaların CTBP1 ve NF2 mRNA ekspresyonlarının GSK-J4 tarafından transkripsiyonel baskılanmasıyla ilişkili olup olmadığını belirlemek üzere yapılan RT-qPCR deneylerinde CTBP1 ve NF2 pre-spliced mRNA düzeyleri de %43, %29 azalmıştır. GSK-J4’ün KDM6 ailesine selektif bir inhibitör olması nedeniyle CTBP1 ve NF2 mRNA ekspresyonlarının hangi KDM6 enzimi tarafından kontrol edildiğini belirlemek amacıyla KDM6A ve/veya KDM6B susturulduğunda; KDM6A ve KDM6B dual inhibisyonunda CTBP1 ve NF2 mRNA düzeyleri %56, %39 azalmıştır.
Sonuç: Özetle; GSK-J4 uygulanmasıyla CTBP1 ve NF2 mRNA düzeylerinde saptadığımız azalmaların transkripsiyondaki değişiklikten kaynaklandığı pre-spliced mRNA verilerimizle güçlü bir şekilde desteklenmiştir. KDM6A ve KDM6B’nin her ikisinin de CTBP1 ve NF2 ekspresyonlarının prostat kanserindeki regülasyonunda kontrol edici rollerinin olduğunun gösterilmesi; terapötik olarak hedeflenebilecek, KDM6A ve KDM6B aracılığıyla CTBP1 ve NF2 ekspresyonlarını modüle eden yeni bir mekanizmanın aydınlatılmasına katkı sağlayabilir.
Keywords
References
- 1.Jerónimo C, Bastian PJ, Bjartell A, et al. Epigeneticsin prostate cancer: biologic and clinical relevance.Eur Urol. 2011; 60: 753-66.
- 2.Vieira FQ, Costa-Pinheiro P, Ramalho-Carvalho J,et al. Deregulated expression of selected histonemethylases and demethylases in prostatecarcinoma. Endocr Relat Cancer. 2014; 21: 51-61.
- 3.Graça I, Pereira-Silva E, Henrique R, et al.Epigenetic modulators as therapeutic targets inprostate cancer. Clin Epigenetics. 2016; 8: 1-24.
- 4.Jones PA, Baylin SB. The epigenomics of cancer.Cell. 2007; 128: 683-92.
Abstract
References
- 1.Jerónimo C, Bastian PJ, Bjartell A, et al. Epigeneticsin prostate cancer: biologic and clinical relevance.Eur Urol. 2011; 60: 753-66.
- 2.Vieira FQ, Costa-Pinheiro P, Ramalho-Carvalho J,et al. Deregulated expression of selected histonemethylases and demethylases in prostatecarcinoma. Endocr Relat Cancer. 2014; 21: 51-61.
- 3.Graça I, Pereira-Silva E, Henrique R, et al.Epigenetic modulators as therapeutic targets inprostate cancer. Clin Epigenetics. 2016; 8: 1-24.
- 4.Jones PA, Baylin SB. The epigenomics of cancer.Cell. 2007; 128: 683-92.
Details
| Primary Language | Turkish |
|---|---|
| Subjects | Health Care Administration |
| Journal Section | Research Articles |
| Authors | |
| Publication Date | March 11, 2022 |
| Submission Date | September 13, 2021 |
| Published in Issue | Year 2022 Volume: 49 Issue: 1 |