Effects of various osmotic pressure levels and cryoprodective agents (CAPs) on Awassi Ram Spermatozoa
Abstract
Effective ram sperm cryopreservation protocols, which would yield acceptable fertility rates following artificial
insemination (AI) in ewes, are currently lacking. During the process of cryopreservation, spermatozoa are exposed to
osmotic pressure and heat stress at different rates. To reduce these negative effects on spermatozoa, new freezing
methods and extenders are being tried to develop. The objectives of the current studies are to compare the effects of
various anisoosmatic conditions, cryoprotective agents (CAPs) on the motility, acrosome and membrane integrity of Awassi
sperm. In the mating season, the sperm was collected from 2 Awassi ram than has been mixed and used. Two experiments
were conducted. In experiment 1, the sperm was exposed to 75, 150, 225, 325, 425, 600 and 900±5 mOsm/kg sucrose
solutions, held for 5 min and then returned to isosmotic condition. In experiment 2, the sperm was exposed to 0.5, 1.0 and
1.5 M glycerol (Gly), dimethyl sulfoxide (DMSO), ethylene glycol (EG) and propylene glycol (PG) for 5 min and then returned
to isosmotic condition. The sperm was evaluated by microscopic assessment of the sperm motility, acrosome and
membrane integrity. The motility of ram sperm was significantly affected from anisosmotic stress (P< 0.05). While
anisosmotic stress had no effects on acrosomal integrity of ram sperm, there was a significant reduction in acrosomal
integrity for ram sperm after the addition and removal of a 75 mOsm sucrose solution. The abrupt addition and removal of
cryoprotectant had effect on the motility and acrosomal integrity of epididymal ram sperm (P < 0.05). There was a decrease
in acrosomal integrity for ram sperm after exposure to cryoprotectant (P 0.05). In conclusion,
the current data suggest that ram sperm was affected by cryobiologiably stress conditions at different rates.
Keywords
Abstract
Günümüzde koyunlarda dondurulmuş sperma ile yapılan tohumlamalardan yeterli oranda fertilite elde
edilememektedir. Dondurma işlemi esnasında spermatozoa değişik oranlarda ozmotik basınç ve ısı stresine maruz kalır.
Spermatozoa üzerinde oluşan bu olumsuz etkilerin azaltılması için dondurma metotları ve yeni sulandırıcılar
denenmektedir. Bu çalışmanın amacı, anizo-ozmotik ortam ve kryoprotektanların ivesi spermatozoonları üzerine olan
etkisini motilite, membran ve akrozom bütünlüğü yönünden değerlendirmektir. Sunulan araştırmada; çiftleşme sezonu
içerisinde olan iki adet ivesi koçtan suni vajen yöntemiyle alınan ejakülatlar birleştirilip kullanıldı. Çalışma iki aşamadan
oluşmaktadır. Birinci aşamada; sperma 75, 150, 225, 325, 425, 600 ve 900±5 miliosmollük (mOsm)/kg sükroz solüsyonuna 5
dakika maruz bırakılıp yeniden izo-ozmotik duruma getirildi. İkinci aşamada, sperma 0.5, 1.0 ve 1.5 M gliserol (Gly),
dimetilsülfoksid (DMSO), etilen glikol (EG) ve propilen glikol (PG) içeren solüsyonlara 5 dakika maruz bırakılıp yeniden izoozmotik
duruma getirildi. Spermalar motilite, membran ve akrozom bütünlüğü yönünden değerlendirildi. Koç
spermatozoonlarının motilitesi, izo-ozmotik olmayan stres faktörlerinden önemli derecede etkilendi (P< 0.05). Genel olarak
spermatozoa akrozom bütünlüğünü izo-ozmotik olmayan ortamdan etkilenmezken, 75 mOsm’lük sükroz solüsyonu
akrozom bütünlüğünü önemli oranda düşürdü. Kryoprotektanların spermaya eklenmesi ve uzaklaştırılması motilite ve
akzorom bütünlüğünü (0.5 M Gly hariç) önemli derecede etkiledi (P< 0.05). Sonuç olarak, İvesi koç spermasının çeşitli stres
faktörlerinden değişik ölçüde etkilendiği gözlenmiştir.
Keywords
Details
| Other ID | JA37HM55SS |
|---|---|
| Journal Section | Research |
| Authors | |
| Publication Date | June 1, 2014 |
| Submission Date | June 1, 2014 |
| Published in Issue | Year 2014 Volume: 3 Issue: 2 |
