Alzheimer's disease, marked by aberrant accumulation of amyloid-β (Aβ) peptides produced by the cleavage of amyloid precursor protein (APP) by secretases, is associated with cognitive impairment. Evidence has shown that cholinergic activity may alter the management of APP processing. The objective of this investigation was to assess the effect of thionine (TH), a phenothiazine-structured cholinesterase inhibitor, on the processing of APP in N2a mouse neuroblastoma cells that overexpress the Swedish mutant of APP (N2a/APPSwe cells). To this end, we investigated how TH affects levels of Aβ40/42 peptides, soluble APPα (sAPPα), intracellular APP, β-site APP-cleaving enzyme 1 (BACE-1), presenilin-1 (PS1), and glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3β). After treating N2a/APPSwe cells with TH at concentrations of 1.25-10 μM for 24 h, the levels of Aβ42, Aβ40 and sAPPα were evaluated using ELISA. In addition, the effects of thionine on intracellular APP, PS1 and GSK3β levels were analyzed by Western blotting. Our findings showed that thionine significantly reduced the levels of Aβ peptides and APP in N2a/APPSwe cells. When we evaluated the effects of thionine on APP processing, no significant alteration was detected in the level of BACE-1. However, a statistically significant reduction was observed in the levels of PS1 and GSK3β. The results provide an important mechanism of action for thionine's potential to prevent amyloid pathology.
Scientific Research Projects Coordination Unit of Hacettepe University
TSA-2019-17288
Amiloid prekürsör proteininin (APP) sekretazlar tarafından kırılmasıyla oluşan amiloid-β (Aβ) peptitlerinin anormal birikimiyle karakterize Alzheimer hastalığı, bilişsel bozukluk ile ilişkilidir. Kanıtlar, kolinerjik aktivitenin, APP işlenmesinin regülasyonunu değiştirebileceğini göstermiştir. Bu araştırmanın amacı, fenotiyazin yapılı bir kolinesteraz inhibitörü olan tiyoninin (TH), APP'nin İsveç mutantını aşırı eksprese eden N2a fare nöroblastoma hücrelerinde (N2a/APPSwe hücreleri) APP işlenmesi üzerindeki etkisini değerlendirmektir. Bu amaçla, tiyoninin Aβ40/42 peptitleri, çözünür APPα (sAPPα), hücre içi APP, β-bölge APP-kesim enzimi 1 (BACE-1), presenilin-1 (PS1) ve glikojen sentaz kinaz 3 beta (GSK3β) düzeylerini nasıl etkilediğini araştırdık. N2a/APPSwe hücreleri 24 saat boyunca 1.25-10 μM tiyonin ile muamele edildikten sonra, ELISA yöntemi kullanılarak Aβ42, Aβ40 ve sAPPα düzeyleri değerlendirilmiştir. Ayrıca, tiyoninin hücre içi APP, PS1 ve GSK3β düzeyleri üzerindeki etkileri, Western blot yöntemi ile analiz edilmiştir. Bulgularımız, tiyoninin N2a/APPSwe hücrelerinde Aβ peptitler ve APP düzeylerini önemli ölçüde azalttığını göstermiştir. Tiyoninin APP işlenmesi üzerindeki etkilerini değerlendirdiğimizde, BACE-1 düzeyinde önemli bir değişiklik gözlenmemiştir. Ancak PS1 ve GSK3β düzeylerinde istatistiksel olarak anlamlı bir azalma gözlenmiştir. Sonuçlar, tiyoninin amiloid patolojisini önleme potansiyeline ilişkin önemli bir etki mekanizması sunmaktadır.
TSA-2019-17288
Primary Language | English |
---|---|
Subjects | Clinical Sciences (Other) |
Journal Section | Original Article |
Authors | |
Project Number | TSA-2019-17288 |
Publication Date | August 28, 2025 |
Submission Date | May 13, 2025 |
Acceptance Date | July 31, 2025 |
Published in Issue | Year 2025 Volume: 12 Issue: 2 |