Çalışmada, Suillus collinitus’un sitotoksite,
apoptik ve nekrotik etkileri incelenmiştir. Kuru basidiokarplardan alınan
parçalar malt ekstrakt agarda doku kültürü yöntemiyle geliştirildi. Sırasıyla
primer ve sekonder miseller 27°C’de, karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edilerek
elde edildi. Sekonder misellerden 5’er pelet nutrient broth’da 27°C’de, 140
rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı.Numuneler soxlet cihazında 80°C, %70’lik
etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitoksite, apoptik ve nekrotik
çalışmalar için hazırlandı. Sitoksite çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929
Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları 1mg/ml, 0.5mg/ml, 0.25mg/ml olarak
uygulandı. WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda 440 nm dalga boyunda
mikroplate okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama deneyi ile aynı
hücre hattında apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama solüsyonu
hazırlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere aynı konsantrasyonlarda
uygulandı. İnkübasyon sonucunda florasanataçmanlı
mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm yapıldı. Toksite, konsantrasyonlara
bağlı olarak değişmektedir. 0.5mg/ml konsantrasyonda %86 oranında toksik etki göstermiştir. Konsantrasyon
azaldıkça toksite de azalmıştır. Fibroblastlara yapılan uygulamada ise uygulanan
tüm konsantrasyonlarda toksik etki göstermediği tespit edilmiştir.
Subjects | Health Care Administration |
---|---|
Journal Section | Articles |
Authors | |
Publication Date | October 11, 2017 |
Published in Issue | Year 2017 Volume: 12 Issue: 4 |