Investigation of the Echinococcus Antibodies in Sera of Patients with Pre-Diagnosed Hydatid Cyst Using ELISA and Western Blot Methods

Öz

Hydatid cyst (CH) is one of the important zoonotic infections in the world and in our country. In this study; cyst fluids taken by percutaneous aspiration from the interventional radiology department with a preliminary diagnosis of CH were evaluated by direct microscopic examination in Eskişehir Osmangazi University Medical Faculty of Microbiology Laboratory. After the evaluation, serum samples were requested from patients with structures compatible with CH disease, and the presence of antibodies against Echinococcus granulosus was investigated by ELISA and Western Blotting tests. It is aimed to compare ELISA and Western Blotting serological diagnosis methods with each other and with direct microscopic examination in the laboratory diagnosis of CH disease. 16 aspirated cyst fluids were evaluated by direct microscopic examination which sent from the Interventional Radiology Outpatient Clinic. 16 serum samples taken from the same patients were included in the study group and the presence of antibodies in these serum samples was investigated by ELISA and Western Blotting methods. As a control group, the presence of antibodies against E. granulosus was investigated by serological tests in the sera of 10 healthy volunteers who had no prediagnosis or suspicion of hydatid cyst and no signs of parasitic infection. According to serological test results, ELISA IgG was positive in 8 of 16 serum samples, suspiciously positive in 3, and negative in 5 of them. Of the 16 sera, 14 were positive by Western Blotting and 2 were negative. In our study, in which direct microscopic examination was evaluated as the gold standard, the compatibility of the ELISA test with the direct microscopic examination was found to be 53.3%, and the Western Blotting test was 93.3%. It was thought that Western Blotting method was more reliable in the serological diagnosis of CH disease and that combining more than one serological method, if possible, would contribute to the diagnosis.

Anahtar Kelimeler

• Hydatid cyst
• Echinococcus granulosus
• cystic echinococcosis
• diagnosis

Kist Hidatik Ön Tanılı Hasta Serumlarında ELISA ve Western Blotting Yöntemleriyle Ekinokok Antikor Varlığının Araştırılması

Öz

Kist hidatik(KH) dünyada ve ülkemizde önemli zoonotik enfeksiyonlardan biridir. Bu çalışmada; KH ön tanısı ile girişimsel radyoloji bölümünden perkütan aspirasyonla alınan kist sıvıları Eskişehir Osmangazi Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji Laboratuvarı’nda direkt mikroskobik inceleme ile değerlendirilmiştir. Değerlendirme sonrası, KH hastalığı ile uyumlu yapıların görüldüğü hastalardan serum örnekleri istenerek, ELISA ve Western Blotting testleriyle Echinococcus granulosus’ a karşı antikor varlığı araştırılmıştır. KH hastalığının laboratuvar tanısında ELISA ve Wetern Blotting serolojik tanı yöntemlerinin birbirleriyle ve direkt mikroskobik incelemeyle karşılaştırılması amaçlanmıştır. Girişimsel Radyoloji Polikliniği’nden gönderilen 16 aspire kist sıvısı direkt mikroskobik inceleme ile değerlendirilmiştir. Bu hastalara ait 16 serum örneği çalışma grubuna alınmış, bu serum örneklerinde ELISA ve Western Blotting yöntemleriyle antikor varlığı araştırılmıştır. Kontrol grubu olarak da kist hidatik ön tanısı ya da şüphesi olmayan, paraziter enfeksiyon bulgusu olmayan, 10 sağlıklı gönüllü serumunda serolojik testlerle E. granulosus’a karşı antikor varlığı araştırılmıştır. 16 serum örneğinin 8’inde ELISA IgG pozitif, 3’ünde şüpheli pozitif, 5’inde negatif bulunmuştur. 16 serumun 14’ünde Western Blotting testi ile pozitif, 2’si negatif sonuçlanmıştır. Direkt mikroskobik incelemenin altın standart olarak değerlendirildiği çalışmamızda ELISA testinin direkt mikroskobik inceleme ile uyumu %53.3, Western Blotting testinin uyumu %93.3 oranında bulunmuştur. KH hastalığının serolojik tanısında Western Blotting yönteminin daha güvenilir olduğu ve mümkünse birden fazla serolojik yöntemin kombine edilmesinin tanıya katkı sağlayacağı düşünülmüştür.

Anahtar Kelimeler

• Kist hidatik
• Echinococcus granulosus
• kistik ekinokokkoz
• tanı

Kaynakça

1. Pourseif MM, Moghaddam G, Saeedi N, Barzegari A, Dehghani J,Omidi Y. Current status and future prospective of vaccine development against Echinococcus granulosus Biologicals. 2018 Jan(51):1-11.
2. Altaş K, Samastı M. Unat’ın Tıp Parazitolojisi. İstanbul Üniversitesi Cerrahpaşa Tıp Fak Vakfı Yayınları. 1995;No(15): İstanbul
3. Altıntaş N, Doğanay A. Kistik ekinokokkozis. Doğanay M, Altıntaş (Eds). Zoonozlar:Hayvanlardan insanlara bulaşan enfeksiyonlar. 2009; 901-37.
4. Unat E.K, Yücel A, Atlas K, Samastı M, . Unat’ın Tıp Parazitolojisi. 5. Baskı, İstanbul: Cerrahpaşa Tıp Fak Vakfı Yayınları.1995;no 15. p. 440‐459
5. https://www.who.int/echinococcosis/resources/jactatropica_200911001/en
6. https://www.cdc.gov/dpdx/dxassistance.html
7. Amr SS, Amr ZS, Jitawi S, Annab H. Hydatidosis in Jordan: an epidemiological study of 360 cases. Ann. Trop. Med. Parasitol. 1994; 88(6):623-627.
8. Türkiye Zoonotik Hastalıklar Eylem Planı, T.C. Sağlık Bakanlığı Halk Sağlığı Genel Müdürlüğü, 2019; yayın no: 1130, Ankara.

9. Doiz O, Benito R, Sbihi Y, Osuna A, Clavel A, Gómez-Lus R. Western blot applied to the diagnosis and post-treatment monitoring of human hydatidosis. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 2001;41(3):139-142.
10. Agudelo-Higuita NI, Brunetti E, McCloskey C. Cystic echinococcosis. J Clin Microbiol, 2016; 54: 518-523. doi: 10.1128/JCM.02420-15.
11. Yılmaz GR, Babür C. Diagnosis of echinococcosis. Turk Hij Den Biyol Derg, 2007; 64: 35-44.
12. Kılıç S, Babur C, Taylan-Ozkan A. Comparison of the results of indirect hemagglutination and ELISA methods for the cases prediagnosed as hydatid cyst disease. Mikrobiyol Bul, 2007; 41: 571-577.
13. Yazar S, Yaman O, Çetinkaya F, Şahin İ. Cystic echinococcosis in Central Anatolia, Turkey. Saudi Med J. 2006; 27: 205-9
14. Akısü C, Bayram Delibaş S, Yuncu G, Aksoy U, Ozkoç S, Biçmen C, et al. Evaluation of IHA, ELISA and Western Blot tests in diagnosis of pulmonary cystic hidatidosis. Tuberk Toraks. 2005; 53: 156-60.
15. Delibaş SB, Ozkoç S, Sahin S, Aksoy U, Akisü C. Evaluation of patients presenting with a suspicion of cystic echinococcosis to the serology laboratory of the Parasitology Department of Dokuz Eylül University Medical Faculty. Turkiye Parazitol Derg. 2006; 30: 279-81.
16. Aydın, Merve, et al. Determination of anti-echinococcus IgG antibodies by ELISA in patients with suspected hydatid cyst. Türkiye Parazitoloji Dergisi, 2012; 36.2: 61.
17. Liance, Martine, et al. "Immunodiagnosis of EchinococcusInfections: Confirmatory Testing and Species Differentiation by a New Commercial Western Blot." Journal of clinical microbiology 38.10, 2000; 3718-3721.
18. Zait, H., et al. Parasitological study of 78 cases of human cystic echinococcosis collected between 2005 to 2012 in Mustapha hospital center of Algiers. Pathologie-biologie, 2014, 62.6: 369-376.