BibTex RIS Cite

Investigation of Metallo Beta-lactamase Production in Carbapenem Resistant Pseudomonas aeruginosa Isolates

Year 2013, Volume: 20 Issue: 3, 237 - 242, 01.06.2013

Abstract

Objective: In this study; we aimed to determine metallo beta-lactamase production in 29 Pseudomonas aeruginosa isolates resistant to carbapenems that isolated as a cause of nosocomial infection and to compare the three different phenotypic methods for screening of metallo beta-lactamase production. Material and Methods: P.aeruginosa isolates were identified by conventional methods. Antibiotic susceptibility tests were performed by Kirby-Bauer disk diffusion method according to the standards of Clinical and Laboratory Standards Institute. Imipenem and meropenem E tests (AB Biodisk, Sweden) were used for verification of carbapenem resistance. Metallo beta-lactamase E test (AB Biodisk, Sweden), modified Hodge test and imipenem-EDTA combined disk test were used for detection of metallo beta-lactamase production and the results of these tests were compared with polymerase chain reaction results. Results: IMP, VIM, GIM, SIM and SPM type genes were negative for all isolates with polymerase chain reaction. As a screening test for metallo beta-lactamase enzymes, combined disk test and E test detected positivity for six and two isolates, respectively. Modified Hodge test yielded 10 positive and two undetermined results within 29 isolates. There were no statistical difference between metallo beta-lactamase E test results and polymerase chain reaction results (p> 0,05 ). But, there were significantly statistical difference between polymerase chain reaction results and combined disk test (p:0,023 ) and modified Hodge test (p <0,001) results. Conclusion: According to our results; metallo beta-lactamase E test is suitable method for screening metallo beta-lactamase enzymes in carbapenem resistant P.aeruginosa isolates, however; positive results of this test should be confirmed with molecular methods. Key words: Pseudomonas Aeruginosa; Metallo Beta-Lactamase; Metallo Beta-Lactamase E Test; Combined Disk Test; Polymerase Chain Reaction

References

  • Pier GB, Ramphal R: Pseudomonas aeruginosa. In: MandeII GL, Bennet JE, Dolin R, eds: Mandell, Douglas and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases, 6th edition. Philadelphia: Elsevier Churchill Livingstone; 2005. p.2587-615.
  • Strateva T, Yordanov D. Pseudomonas aeruginosa — a phenomenon of bacterial resistance, J Med Microbiol 2009;58:1133—48.
  • Nordmann P, Poirel L. Emerging carbapenemases in Gram — negative aerobes. Clin Microbiol Infect 2002;82321—31.
  • Bahar G, Mazzariol A, Koncan R, Mert A, Fontana R, Rossolini GM et al: Detection of VIM-5 metaIIo—beta— lactamase in a Pseudomonas aeruginosa cIinicaI isolatefrom Turkey. J Antimicrob Chemother 2004;54:282-3.
  • Yong D, Lee K, Yum JH, Shin HB, Rossolini GM, Chong Y: Imipenem-EDTA disk method for differentiation of metaIIo— beta—Iactamase—producing clinical isolates of Pseudomonas spp. and Acinetobacter spp. J Clin Microbiol 2002;40:3798— 801.
  • Lee K, Yong D, Yum JH, Lim YS, Bolmström A, Owarnstrom A et aI: Evaluation of E test MBL for detection of bIaIMP—1 and bIaVIM—2 allele—positive clinical isolates of Pseudomonas spp. and Acinetobacter spp. J Clin Microbiol 2005;43:942—4.
  • Walsh TR, Bolmstrom A, Owarnstrom A, Gales A: Evaluation of a new E test for detecting metallo—beta—Iactamases in routine clinical testing. J Clin Microbiol 2002;40:2755-9.
  • Yan JJ, Wu JJ, Tsai SH, Chuang CL: Comparison of the double—disk, combined disk, and E test methods for detecting metallo—beta—lactamases in gram—negative bacilli. Diagn Microbiol Infect Dis 2004;49:5—1 1.
  • Ellington MJ, Kistler J, Livermore DM, Woodford N: Multiplex PCR for rapid detection of genes encoding acquired metallo—beta—lactamases. J Antimicrob Chemother 2007;59:321—2.
  • Winn WC Jr, AIIen SD, Janda WM, Koneman E, Procop G, Schreckenberger P et al: Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, 6th edition. Philadelphia: Lippincott Williams Wilkins; 2006. p.317—23.
  • Clinical and Laboratory Standards Institute: Performance
  • Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 19th 22. 23. Dis 1998;27(Suppl 1):48—53. 24. 25. 26. 27.
  • Antimicrob Chemother 2008;61:827—30.
  • Qu TT, Zhang JL, Wang J, Tao J, Yu YS, Chen YG et al:
  • Evaluation of phenotypic tests for detection of metaIIo- _ _,

Karbapenem Dirençli Pseudomonas aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*

Year 2013, Volume: 20 Issue: 3, 237 - 242, 01.06.2013

Abstract

Amaç: Bu çalışmada nozokomiyal enfeksiyon etkeni olarak izole edilen, karbapenemlere dirençli 29 Pseudomonas aeruginosa izolatında metallo beta-laktamaz üretiminin belirlenmesi ve üç farklı fenotipik yöntemin sonuçlarının karşılaştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: Pseudomonas aeruginosa izolatları konvansiyonel yöntemler ile tanımlanmış, antibiyotik duyarlılık testleri Clinical and Laboratory Standards Institue standartlarına göre Kirby-Bauer disk difüzyon yöntemi kullanılarak yapılmıştır. Karbapenem direncini doğrulamak için imipenem E test ve meropenem E test (AB BIODISK, Solna, İsveç) kullanılmıştır. Metallo beta-laktamaz üretimini belirlemek için metallo beta-laktamaz E test (AB BIODISK, Solna, İsveç), modifiye Hodge testi ve imipenem-EDTA kombine disk testi kullanılarak sonuçlar polimeraz zincir reaksiyonu sonuçları ile karşılaştırılmıştır. Bulgular: Karbapenemlere dirençli 29 izolatta polimeraz zincir reaksiyonu ile IMP, VIM, GIM, SIM ve SPM tipi metallo beta-laktamaz enzim geni bulunamamıştır. Fenotipik testlerden kombine disk testi ile altı izolat, E test ile iki izolat pozitif sonuç vermiştir. Modifiye Hodge testi ile 10 izolat pozitif sonuç vermiş, iki izolatta ise sonuç belirlenememiştir. Polimeraz zincir reaksiyonu sonuçları ile metallo beta-laktamaz E test sonuçları arasındaki farkın istatistiksel olarak anlamlı olmadığı belirlenmiştir (p> 0,05). Polimeraz zincir reaksiyonu ile kombine disk testi sonuçları arasındaki farkın anlamlı olduğu (p:0,023 ) ve yine polimeraz zincir reaksiyonu ile modifiye Hodge testi sonuçları arasında farkın anlamlı olduğu saptanmıştır (p< 0,001). Sonuç: Bulgularımıza göre; karbapenemlere dirençli P. aeruginosa izolatları için metallo beta-laktamaz tarama testi olarak metallo beta-laktamaz E testin kullanılması uygundur, ancak pozitif sonuçların moleküler yöntemler ile doğrulanması gereklidir. Anahtar kelimeler: Pseudomonas Aeruginosa; Metallo Beta-Laktamaz; Metallo Beta-Laktamaz E Test; Kombine Disk Testi; Polimeraz Zincir Reaksiyonu

References

  • Pier GB, Ramphal R: Pseudomonas aeruginosa. In: MandeII GL, Bennet JE, Dolin R, eds: Mandell, Douglas and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases, 6th edition. Philadelphia: Elsevier Churchill Livingstone; 2005. p.2587-615.
  • Strateva T, Yordanov D. Pseudomonas aeruginosa — a phenomenon of bacterial resistance, J Med Microbiol 2009;58:1133—48.
  • Nordmann P, Poirel L. Emerging carbapenemases in Gram — negative aerobes. Clin Microbiol Infect 2002;82321—31.
  • Bahar G, Mazzariol A, Koncan R, Mert A, Fontana R, Rossolini GM et al: Detection of VIM-5 metaIIo—beta— lactamase in a Pseudomonas aeruginosa cIinicaI isolatefrom Turkey. J Antimicrob Chemother 2004;54:282-3.
  • Yong D, Lee K, Yum JH, Shin HB, Rossolini GM, Chong Y: Imipenem-EDTA disk method for differentiation of metaIIo— beta—Iactamase—producing clinical isolates of Pseudomonas spp. and Acinetobacter spp. J Clin Microbiol 2002;40:3798— 801.
  • Lee K, Yong D, Yum JH, Lim YS, Bolmström A, Owarnstrom A et aI: Evaluation of E test MBL for detection of bIaIMP—1 and bIaVIM—2 allele—positive clinical isolates of Pseudomonas spp. and Acinetobacter spp. J Clin Microbiol 2005;43:942—4.
  • Walsh TR, Bolmstrom A, Owarnstrom A, Gales A: Evaluation of a new E test for detecting metallo—beta—Iactamases in routine clinical testing. J Clin Microbiol 2002;40:2755-9.
  • Yan JJ, Wu JJ, Tsai SH, Chuang CL: Comparison of the double—disk, combined disk, and E test methods for detecting metallo—beta—lactamases in gram—negative bacilli. Diagn Microbiol Infect Dis 2004;49:5—1 1.
  • Ellington MJ, Kistler J, Livermore DM, Woodford N: Multiplex PCR for rapid detection of genes encoding acquired metallo—beta—lactamases. J Antimicrob Chemother 2007;59:321—2.
  • Winn WC Jr, AIIen SD, Janda WM, Koneman E, Procop G, Schreckenberger P et al: Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, 6th edition. Philadelphia: Lippincott Williams Wilkins; 2006. p.317—23.
  • Clinical and Laboratory Standards Institute: Performance
  • Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 19th 22. 23. Dis 1998;27(Suppl 1):48—53. 24. 25. 26. 27.
  • Antimicrob Chemother 2008;61:827—30.
  • Qu TT, Zhang JL, Wang J, Tao J, Yu YS, Chen YG et al:
  • Evaluation of phenotypic tests for detection of metaIIo- _ _,
There are 15 citations in total.

Details

Primary Language Turkish
Journal Section Articles
Authors

Ahmet Mansur This is me

Selma Ay This is me

Barış Otlu This is me

Nilay Güçlüer This is me

Yasemin Ersoy This is me

Publication Date June 1, 2013
Published in Issue Year 2013 Volume: 20 Issue: 3

Cite

APA Mansur, A., Ay, S., Otlu, B., Güçlüer, N., et al. (2013). Karbapenem Dirençli Pseudomonas aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*. Journal of Turgut Ozal Medical Center, 20(3), 237-242.
AMA Mansur A, Ay S, Otlu B, Güçlüer N, Ersoy Y. Karbapenem Dirençli Pseudomonas aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*. J Turgut Ozal Med Cent. June 2013;20(3):237-242.
Chicago Mansur, Ahmet, Selma Ay, Barış Otlu, Nilay Güçlüer, and Yasemin Ersoy. “Karbapenem Dirençli Pseudomonas Aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*”. Journal of Turgut Ozal Medical Center 20, no. 3 (June 2013): 237-42.
EndNote Mansur A, Ay S, Otlu B, Güçlüer N, Ersoy Y (June 1, 2013) Karbapenem Dirençli Pseudomonas aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*. Journal of Turgut Ozal Medical Center 20 3 237–242.
IEEE A. Mansur, S. Ay, B. Otlu, N. Güçlüer, and Y. Ersoy, “Karbapenem Dirençli Pseudomonas aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*”, J Turgut Ozal Med Cent, vol. 20, no. 3, pp. 237–242, 2013.
ISNAD Mansur, Ahmet et al. “Karbapenem Dirençli Pseudomonas Aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*”. Journal of Turgut Ozal Medical Center 20/3 (June 2013), 237-242.
JAMA Mansur A, Ay S, Otlu B, Güçlüer N, Ersoy Y. Karbapenem Dirençli Pseudomonas aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*. J Turgut Ozal Med Cent. 2013;20:237–242.
MLA Mansur, Ahmet et al. “Karbapenem Dirençli Pseudomonas Aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*”. Journal of Turgut Ozal Medical Center, vol. 20, no. 3, 2013, pp. 237-42.
Vancouver Mansur A, Ay S, Otlu B, Güçlüer N, Ersoy Y. Karbapenem Dirençli Pseudomonas aeruginosa İzolatlarında Metallo Beta Laktamaz Üretiminin Araştırılması*. J Turgut Ozal Med Cent. 2013;20(3):237-42.