Relationships Between Hepsidin Levels in Some Hematological and Biochemical Parameters in Sheep With Natural Babesioisis

Abstract

This study was conducted to determine the relationship between hematocrit levels and some hematological and biochemical parameters after hemolysis of erythrocytes in natural babesiosis sheep. A total of 40 sheep were included in the study, 20 healthy (control group) and 20 natural babesiosis. Blood samples were taken from the vena jugular of 20 sheep with clinical findings in Biochemistry tube and blood tube with EDTA. DNA extraction was performed in accordance with the procedure with GeneJetViral DNA (Thermo Scientific, Catalog number: K0821) kit. PCR was performed using a pair of primers specific for the 18S ribosomal RNA gene region for the detection of Babesia agents. The amplified gene regions were stained with ethidium bromide on a 1% agarose gel and detected under UV light on a gel imager. According to the PCR result, 425 bp positivity was determined. Whole hemograms were performed from the blood taken from EDTA tubes. Serum was taken from the blood taken from the biochemistry tube and frozen at -20 until analysis day. Serum levels of heparin, serum iron and iron binding parameters were measured. In this study, it was observed that the values of RBC, HTC (p <0,001), HGB (p <0,05) values decreased in sheep with babesiosis compared to the control group. There was a decrease in neutrophil counts (p <0,05) compared to the control group, and an increase in lymphocyte, monocyte and basophil percentage (p <0,05). There was also a significant decrease in PLT numbers (p <0.05). Serum Fe levels were increased (p> 0,05), although statistical significance was not significant compared to the control group. In this study, hepsidine levels in babesia group were statistically higher than control (p <0,05). As a result, in sheep with babesiosis, it was concluded that the decrease in erythrocyte parameters, the development of stress leukogram, the increase in iron parameters and hepsidine levels, and it was concluded that these results may be diagnostic.

Keywords

• Babesia,Hepsidine,Iron,Sheep

Doğal Babesiosis’li Koyunlarda Hepsidin Düzeyleri ile Bazı Hematolojik ve Biyokimyasal Parametreler Arasındaki İlişkiler

Abstract

Bu çalışma doğal babesiozisli koyunlarda eritrositlerin hemolizi sonrası hepsidin düzeyleri ile hematolojik ve biyokimyasal bazı parametreler arasında nasıl bir ilişkinin olduğunu belirlemek amacıyla yapıldı. Çalışmaya 20 sağlıklı (Kontrol grubu), 20 doğal babesiozisli olmak üzere toplam 40 koyun dahil edildi. Klinik bulgulara sahip 20 koyunun vena jugularisinden biyokimya ve EDTA’lı tüplere kan örnekleri alındı. DNA ekstraksiyonu GeneJETViral DNA (ThermoScientific, catalognumber: K0821)  kiti ile prosedüre uygun olarak yapıldı.  Babesia etkenlerinin tespiti için 18S ribozomal RNA gen bölgesine spesifik olan bir çift primer kullanılarak PCR yapıldı. Ampilifiye edilen gen bölgeleri %1’lik agaroz jelde ethidiumbromid ile boyanarak jel görüntüleme cihazında UV ışık altında belirlendi.Yapılan PCR sonucuna göre ise 425 bp pozitiflik belirlendi. EDTA’lı tüplere alınan kanlardan tam hemogram bakılıdı. Biyokimya tüpüne alınan kanlardan serum elde edilerek analiz gününe kadar -20 de donduruldu. Analiz günü çözdürülen serumlardan hepsidin, serum demir seviyesi ve demir bağlama parametreleri ölçüldü. Bu çalışmada babesiozisli koyunlarda kontrol grubu ile kıyaslandığında RBC, HTC (p<0,001), HGB (p<0,05) değerlerinin istatistiki azaldığı görüldü. Nötrofil değerlerinde kontrol grubuna göre azalma (p<0,05) meydana gelirken, lenfosit, monosit ve bazofil yüzdesinde ise artış (p<0,05) görüldü. Ayrıca PLT sayılarında önemli oranda (p<0,05) azalma belirlendi. Serum Fe seviyelerinde kontrol grubuna göre istatistiki önem olmamasına rağmen artış (p>0,05) görüldü. Bu çalışmada hepsidin seviyeleri babesia grubunda kontrole göre istatistiki olarak yüksek (p<0,05) olduğu belirlendi. Babesiosizli koyunlarda eritrosit parametrelerinde azalma, stres lökogramının geliştiği, demir parametrelerinde ve hepsidin seviyelerinde artmaların olduğu ve diagnostik öneminin olabileceği kanısına varıldı.

Keywords

• Babesia,Hepsidin,Demir,Koyun

References

1. Badial PR, Oliveira FJP, Cunha PHJ et al. (2011). Influence ofexperimental inflamatory response on hepatic hepsidin gene expression and plasma iron concentration in sheep. Veterinary Immunology and Immunopathology, 141, 157-161. Başol G, Barutçuoğlu B, Bozdemir AE (2007). Demir Hemostazının Yeni Düzenleyicisi Hepsidin. Türk Klinik Biyokimya Dergisi, 5, 117-125. Çelik B (2005). Yenidoğan döneminde serum prohepsidin düzeylerinin tam kan sayımı, demir parametreleri ve sepsis ile ilişkisi, Başkent Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk Sağlığı Ve Hastalıkları Anabilim Dalı Uzmanlık Tezi. Chaudhuri S, Varshey J.P, Patra RC (2008). Erythrocytic antioxidant defense, lipid peroxides level and blood iron, zinc and copper concentrations in dogs naturally infected with Babesia gibsoni. Research in Veterinary Science, 85. 120-124. Çicek H, Düzgün A, Emre Z, Karaer Z (2004). Seroprevalence of Babesia ovis in sheep around Afyon. Turk J Vet Anim Sci, 28:683-686 Esmaeilnejad B, Tavassoli M, Rezaei SA (2012). Investigation of haematological and biochemical parameters in small ruminants naturally infected with Babesia ovis. Veterinary Research Forum, 3 (1): 31-36. Furlanello T, Fiorio F, Caldin M et al. (2005). Clinicopathological findings in naturally occurring cases of babesiosis caused by large form Babesia from dogs of northeastern Italy. Veterinary Parasitology, 134,1-2: 77-85 Ganz T, Nemeth E (2012). Hepcidin and iron homeostasis. Biochim Biophys Acta, 1823: 1434-1443. Kılınç Orunç Ö, Göz Y, Yüksek N et al. (2015). Determination of serum cardiac biomarkers and plasma D-dimer levels in anemic sheep with babesiosis. Turk J Vet Anim Sci, 39. 606-610. Rossi E (2005). Hepcidin-the iron regulatory hormone, Clin Biochem Rev, 26,3, 47-49. Schorn S, Pfister K, Reulen H et al. (2011). Occurrence of Babesia spp., Rickettsia spp. and Bartonella spp. in Ixodes ricinus in Bavarian public parks, Germany. Parasit Vectors, 4, 135. Sevinç F, Caob S, Zhoub M et al. (2015). A new immunoreactive recombinant protein designated as rBoSA2 from Babesia ovis: Its molecular characterization, subcellular localization and antibody recognition by infected sheep. Veterinary Parasitology, 214, 213–218. Singh B, Arora S, Agrawal P et al. (2011). Hepcidin: a novel peptide hormone regulating iron metabolism. Clin Chim Acta, 412(11-12): 823-830. Turgut K (2000). Veteriner Klinik Laboratuvar Teşhis, 2. Baskı, Bahçıvanlar Basım Sanayi AŞ. Konya. Uyanık F (2000). Bazı iz elementlerin organizmadaki başlıca fonksiyonları ve bağışıklık üzerine etkileri. Erciyes Üniv. J Health Sci, 9 (2). 49-58. Yur F, Yazar M, Değer Y, Dede S (2010). Na+/K+ATPase activity in sheep with natural Babesiosis. Acta Vet Brno , 79: 233-236.