Year 2018, Volume 3, Issue 3, Pages 101 - 106 2018-12-18

Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi

Bahar BİLGİN SÖKMEN [1] , Rıdvan İLGÜN [2]

88 224

Bu çalışmada, ülkemizde Giresun İli ve çevresinde bol miktarda yetişen kestane (Castanea Sativa) tohumlarından lipaz enzimi ilk defa saflaştırıldı ve kinetik özellikleri incelendi. Petrol eteri ile yağı uzaklaştırılmış kestane tohumları 0,06 M sodyum fosfat tamponu (pH=7,0) ile homojenize edildi. Lipaz esteraz aktivitesi gösteren homojenizatın % 90’lık (NH4)2SO4 kesiti elde edildi. Dializden sonra bu kesit sırasıyla hidroksilapatit ve DEAE-selüloz kolonlara uygulanarak lipaz enzimi 186,87 kez saflaştırıldı. SDS-PAGE elektroforezi sonucunda saflaştırılan enzimin molekül ağırlığının 30 kDa olduğu bulundu. Kestane tohumlarından saflaştırılan lipazın optimum pH’sının 9,0; optimum sıcaklığının 30 °C olduğu bulundu. Enzimin çeşitli substratlara karşı ilgisi incelendiğinde, lipazın ilgisinin en çok p-NFM’a olduğu ve Km ve Vmax değerlerinin sırasıyla 1,017 mM ve 163,874 U olduğu saptandı.


Lipaz, Karakterizasyon, Kestane (Castanea Sativa) Tohumu
  • Abdou, M. A. 2003. Purification and partial characterization of psychrotrophiz Serratia marcescens lipase. Journal of Dairy Science, 86, 127-132.
  • Beisson, F., Gardies, A. M., Teissere, M., Ferte, N., Noat, G. 1997. An esterase neo synthesized in post-germinated sunflower seeds is related to a new family of lipolytic enzymes. Plant Physiology and Biochemistry, 35, 761-765.
  • Bhardwaj, K., Raju, A., Rajasekharan, R. 2001. Identification, purification, and characterization of a thermally stable lipase from rice bran. a new member of the (phospho) lipase family. Plant Physiology, 127, 1728-1738.
  • Bilgin Sökmen, B. 2005. Kayısı (Armeniaca vulgaris Lam.) tohumlarından lipazın saflaştırılması ve çeşitli taşıyıcılara immobilize edilmesi. Doktora Tezi, İstanbul Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, İstanbul, Türkiye, 137s,
  • Dharmsthiti, S., Ammaranond, P. 1997. Purification and characterization of lipase from a raw-milkyeast (Trichosporon asteroides). Applied Biochemistry and Biotechnology, 26, 111-116.
  • Erlanson, C. 1970. p-Nitrophenylacetate as a substratefor a carboxyl-ester hydrolase in pancreatic juice and ıntestinal content. Scandinavian Journal of Gastroenterology, 5, 333-336.
  • Gupta, R., Gupta, N., Rathi, P. 2004. Bacterial lipases: An overview of production, purification and biochemical properties. Applied Microbial Biotechnology, 64, 763-781.
  • Haas, M. J., Cichowicz, D. J., Dierov, J. K. 2001. lipolytic activity of californica-laurel (Umbellularia californica) seeds. Journal of American Oil Chemist’s, 78, 1067-1071.
  • Hasan, F., Aamer, A. S., Hameed, A. 2006. Industrial applications of microbial lipases. Enzyme and Microbial Technology, 39, 235-251.
  • Laemmli, U. K. 1970. Cleavage of structural proteins during the. aassembly of the head of bacteriofage T4. Nature, 227, 680-685.
  • Lowry, O. H., Rosebrough, N. J., Farr, A. L., Randall, R. J. 1951. Protein measurement with folin phenol reagent. Journal of Biological Chemistry, 193, 265-275.
  • Namboodiri, V. M. H., Chattopadhyay, A. 2000. Purification and biochemical characterization of a novel thermostable lipase from Aspergillus niger. Lipids, 35, 495-502.
  • Paiva, A. L., Balcao, V. M., Malcata F. X. 2000. Kinetics and mechanisms of reactions catalyzed by immobilized lipases. Enzyme and Microbial Technology, 27, 187-204.
  • Prabhu, V. A.,Tambe, S. P., Gandhi, N. N., Sawant, S. B., Joshi, J. B. 1999. Rice bran lipase: extraction, activity and stability. Biotechnology Progress, 15, 1083-1089.
  • Sanz, L. C., Olais, J. M. 1990. Characterization of lupin seed lipase. Food Chemistry, 37, 221-228.
  • Sharma, R., Chisti, Y., Banerjee, U. C. (2001). Research Review Paper: Production, purification, characterization, and applications of lipases. Biotechnology Advances, 19, 627-662.
  • Staubmann, R., Ncube, I., Gubitz, G. M, Steiner, W., Read, J. S. 1999. Esterase and lipase activity in Jatrophacurcas L. seeds. Journal of Biotechnology, 75, 117-126.
  • Subaşı, B. 2004. Kestane Sektör Profili, İstanbul Ticaret Odası Etüt ve Araştırma Şubesi, İstanbul.
  • Şengel, B. 2007. Deterjan katki maddesi olarak mikrobiyal kaynakli lipaz üretim koşullari. Yüksek Lisans Tezi, Ankara Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, Ankara, Türkiye, 174s.
  • Ünlü, A. E. 2004. Candida Rugosa Lipazının özellikleri ve enantiyo seçimliliğinin arttırılması. Seminer. Ankara Üniversitesi, Kimya Mühendisliği Anabilim Dalı, Ankara. Türkiye.
  • Vorderwulbwcke, T., Kieslich, K., Erdmann, H., 1992. Comparison of lipases by different assays. Enzyme and Microbial Technology, 14, 631-639.
  • Yeşiloğlu, Y., Başkurt, L. 2008. Partial purifacation and characterization of almond seed lipase. Preparative Biochemistry Biotechnology, 38, 397-410.
  • Warburg, O., Christian, W. 1941. Isolierungund kristallinsation des garungsferments enolase. Biochemische Zeitschrift, 310, 384-421.
  • Winkler, U. K., Stuckmann, M., 1979. Glycogen, hyaluronate, and some other polysaccaharides greatly enhance the formation of exolipase by Serratia marcescens. Journal of Bacteriology, 138, 663-670.
Primary Language tr
Journal Section Makaleler
Authors

Orcid: 0000-0003-3904-8178
Author: Bahar BİLGİN SÖKMEN (Primary Author)
Institution: Giresun University, Faculty of Sciences, Giresun, Turkey
Country: Turkey


Orcid: 0000-0002-8613-0353
Author: Rıdvan İLGÜN
Institution: Giresun University, Turkey
Country: Turkey


Dates

Publication Date: December 18, 2018

Bibtex @research article { jaes416800, journal = {Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences}, issn = {}, eissn = {2548-0006}, address = {Anatolian Academic Sciences}, year = {2018}, volume = {3}, pages = {101 - 106}, doi = {10.35229/jaes.416800}, title = {Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi}, key = {cite}, author = {BİLGİN SÖKMEN, Bahar and İLGÜN, Rıdvan} }
APA BİLGİN SÖKMEN, B , İLGÜN, R . (2018). Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi. Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences, 3 (3), 101-106. DOI: 10.35229/jaes.416800
MLA BİLGİN SÖKMEN, B , İLGÜN, R . "Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi". Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences 3 (2018): 101-106 <http://dergipark.org.tr/jaes/issue/40446/416800>
Chicago BİLGİN SÖKMEN, B , İLGÜN, R . "Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi". Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences 3 (2018): 101-106
RIS TY - JOUR T1 - Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi AU - Bahar BİLGİN SÖKMEN , Rıdvan İLGÜN Y1 - 2018 PY - 2018 N1 - doi: 10.35229/jaes.416800 DO - 10.35229/jaes.416800 T2 - Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences JF - Journal JO - JOR SP - 101 EP - 106 VL - 3 IS - 3 SN - -2548-0006 M3 - doi: 10.35229/jaes.416800 UR - https://doi.org/10.35229/jaes.416800 Y2 - 2018 ER -
EndNote %0 Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi %A Bahar BİLGİN SÖKMEN , Rıdvan İLGÜN %T Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi %D 2018 %J Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences %P -2548-0006 %V 3 %N 3 %R doi: 10.35229/jaes.416800 %U 10.35229/jaes.416800
ISNAD BİLGİN SÖKMEN, Bahar , İLGÜN, Rıdvan . "Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi". Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences 3 / 3 (December 2018): 101-106. https://doi.org/10.35229/jaes.416800
AMA BİLGİN SÖKMEN B , İLGÜN R . Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi. JAES. 2018; 3(3): 101-106.
Vancouver BİLGİN SÖKMEN B , İLGÜN R . Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi. Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences. 2018; 3(3): 106-101.