Sığırların Yaz Mastitislerinden Trueperella pyogenes’in İdentifikasyonu ve Antibiyotiklere Dirençliliklerinin Belirlenmesi

Öz

Özbilgi/Amaç: Bu çalışmada Aydın ilinde görülen sığırların yaz mastitislerinden Trueperella pyogenes’in identifikasyonu ve antibiyotiklere dirençliliklerinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Materyal ve Metot: Çalışmada Aydın ili ve çevresinde bulunan çeşitli odaklardan yaz aylarında Haziran-Temmuz-Ağustos toplanan 150 adet mastitisli süt örneği incelenmiştir. Alınan örnekler soğuk zincir altında Adnan Menderes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Mikrobiyoloji Rutin Teşhis laboratuarına getirilmiş ve besiyerlerine ekimleri yapılmıştır. Daha sonra 37 ºC’de 24 saat inkubasyona bırakılmıştır. Yapılan Gram boyama sonrası Gram pozitif bakteriler ayırt edilmiş ve izole edilen bu bakterilerin biyokimyasal yöntemlere göre identifikasyonu gerçekleştirilmiştir. Antibiyotik dirençliliklerinin tespiti için Kirby bauer disk difüzyon metodu kullanılmıştır.Bulgular ve Sonuç: Araştırmada kullanılan toplam 150 mastitisli süt örneğinden 12 % 8 adet T. pyogenes suşu izole ve identifiye edilmiştir. İzole ve identifiye edilen T. pyogenes suşlarına yapılan antibiyotik duyarlılık testleri sonucunda 12 adet suşun tamamı %100 Penisilin/Novobiosin, Danofloksasin, Oksitetrasiklin, Kanamisin/Sefaleksin ve Sülfamethaksasol-Timethoprim’e dirençli bulunmuştur. Sefaperazon ve Kolistin sülfat’a 9 ar suş dirençli %75 , 3’er suş duyarlı %25 , Linkomisin’e 3 suş dirençli %25 , 3 suş orta düzey duyarlı %25 ve 6 suş duyarlı %50 , Amoksisilin klovulanik asit’e 3 suş dirençli %25 , 6 suş orta düzey duyarlı %50 ve 3 suş duyarlı %25 , Eritromisin’e 9 suş dirençli %75 , 3 suş orta düzey duyarlı %25 , Seftifor’a 6 suş dirençli %50 , 6 suş duyarlı %50 ve Florfenikol’e ise 6 suş dirençli %50 , 3 suş orta düzey duyarlı %25 ve 3 suş ise duyarlı %25 olarak tespit edilmiştir. Sonuç olarak Aydın ilinde görülen yaz mastitislerinden T. pyogenes’in izolasyonu ve identifikasyonları yapılmıştır. Yapılan antibiyogram testleri sonucu etkenin bir çok antibiyotiğe karşı direnç geliştirdiği tespit edilmiştir. Bu tip mastitis olgularında sağaltımda başarı elde edilebilmesi için antibiyogram testlerinin yapılıp, bilinçli bir antibiyotik seçimine gidilmesinin doğru bir yaklaşım olacağı sonucuna varılmıştır.

Anahtar Kelimeler

• Antibiyotik dirençliliği,Trueperella pyogenes,Yaz Mastitisi

Identification of Trueperella pyogenes from Bovine Summer Mastitis and Detection of Antibiotic resistances

Abstract

Background/Aim: The aim of this study were isolation of summer mastitis factor Trueperella pyogenes from mastitic cattles in Aydin and determination of antibiotic resistances of that isolated factors.Material and Method: In this study, 150 mastitic milk samples were analyzed in Aydın province in summer season Jun-July-August . Collected samples were brought to The Routine Diagnostic Laboratory of Microbiology Department, Veterinary Faculty, Adnan Menderes University under cold chain. Then was allowed to incubate for 24 hours at 37 ºC. After that, Gram positive bacterias are separated by using Gram Staining and isolated bacterias were identified based on biochemical assays. Kirby-Bauer disc diffusion method was used for the detection of antibiotic resistance.Results and Conclusion: Of the 150 analyzed mastitic milk samples, 12 Trueperella pyogenes strains % 8 were isolated and identified. All the studied strains were found resistant to Penicillin/Novobiocin, Danofloxacin, Oxytetracycline, Kanamycin/Cephalexin and Sulfamethoxazole-Trimethoprim 100 % . Nine strains were found resistant to Cefoperazone and Colistin sulphate 75% , while three strains were sensitive 25% . Resistant 3 strains 25% , moderately sensitive 3 strains 25% and sensitive 6 strains 50% were present against Linmycine/Neomycin. Resistance to Amoxycillin Clavulanic Acid, Erythromycin, Ceftiofur and Florphenicol occurred in 3 25% , 9 75% , 6 50% and 6 strains 50% , respectively. As 6 50% , 3 25% and 3 strains 25% were determined moderately sensitive to Amoxycillin Clavulanic Acid, Erythromycin and Florfenicol, in the same order. Sensitive strains were also existing to Amoxycillin Clavulanic Acid, Ceftiofur and Florfenikol in the amount of 3 25% , 6 50% and 3 25% . As a result of this study, isolation and identification of T. pyogenes from summer mastitis cases were performed in Aydin province. Antibiogram tests showed that T. pyogenes were developed resistance to many antibiotics. It is concluded that for the success in mastitis treatment, antibiogram tests should be performed before antibiotic decision.

Keywords

• Antibiotic resistance,Summer Mastitis,Trueperella pyogenes

Kaynakça

1. Ak S (2000). Trakya Yöresinde Sığır Mastitisinden Sorumlu Bulaşıcı ve Çevresel Bakteriyel Etkenler ve Antibiyotiklere Duyarlılıkları. İstan- bul Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 26(2), 353-365
2. Anonim (2013). Summer mastitis, http://www.dairyco.org.uk/tech- nical-information/animal-health-welfare/mastitis/working-are- na-prevention-of-infection/summer-mastitis-the-warmer-months/ (Erişim Tarihi, 15.01.2013)
3. Ateş M, Erganiş O, Çorlu M, Serpek B (1991). Konya yöresindeki mas- titisli ineklerden elde edilen süt örneklerinin mikrobiyel florası ve LDH aktivitesi. Turkish Journal of Veterinary Animal Science. 16: 19-29
4. Bademkıran S, Yeşilmen S, Gürbulak K (2005). Sütçü İneklerde Günlük sağım sayısının Klinik Mastitis ve Süt Verimi Üzerine Etkisi, Yüzüncü Yıl Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi. 16(2): 17-21
5. Berry E, Booth J (1999). Summer mastitis in England and Wales: 1992- 1997. Veterinary Record. 145, 469
6. Billington SJ, Post KW, Jost BH (2002). Isolation of Arcanobacterium (Actinomyces) pyogenes from cases of feline otitis externa and ca- nine cystitis. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 14:159– 162
7. CLSI (2002). Performance Standards for Antimicrobial Disk and Dilution Susceptibility Tests for Bacteria Isolated from Animals. Approved Standard, CLSI Document M31-A2, second ed. Clinical and Labora- tory Standards Institute, Wayne, PA
8. CLSI (2003). Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibi- lity Tests. Approved Standard CLSI Document M2-A8. Clinical and Laboratory Standards Institute. Wayne, PA

9. Ertaş HB, Kılıç A, Özbey G, Muz A (2005). Isolation of Arcanobacterium (Actynomyces) pyogenes from abcessed kidney and identification by PCR. Turkish Journal of Veterinary Animal Science. 29, 455-459
10. Gouletsou PG, Ethenakis GC, Tzora A, Cripps PJ. Saratsis P (2006). Iso- lation of Arcanobacterium pyogenes from the scrotal skin and the prepuce of healthy rams or from rams with testicular abnormalities. Small Ruminant Research. 63, 177-182
11. Jousimies-Somer H, Pyorala S, Kanervo A (1996). Susceptibilities of bo- vine summer mastitis bacteria to antimicrobial agents. Antimicrobi- al Agent Chemotherapy. 40, 157-160
12. Muz A, Gülcü HB, Ertaş H.B, Kalender H (1992). Mastitisli inek sütle- rinden izole edilen mikroorganizmaların identifikasyonları ve anti- biyotiklere duyarlılıkları üzerinde bir araştırma. F.Ü. Sağlık Bilimleri Dergisi. 6: 113-121
13. Nagaraja TG, Chengappa MM (1998). Liver abscesses in feedlot cattle: A review. Journal of Animal Science. 76, 287-298
14. Narayanan S, Nagaraja TG, Staats J, Chengappa MM, Obersts RD (1998). Biochemical and biological characterizations and ribotyping of Act- ynomyces pyogenes and Actinomyces pyogenes-like organisms from liver abscesses in cattle. Veterinary Microbiology. 61, 289-303
15. Nolte O, Morscher J, Weiss HE, Sonntag HG (2001). Auto-vaccination of dairy cows to treat post partum metritis caused by Actinomyces pyogenes. Vaccine. 19, 3146-3153.
16. Shearer JK, Harmon RJ (1993). Mastitis in heifers. Veterinary Clinic North America Food and Animal Practice. 9, 583-595
17. Silva EM, Gaivão SL, Jost BH, Carneiro C, Vilela CL, Lopes da Costa L, Mateus L (2008). “Genomic Characterization of Arcanobacterium pyogenes Isolates Recovered from the Uterus of Dairy Cows with Normal Puerperium or Clinical Metritis.” Veterinary Microbiology. 132: 111-8
18. Tel OY, Keskin O, Zonturlu AK, Kaya NBA (2009). Şanlıurfa Yöresinde Su- bklinik Mastitislerin Görülme Oranı, Aerobik Bakteri İzolasyonu ve Duyarlı Antibiyotiklerin Belirlenmesi. Fırat Üniversitesi Sağlık Bilim- leri Dergisi. 23(2);101-106
19. Türütoğlu H, Ateşoğlu A, Salihoğlu H, Öztürk M (1995). Marmara böl- gesi süt ineklerinde mastitise neden olan aerobik etkenler. Pendik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi. 26: 125-137
20. Vinicius SM, Rodrigo CB (2014). Complete Genome Sequence of True- perella pyogenes, an Important Opportunistic Pathogen of Livesto- ck. Genome Announcements. 2(2): e00400-14. doi:10.1128/geno- meA.00400-14.
21. Waage S, Mork T, Roros A, Aasland D, Hunshamar, A, Odegaard S.A (1999). Bacteria Associated with Clinical Mastitis in Dairy Heifers, Journal of Dairy Science. 82(4): 712-719
22. Zastempowska E, Lassa H (2012). Genotypic characterization and eva- luation of an antibiotic resistance of Trueperella pyogenes (Arcano- bacterium pyogenes) isolated from milk of dairy cows with clinical mastitis. Veterinary Microbiology. 161:153-158.