Isolation frequency of Mycobacterium tuberculosis in tertiary reference hospital and their susceptibility patterns against four major anti-tuberculosis drugs

Abstract

Objectives: As soon as possible to detection of tuberculosis bacilli and to determination of their anti-tuberculosis drug susceptibilities are very important for an optimal anti-tuberculosis therapy. Therefore, two different culture methods in suspected patient samples were performed. The results of anti-tuberculosis drug susceptibility testing of culture positive samples were examined. Materials and methods: Following the homogenization and decontamination processes, patient\'s samples were stained with Ziehl-Neelsen dye and each preparation were inoculated separately onto Lowenstein-Jensen (LJ) and into Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT) media. After incubation period, drug susceptibilities of bacillus in culture positive samples against four major anti-tuberculosis drugs were investigated. Results: The samples obtained from 163 different patients between 2007 and 2010 years were evaluated. In all samples, it was determined that positivity of Acid Resistant Bacillus (ARB), MGIT and LJ media were 7 (4.0%), 6 (3.5%) and 7 (4.0%), respectively. MGIT method was demonstrated significantly earlier growth than LJ method the tuberculosis bacillus. All isolates were found to be sensitive to four major anti-tuberculosis drugs. Conclusion: In our study, MGIT method was found to be superior to LJ media because of its quick result and drug resistance was not determined in all isolates. J Clin Exp Invest 2012; 3(2): 240-244

Keywords

• Tuberculosis, culture techniques, drug resistance

Isolation frequency of Mycobacterium tuberculosis in tertiary reference hospital and their susceptibility patterns against four major anti-tuberculosis drugs

Öz

Amaç: Tüberküloz hastalığında, basilin kısa sürede saptanması ve izolatın anti-tüberküloz ilaçlara karşı duyarlılığının belirlenmesi, tedavi için çok önemlidir. Bu amaçla şüpheli hasta örneklerinin farklı iki yöntemle kültürü yapılmış ve üreme saptanan örneklerde anti-tüberküloz ilaçlara duyarlılık testi sonuçları irdelenmiştir. Gereç ve yöntem: Çalışmada hasta örnekleri homojenizasyon ve dekontaminasyon işlemlerinden sonra Zielh-Neelsen boyası ile boyandı. Her bir örnek Lowenstein-Jensen (LJ) ve Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT) besiyerlerine inoküle edildi. İnkübasyon periyodunu takiben üreme saptanan örneklerdeki basillerin dört majör anti-tüberküloz ilaca karşı duyarlılıkları araştırıldı. Bulgular: Çalışmada 2007-2010 yılları arasında 163 farklı hastadan alınan örnekler değerlendirildi. Tüm örneklerde; Aside Dirençli Basil (ARB) pozitifliğinin 7 (%4.0), MGIT pozitifliğinin 6 (%3.5), LJ pozitifliğinin 7 (%4.0) olduğu tespit edildi. MGIT yöntemi tüberküloz basillerini LJ yöntemine göre belirgin olarak daha kısa sürede saptadı. İzole edilen bütün suşların dört major anti-tüberküloz ilaca duyarlı olduğu bulundu. Sonuç: Çalışmamızda; MGIT yönteminin tüberküloz basilini belirlemede LJ kültürüne belirgin şekilde üstünlük sağladığı saptandı ve üreyen suşlarda anti-tüberküloz ilaçlara karşı direnç belirlenmedi.

Anahtar Kelimeler

• Tüberküloz, kültür teknikleri, ilaç direnci

Kaynakça

1. Kılıçaslan Z. Dünyada ve Türkiye’de tüberküloz. An- kem Derg 2007;21(1):76-80.
2. www.euro.who.int/document/CSR/CD news 30.pdf
3. Karagöz T, Arda H, Erboğan T, Kılıçarslan Z, Çağlar E, Erem R. İstanbul Dispanserleri Çalışmalarının Yeni Akciğer Tüberkülozlu Olguların Tanı-Tedavi ve Takip işlemleri açısından değerlendirilmesi. Tüberküloz ve Toraks Dergisi 2000;48(2):128-35.
4. Bilgiç H. Tüberküloz epidemiyolojisi. Kocabaş A. Tü- berküloz kliniği ve kontrolü. Ankara Emel Matbaası 1991:401-37.
5. Sağlık Bakanlığı Verem Savaşı Dairesi Başkanlığı. Türkiye’de Verem Savaşı, 2011 Raporu, Fersa Ofset, Ankara 2011:1-132.
6. The Global Plan to Stop TB: 2011-2015. Stop TB Part- nership. October 2010. Global tuberculosis control: WHO report 2011.Geneva, World Health Organiza- tion, 2011 (WHO/HTM/TB/2011.16 )
7. Koşar F, Ayereci C, Altın S. Tüberkülozda direnç so- runu. Tüberküloz ve Toraks Dergisi 1996;44(2):54-9.
8. Uçan ES. Türkiye’de anti-tüberküloz ilaçlara direnç so- runu. Tüberküloz ve Toraks Dergisi 1994;42(3):219- 30.

9. Öztürk S, İlvan A, Öztürkeri H. Balgamdan Mycoba- cterium tuberculosis izolasyonunda Mycobacteria Growth Indicator Tube (MGIT) yönteminin değeri. Tü- berküloz ve Toraks Dergisi 2001;49(1):101-7.
10. Rivera AB, Tupasi TE, Grimaldo ER, Cardano RC, Co VM. Rapid and improved recovery rate of Myobacte- rium tuberculosis in Mycobacteria Growth Indicator Tube combined with solid Lowenstein-Jensen medi- um. Int J Tuberc Lung Dis 1997;1(3):454-9.
11. Muz MH, Turgut T, Muz A. Akciğer Tüberkülozunda Balgam Numunelerinden Mycobacterium tuberculo- sis’in direkt Mikroskopi, Kültür ve PCR ile Saptanma- sı. Tüberküloz ve Toraks Dergisi 2000;48(1):5-11.
12. Hanna BA,Walters SB, Bonk SJ, Tick LJ. Recov- ary of Mycobacteria from blood in MGIT and L. Jen- sen slant after lysis centrifugation. J Clin Microbiol 1995;33(12):3315-6.
13. Palaci M, Ueki SYM, Nakamura S, Telles MA, Curcio M, Silva EM. Evaluation of Mycobacteria Growth Indi- cator Tube for Recovery and Drug Susceptibility Test- ing of Mycobacterium tuberculosis Isolates from Re- spiratory Specimens. J Clin Microbiol 1996;34(6):762- 4.
14. Sanders CA, Nieda RR, Desmond EP. Validation of the use of Middlebrook 7H10 agar, BACTEC MGIT 960, and BACTEC 460 12B media for testing the sus- ceptibility of Mycobacterium tuberculosis to levofloxa- cin. J Clin Microbiol 2004;42(11):5225-8.
15. Abe C. Standardization of laboratory tests for tu- berculosis and their proficiency testing. Kekkaku 2003;78(8):541-51.
16. Scarparo C, Ricordi P, Ruggiero G, Piccoli P. Evalu- ation of the fully automated BACTEC MGIT 960 sys- tem for testing susceptibility of Mycobacterium tu- berculosis to pyrazinamide, streptomycin, isoniazid, rifampin, and ethambutol and comparison with the radiometric BACTEC 460TB method. J Clin Microbiol 2004;42(3):1109-14.
17. Cruciani M, Scarparo C, Malena M, Bosco O, Serpel- loni G, Mengoli C. Meta-Analysis of BACTEC MGIT 960 and BACTEC 460 TB, with or without Solid Me- dia, for dDetection of Mycobacteria. J Clin Microbiol 2004;42(5):2321-5.
18. Dannerberg A, Joseph E. Pathogenesis of pulmonary tuberculosis. In: Fishman A, Elias J, Fishman J et al (eds). Fishman’s Pulmonary Diseases and Disorders. New York: Mc Graw-Hill Companies, 1998:2447-71.
19. Raviglione MC, Snider DE, Kochi A. Global epidemiol- ogy of Tuberculosis. JAMA 1995;273(2):220-6.
20. Kurtoğlu MG, Yüksekkaya Ş, Özdemir M, Baysal B. Bir Eğitim ve Araştırma Hastanesinin Mikobakteri- yoloji Laboratuvarında Direkt Preparat ve Kültür So- nuçlarının Karşılaştırılması. Selçuk Üniv Tıp Derg 2011;27(2):69-72.
21. İşitez M, Çetinkaya Z, Altındiş M, Çiftçi İH. Afyon böl- gesinde Löwenstein-Jensen, Bactec ve TK Medium yöntemleri ile izole edilen Mycobacterium tuberculosis suşlarının dört major ilaca karşı dirençlerinin belirlen- mesi. Kocatepe Tıp Dergisi 2004;5:45-8.
22. Ökten F, Ertürk A, Mutlu A. Mycobacterium Tubercu- losis’in Streptomisin, Kanamisin ve Amikasine karşı in vitro duyarlılığı ve bu ilaçlar arasındaki çapraz direnç ilişkisi. Tüberküloz ve Toraks Dergisi 2002;50(1):45-7.
23. Şipit YT, Çalışır HC. Tüberkülozda ilaç direnci ve Tür- kiye. Tüberküloz ve Toraks Dergisi 1998;46:4-11.
24. Sevim T, Ataç G, Hatipoğlu T. 1993-1995 yıllarında hastanemizde yatan 2161 akciğer tüberkülozlu olgu- nun primer ve sekonder ilaç direnci oranları. Solunum Hastalıkları 1999;10(2):231-7.
25. Oğul Ç, Gür A, Özdemir A. Yedikule Göğüs Hastalık- ları Hastanesinde 1995-1997 yılları arasında yatan tü- berküloz olgularında primer ve sekonder direnç oran- ları. Solunum Hastalıkları 1999;10(2):238-44.