Çeşitli Nörolojik Hastalıklarda Herpes simpleks virüs Tip 1 Pozitifliği

Öz

Amaç: Herpesvirüsler, immün yetmezliği olan ve olmayan çocuk ve yetişkinlerde görülen, önemli morbidite ve hatta mortalite ile seyredebilen çeşitli nörolojik hastalıklara yol açmaktadır. Bu virüsler ensefalit etiyolojisinde önemli rol oynamakla birlikte multipl skleroz, Guillain Barre Sendromu gibi nörolojik hastalıklardaki rolleri tam olarak bilinmemektedir. Yapılan çalışmalarda bu hastaların çok az bir kısmında virüs tespit edilebilmiştir. Fakat özellikle multipl skleroz patogenezinde olmak üzere diğer bir çok nörolojik hastalıkta virüslerin, hastalığın tetikleyicisi olabileceği ve hastalığın ilerlemesinde etkili olabileceği düşünülmektedir. Çalışmamızın amacı, nörolojik şikayetleri nedeniyle hastanemizin çeşitli kliniklerine başvuran hastalarda HSV-1 DNA varlığının real time PCR yöntemiyle saptanması ve pozitif bulunan hastalarda klinik tablonun gözden geçirilmesidir. Yöntem: Çalışmamıza, Hastanemiz Moleküler Mikrobiyoloji Laboratuvarı’na 1 Nisan 2014-31 Ocak 2016 tarihleri arasında örnekleri gönderilen 150 hasta dahil edilmiştir. Spin-kolon yöntemiyle High Pure Viral Nucleic Acid Kit, Roche, Almanya DNA izolasyonu yapılmıştır. İzole edilen DNA’lar Light Cycler 2.0 Roche, Almanya cihazında Real Time polimeraz zincir reaksiyonu PCR yöntemiyle LightCycler® HSV1/2 Qual Kit, Roche, Almanya çalışılmış ve sonuçlar kalitatif olarak değerlendirilmiştir. Hastaların HSV-1 IgM ve HSV-1 IgG antikorları ELISA yöntemiyle DIA. PRO, Milano, İtalya çalışılmıştır.Bulgular: Çalışmamıza dahil edilen 164 örneğin %82.9’u 136/164 beyin omurilik sıvısından BOS , %17.1’i 28/164 kandan oluşmaktadır. Bu örneklerin real time PCR ile %4.8’i 8/164 HSV-1 DNA pozitif bulunurken, aynı anda çalışılan HSV-2 DNA ise tüm örneklerde negatif bulunmuştur. Seroloji bakılan hastaların %6.2’sinde 2/32 HSV-1 IgM pozitif bulunurken, HSV-1 IgG ise hastaların %57.9’unda 11/19 pozitif bulunmuştur. BOS ve kan örnekleri çalışılan hastalarda, HSV-1 DNA pozitifliği ile yaşları ve cinsiyetleri arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır. Pozitif bulunan hastaların 3 %50 ’ü Herpes simpleks ensefaliti ile ilişkilendirilmiştir. Diğer hastaların ise multiple skleroz, Guillain Barre Sendromu, Wilson hastalığı gibi tanıları mevcuttur.Sonuç: Güvenilir ve duyarlı bir yöntem olan real time PCR sayesinde nörolojik semptomlu hastalara kısa sürede sonuç verilebilmekte, düşük pozitiflikler yakalanmaktadır. Bu sayede tedaviye erken başlanarak sekellerin gelişmesi engellenebilmektedir. Özellikle multiple skleroz ve Guillain Barre Sendromu gibi nörolojik rahatsızlıkların da HSV-1 ile ilişkili olabileceğine dair çalışmalar bulunmaktadır. Bu nedenle, diğer nörolojik rahatsızlığı olan hastalarda da HSV-1 çalışılmasının anlamlı olabileceğini düşünmekteyiz

Anahtar Kelimeler

• HSV, multiple skleroz, Guillain Barre sendromu, Wilson hastalığı, PCR

Herpes simplex virus Type 1 positivity in various neurological diseases

Öz

Objective: Herpesviruses are etiology of various neurological disorders causing morbidity and also mortality in both immunocompetent and immunocompromized children and adults. Viruses play an important role in etiology of encephalitis but their role is still unclear in neurologic diseases such as multiple sclerosis or Guillain-Barre syndrome. Studies revealed that only in few cases, viruses were isolated. But viruses are thought to have a role in triggering the diseases process or progression of the diseases in pathogenesis of neurological disorders, especially in multiple sclerosis. The aim of this study was detection of HSV-1 DNA by Real Time PCR in patients applying to our hospital with neurological symptoms and review of clinical picture in positive patients.Methods: Totally 150 patients whose samples sent to Molecular Microbiology Laboratory between 1 April 2014- 31 January 2016 were included in this study. DNAs were extracted by spin-column method High Pure Viral Nucleic Acid Kit,Roche,Germany . Amplification was done by Real time PCR method Real Time polimeraz zincir reaksiyonu PCR yöntemiyle LightCycler® HSV1/2 Qual Kit, Roche, Almanya çalışılmış ve sonuçlar kalitatif olarak değerlendirilmiştir. Hastaların HSV-1 IgM ve HSV-1 IgG antikorları ELISA yöntemiyle DIA. PRO, Milano, İtalya çalışılmıştır.Bulgular: Çalışmamıza dahil edilen 164 örneğin %82.9’u 136/164 beyin omurilik sıvısından BOS , %17.1’i 28/164 kandan oluşmaktadır. Bu örneklerin real time PCR ile %4.8’i 8/164 HSV-1 DNA pozitif bulunurken, aynı anda çalışılan HSV-2 DNA ise tüm örneklerde negatif bulunmuştur. Seroloji bakılan hastaların %6.2’sinde 2/32 HSV-1 IgM pozitif bulunurken, HSV-1 IgG ise hastaların %57.9’unda 11/19 pozitif bulunmuştur. BOS ve kan örnekleri çalışılan hastalarda, HSV-1 DNA pozitifliği ile yaşları ve cinsiyetleri arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır. Pozitif bulunan hastaların 3 %50 ’ü Herpes simpleks ensefaliti ile ilişkilendirilmiştir. Diğer hastaların ise multiple skleroz, Guillain Barre Sendromu, Wilson hastalığı gibi tanıları mevcuttur.Sonuç: Güvenilir ve duyarlı bir yöntem olan real time PCR sayesinde nörolojik semptomlu hastalara kısa sürede sonuç verilebilmekte, düşük pozitiflikler yakalanmaktadır. Bu sayede tedaviye erken başlanarak sekellerin gelişmesi engellenebilmektedir. Özellikle multiple skleroz ve Guillain Barre Sendromu gibi nörolojik rahatsızlıkların da HSV-1 ile ilişkili olabileceğine dair çalışmalar bulunmaktadır. Bu nedenle, diğer nörolojik rahatsızlığı olan hastalarda da HSV-1 çalışılmasının anlamlı olabileceğini düşünmekteyiz

Anahtar Kelimeler

• HSV, multiple sclerosis, Guillain Barre syndrome, Wilson disease, PCR

Kaynakça

1. 1. Akhvlediani T, Bautista CT, Shakarishvili R, Tsertsvadze T, Imnadze P, Tatishvili T, et al. Etiologic agents of central nervous system infections among febrile hospitalized patients in the country of Georgia. PLoS ONE, 2014; 9(11): e111393. DOI:10.1371/journal.pone.0111393.
2. 2. Looker KJ, Magaret AS, May MT, Turner KME, Vickerman P, Gottlieb SL, et al. Global and regional estimates of prevalent and incident herpes simplex virus type 1 infections in 2012. PLoS ONE, 2015; 10(10): e0140765. DOI:10.1371/journal. pone.0140765.
3. 3. Pinninti SG, Kimberlin DW. Preventing HSV in the newborne. Clin Perinatol, 2014; 41 (4): 945–55.
4. 4. Pillet S, Verhoeven PO, Epercieux A, Bourlet T, Pozzetto B. Development and validation of a laboratory-developed multiplex real-time PCR assay on the BD max system for detection of herpes simplex virus and varicella zoster virus DNA in various clinical specimens. J Clin Microbiol, 2015; 53 (6): 1921–6.
5. 5. Durmaz Çetin B, Hasman H. Herpes ensefalitleri. Klimik Dergisi, 2004; 17 (2): 68-71.
6. 6. Yağmur G, Özbal Y, Gökahmetoğlu S. Herpes simpleks virus (HSV) enfeksiyonu şüphesi olan hastaların klinik örneklerinde üç farklı yöntemle HSV varlığının araştırılması. Mikrobiyol Bul, 2010; 44: 47-56
7. 7. Binnicker MJ, Espy MJ, Irish CL. Rapid and direct detection of herpes simplex virus in cerebrospinal fluid by use of a commercial real-time PCR assay. J Clin Microbiol, 2014; 52 (12): 4361–2.
8. 8. Gaeta A, Verzaro S, Cristina LM, Mancini C, Nazzari C. Diagnosis of neurological herpesvirus infections:real time PCR in cerebral spinal fluid analysis. New Microbiologica, 2009; 32: 333-40.

9. 9. Aliabadi N, Jamalidoust M, Asaei S, Namayandeh M, Ziyaeyan M. Diagnosing of herpes simplex virus infections in suspected patients using real-time PCR. Jundishapur J Microbiol, 2015; 8 (2): e16727. DOI:10.5812/jjm.16727.
10. 10. Kabakuş N, Aydın M., Herpes simpleks virüs tip-1’in neden olduğu sinir sisteminin farklı enfeksiyöz ve postenfeksiyöz bozuklukları: Klinik seri. F.Ü. Sağlık Bil. Dergisi, 2005; 19 (3): 213-20.
11. 11. Messacar K, Breazeale G, Wei Q, Robinson CC, Dominguez SR. Epidemiology and clinical characteristics of infants with human parechovirus or human herpes virus-6 detected in cerebrospinal fluid tested for enterovirus or herpes simplex virus. J Med Virol, 2015; 87: 829–35.
12. 12. Moon SM, Kim T, Lee EM, Kang JK, Lee SA, Choi SH. Comparison of clinical manifestations, outcomes and cerebrospinal fluid findings between herpes simplex type 1 and type 2 central nervous system infections in adults. J Med Virol, 2014; 86:1766–71.
13. 13. Sili U, Kaya A, Mert A, HSV Encephalitis Study Group. Herpes simplex virus encephalitis: Clinical manifestations, diagnosis and outcome in 106 adult patients. J Clin Virol, 2014; 60:112–8.
14. 14. Mirza M. Multipl sklerozun etiyoloji ve epidemiyolojisi. Erciyes Tıp Dergisi, 2002; 24 (1): 40-7.
15. 15. Martin C, Enbom M, Soderstrorn M, Fredrikson S, Dahl H, Lycke L, et al. Absence of seven human herpesviruses, including HHV-6, by polymerase chain reaction in CSF and blood from patients with multiple sclerosis and optic neuritis. Acta Neurol Scand, 1997; 95: 280-3.
16. 16. Ferro MT, Franciotta D, Prelle A, Bestetti A, Cinque P. Active intrathecal herpes simplex virus type 1 (HSV-1) and human herpesvirus-6 (HHV-6) infection at onset of multiple sclerosis. J Neurovirol, 2012; 18:437–40.
17. 17. Steininger C, Popow-Kraupp T, Seiser A, Gueler N, Stanek G, Puchhammer E. Presence of cytomegalovirus in cerebrospinal fluid of patients with guillain-barre syndrome. The Journal of Infectious Diseases, 2004; 189: 984–9.
18. 18. Bitan M, Or R, Shapira MY, Mador N, Resnick IB, Saleh N, et al. Early-onset guillain-barre´ syndrome associated with reactivation of epstein-barr virus infection after nonmyeloablative stem cell transplantation. Clin Infect Dis, 2004; 39:1076–8.
19. 19. Wakasugi K, Imaizumi T, Nishimura Y, Fujimoto H, Ayabe M, Shoji H, et al. Guillain-barre syndrome associated with herpes zoster. Internal Medicine, 2001; 40 (6): 552.
20. 20. Kang JH, Sheu JJ, Lin HC. Increased risk of guillainbarre syndrome following recent herpes zoster: A population-based study across Taiwan. Clin Infect Dis. 2010; 51 (5):525–30.
21. 21. Hart IK, Kennedy PGE. Guillain-Barre syndrome associated with herpes zoster. Postgraduate Medical Journal, 1987; 63: 1087-8.
22. 22. Bernsen HJJA, Van Loon AM, Poels RFJ, Verhagen WIM, Frenken CWGM. Herpes simplex virus specific antibody determined by immunoblotting in cerebrospinal fluid of a patient with the guillain-barre syndrome. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry, 1989; 52:788-91.
23. 23. Kaçar Bayram A, Gümüş H, Arslan D, Kaya Özçora G, Kumandaş S, Karacabey N, et al. Neurological features and management of wilson disease in children: an evaluation of 12 cases. Turk Pediatri Ars, 2016; 51: 15-21.
24. 24. Noska A, Kyrillos R, Hansen G, Hirigoyen D, Williams DN. The role of antiviral therapy in immunocompromised patients with herpes simplex virus meningitis. Clin Infect Dis, 2015; 60 (2): 237– 42.