İleri Oligoastenoteratozoospermik Hastaların Semen Örneklerinde Sperm DNA Metilasyonlarının Araştırılması
Öz
Amaç: Epigenetik değişimlerin, sperm kalitesini ve verimliliğini
etkileyebileceği bilinmektedir ve bu nedenle spermin klinik değerlendirmeleri için epigenetik işaretlerin yararlı olabileceği düşünülmüştür. Bunun için de belirlenen 3 hedef genin (TBL1XR1,SPATA5
ve SPATA7) araştırılması hedeflenmiştir. Bu çalışmada, epigentik
işaretler ile ileri oligoastenoteratozoospermik örnekleri ile normozoospermik örnekler arasında DNA metilasyon farklılıkları açısından karşılaştırıldı.
Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda 20 normospermik ve 20 ileri oligoastenoteratozoospermik olgudan semen örneği toplandı. Toplanılan semen örneklerinin histolojik analizleri gerçekleştirildi. Histolojik analizlerin ardından belirlenen örnekler DNA Metilasyon kiti
kullanılarak iki grup arasında metilasyon farklılığını gözlemlemek
amacıyla sekanslama yapıldı.
Bulgular: Çalışmada yapılan histolojik analizlerin sonuçlarına göre
sperm maturasyonu ileri oligoastenoteratozoospermik olgularda
düşük bulunmuştur ve DNA fragmantasyonda iki grup arasında
anlamlı fark bulunamamıştır. Sekanslama sonucunda çalışılabilen
az sayıda normospermik kontrol ve oligospermik örneklerde anlamlı dizilime sahip olan kısımlarında nükleotid farkı bulunmadığından metilasyonu etkileyecek bir fark belirlenmemiştir.
Tartışma ve Sonuç: Oligoastenoteratozoospermi (OAT) olguları
hormonal veya testiküler fonksiyon bozuklukları ile ortaya çıkarlar
ve OAT grubunda sperm DNA fragmantasyonu ve maturasyon kusurları yüksektir. Fakat erkek faktörlü infertilitenin moleküler temeli
tam olarak anlaşılamamıştır. Bu çalışmada sperm protaminasyonu
ile epigenetik mekanizmaların ilişkisi ve sperm DNA fragmantasyonu mekanizmalarında epigenetiğin rolünün araştırılması konusu
ele alınmıştır. Çalışmanın sonucunda belirlenen genler için tasarlanılan primerlerle bisülfit dönüşümü gerçekleştirilen örneklerde
TBL1XR1 ve SPATA5 genlerinde istenilen bant profillerine ulaşılamadı. SPATA7 uygun büyüklükte bant görüldü fakat sekanslama
sonucunda anlamlı metilasyon farklılığı belirlenmemiştir. Yaptığımız çalışmada farklı genler ve metotlar kullanılarak metilasyonun
infertilite üzerindeki etkileri araştırılmıştır. Bu çalışmada yapılacak
olan diğer çalışmalara gelecek teşkil edecektir.
Anahtar Kelimeler
Kaynakça
- Boissonnas, C., Jouannet C.2013.Epigenetic Disorders and Male Subfertility. Fertility and Sterility, 99(3), 624–631.
- 2. Gannon, J. R., Emery, B. R.2013. The Sperm Epigenome: Implications for the Embryo.53–66. Springer.791
- 3. Jenkins TG, Carrell DT. The sperm epigenome and potential implications for the developing embryo. Reproduction 2012;143:727–34.
- 4. l Hajj N, Zechner U, Schneider E, Tresch A, Gromoll J, Hahn T, et al. Methylation status of imprinted genes and repetitive elements in sperm DNA from infertile males. Sex Dev 2011;5:60–9.
- 5. Gunes, S., & Kulac, T.2014.The role of epigenetics in spermatogenesis. Türk Üroloji Dergisi/Turkish Journal of Urology, 39(3), 181–187.
- 6. WHO Laboratuvar El Kitabı, İnsan semeninin incelenmesi ve işlemlerden geçirilmesi, (Çeviri Editörü:Kadıoğlu Ateş) ,Nobel Tıp Kitabevleri,5.Baskı,İstanbul
- 7. Denomme, M. M., McCallie, B. R.2018. Inheritance of epigenetic dysregulation from male factor infertility has a direct impact on reproductive potential. Fertility and Sterility, 110(3), 419–428.e1.
- 8. Friemel,C.Ammerpohl,O.2014. Array-based DNA methylation profiling in male infertility reveals allele-specific DNA methylation in PIWIL1 and PIWIL2. Fertility and Sterility,P1097-1103.E1
- 9. Benchaib,M.Braun V.2005. Influence of global sperm DNA methylation on IVF results. Human Reproduction.Vol.20, No.3 pp.768–773.