Russula delica Fr.’nın sitotoksite, apoptik ve nekrotik
etkileri incelenmiştir. Kuru basidiokarplardan alınan parçalar malt ekstrakt agarda
doku kültürü yöntemiyle geliştirildi. Sırasıyla primer ve sekonder miseller 27°C’de,
karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edildi. Sekonder misellerden 3’er pelet nutrientbroth’da
27°C’de, 140 rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı. Numuneler soxlet cihazında 80°C,
%70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitotoksite, apoptik ve nekrotik
çalışmalar için hazırlandı. Sitotoksite çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929
Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları 5mg/ml, 2,5mg/ml, 1.25mg/ml, 0.625mg/ml,
0.315mg/ml olarak uygulandı. WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda
440nm dalga boyunda mikroplate okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama
deneyi ile aynı hücre hattında apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama
solüsyonu hazırlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere aynı
konsantrasyonlarda uygulandı. İnkübasyon sonucunda
florasanataçmanlı mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm
yapıldı. Toksite, konsantrasyonlara bağlı olarak değişmektedir. 5mg/ml de
hazırlanan örnekte toksite oranı yüksektir. 2.5mg/ml altında hazırlanan miktarlar
arasında bir fark yoktur. Ayrıca kanser ve normal hücrelerin canlılık değerleri
arasında anlamlı bir fark gözlemlenmemiştir. Örneklerde herhangi bir apoptik ve
nekrotik etki gözlemlenmemiştir.
Subjects | Health Care Administration |
---|---|
Journal Section | Articles |
Authors | |
Publication Date | October 11, 2017 |
Published in Issue | Year 2017 Volume: 12 Issue: 4 |