Russula delica Fr.’nın sitotoksite, apoptik ve nekrotik
etkileri incelenmiştir. Kuru basidiokarplardan alınan parçalar malt ekstrakt agarda
doku kültürü yöntemiyle geliştirildi. Sırasıyla primer ve sekonder miseller 27°C’de,
karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edildi. Sekonder misellerden 3’er pelet nutrientbroth’da
27°C’de, 140 rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı. Numuneler soxlet cihazında 80°C,
%70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitotoksite, apoptik ve nekrotik
çalışmalar için hazırlandı. Sitotoksite çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929
Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları 5mg/ml, 2,5mg/ml, 1.25mg/ml, 0.625mg/ml,
0.315mg/ml olarak uygulandı. WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda
440nm dalga boyunda mikroplate okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama
deneyi ile aynı hücre hattında apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama
solüsyonu hazırlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere aynı
konsantrasyonlarda uygulandı. İnkübasyon sonucunda
florasanataçmanlı mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm
yapıldı. Toksite, konsantrasyonlara bağlı olarak değişmektedir. 5mg/ml de
hazırlanan örnekte toksite oranı yüksektir. 2.5mg/ml altında hazırlanan miktarlar
arasında bir fark yoktur. Ayrıca kanser ve normal hücrelerin canlılık değerleri
arasında anlamlı bir fark gözlemlenmemiştir. Örneklerde herhangi bir apoptik ve
nekrotik etki gözlemlenmemiştir.
Russula delica Kanser Sitotoksite Apoptik Etki Nekrotik Etki
Konular | Sağlık Kurumları Yönetimi |
---|---|
Bölüm | Makaleler |
Yazarlar | |
Yayımlanma Tarihi | 11 Ekim 2017 |
Yayımlandığı Sayı | Yıl 2017 Cilt: 12 Sayı: 4 |