Çiğ Sütlerde Antibiyotik Kalıntı Analizlerinde Hızlı Test Metotlarının ve HPLC Tekniğinin Değerlendirilmesi

Öz

Bu çalışmada, farklı prensiplere dayalı üç farklı antibiyotik test kitinin performansları beta-laktam grubu antibiyotiklerden penisilin G, ampisilin, amoksisilin ve kloksasilin ile yapay olarak kontamine edilmiş çiğ süt örneklerinde değerlendirildi. Kontamine edilmemiş çiğ süt örneklerinde immunoreseptör ve enzimatik temelli test kitleri ile yanlış pozitif sonuç alınmadı. Bununla beraber, mikrobiyal inhibisyon temelli test kiti ile bir örnekten yanlış pozitif sonuç elde edildi. Türk Gıda Kodeksi maksimum kalıntı limitlerinde en yüksek hassasiyet oranı immunoreseptör temelli test kiti ile elde edildi. Enzimatik temelli test kitinin maksimum kalıntı limitlerindeki performansının yetersiz olduğu tespit edildi. Çalışmada, örnekteki antibiyotik kalıntılarının C18 katı faz ekstraksiyonu, benzoik anhidrit ve 1,2,4-triazol civa klorid solüsyonu ile türevlendirme ve 325 nm dalga boyunda UV ile tespit prensibine dayanan HPLC metodu kullanıldı. Metot tespit limitleri, ampisilin için 8 μg/kg, amoksisilin için 8 μg/kg; penisilin G için 6 μg/kg ve kloksasilin için 11 μg/kg olarak belirlendi. Ortalama geri kazanımlar % 67.7 ve % 76.6 arasında tespit edildi. Kromatografik metot ile elde edilen tespit limitleri, ampisilin, amoksisilin ve penisilin G için Türkiye ve Avrupa Birliği maksimum kalıntı limitlerinin üzerinde saptandı.

Anahtar Kelimeler

• Beta-laktam, Çiğ süt, Hızlı test kiti, Likit kromatografi

Kaynakça

1. Allison JRD., 1985. Antibiotic residues in milk. Br. J. Pharmacol., 141, 9-16.
2. Andrew SM., Frobish A., Paape MJ., Maturin, LJ., 1997. Evaluation of selected antibiotic residue screening tests for milk from individual cows and examination of factors that affect the probability of false-positive outcomes, J. Dairy Sci., 80, 3050-3057.
3. Anonim. 1991. Commission Decision 91/180 of 14 February 1991. Certain methods of quality analysis of raw milk and heat-treated milk and the principle provisions. Official Journal of the European Communities L 93, (13 April).
4. Anonim. 2000. Determination of ampicillin residues in milk by high performance liquid chromatography. Community Reference Laboratory for Antibiotic Residues. Anonim. 2001. Food and Drug Administration,
5. Bacteriological Analytical Manual, Chapter 3,
6. Aerobic Plate Count.
7. Brito, RB., Junqueira RG., 2006. Determination of Beta- lactam residues in milk by high performance liquid chromatography. Braz. Arch. Biol. Technol., 49, 41- 46.
8. Charm SE., Zomer E., 1995. The evolution and direction of rapid detection/identification of antimicrobial drug residues. In Symposium residues of antimicrobial drugs and other inhibitors in milk. Proceedings. Kiel, Germany, IDF, Brussels, Belgium, 224–233.

9. Güley Z., Akbulut N., 2000. Antimikrobiyal maddeler ve süt teknolojisindeki önemi. 6. Süt ve süt ürünleri sem- pozyumu tebliğler kitabı. 254-265.
10. Huber L., 1998. Validation of analytical methods: review and strategy. LC-GC Int. 96-105.
11. Kang JH., Kondo F., 2001. Occurrence of false-positive results of inhibitor on milk samples using the delvotest sp assay. J. Food Protect., 64, 1211-1215.
12. Macaulay DM., Packard VS., 1981. Evaluation of the methos used to detect antibiotic residues in milk. J. Food Protect., 44, 696-698.
13. Mellenberger RW., 1997. Antibiotic violations increase in Michigan, Michigan Dairy Review, 2.
14. Mitchell JM., Griffiths MW., McEwen SA., McNab WB., Yee AJ., 1998. Antimicrobial drug residues in milk and regulations, tests, and test performance. J. Food Protect., 61, 742-756. concerns, prevalence,
15. Popelka P., Nagy J., Marcıncak S., Rozanska H., Sokol J., 2004. Comparison of sensitivity of various screening assays and liquid chromatography technique for penicillin residue detection ın milk. Bulletin Veterinary Insitute Pulawy, 48, 273-276.
16. Scanella D., Neaves P., Keedy K., Bell C., 1996. An evaluation of delvo x-pres test for beta-lactams in ex-farm raw milk. Int. Dairy J., 7, 93-96.
17. Sorensen LK., Rasmussen BM., Boison JO., Keng L., 1997. Simultaneous determination of six penicillins in cows’ raw milk by a multiresidue high-performance liquid chromatographic method. J. Chromatogr. B, 694, 383-391.
18. Suhren G., Beukers R., 1998. Delvotest sp for detection of kloksasilin and sulfamethoxazole in milk: IDF interlaboratory study. J. AOAC Int., 81, 978-990.
19. Türk Gıda Kodeksi (TGK), 2000. Çiğ süt ve ısıl işlem görmüş içme sütleri tebliği, Tarih: 14.02.2000-23964, Tebliğ No: 2000/6.
20. Türk Gıda Kodeksi (TGK), 2002 Hayvansal kökenli gıdalarda veteriner ilaçları maksimum kalıntı limitleri tebliği, Ek 1, Tarih: 28.04.2002-24739, Tebliğ No: 2002/30.
21. Van Eenennaam, AL., Cullor JS., Perani L, Gardner, AI., Smith WL., Dellinger J., Guterbock WM., Jensen L., 1993. Evaluation of milk antibiotic residue screening tests in cattle with naturally occurring clinical mastitis. J. Dairy Sci., 76, 3041-3052.
22. Van Schaik GM., Lotem YH., Schukken S., 2002. Milk quality in New York state. Trends in somatic cell counts, bacterial counts, and antibiotic residue violations in New York State in 1999-2000. J. Dairy Sci., 85, 782-789.
23. Zvirdauskiene R., Salomskien, J., 2007. An evaluation of different microbial and rapid tests for determining inhibitors in milk, Food Control, 18, 541-547.