DERMAL FİBROBLAST HÜCRELERİNDE OLEUROPEİNİN ANTİOKSİDAN ÖZELLİĞİNİN VE YAŞLANMA ÜZERİNE ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI The Investigation of the Antioxidant Characterization and the Effects on Aging of Oleuropeinine on the Dermal Fibroblast Cells

Yıl 2019, Cilt: 9 Sayı: 2, 16 - 24, 28.06.2019

Günnur Demircan Ümmügülsüm Güzelsoy

Öz

ÖZET

Amaç: Yapılan çalışmada hidrojen peroksit ile oksidatif stres oluşturulmuş dermal fibroblast hücrelerine farklı

dozlarda oleuropein uygulanmış ve oleuropeinin oksidatif strese ve yaşlanma mekanizmasına karşı etkileri

incelenmiştir.

Gereç ve yöntem: Oleuropeinin dermal fibroblast hücreleri üzerindeki toksik etkisi MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-

2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) analiziyle belirlenmiştir. Oksidatif stres oluşturulmuş dermal fibroblast

hücrelerinde oleuropeinin total antioksidan kapasite üzerine etkisi total antioksidan durumu inceleme kiti

ve total oksidan kapasite üzerine etkisi, total oksidan durumu inceleme kiti ile belirlenmiştir. Senesensin (yaşlanmanın)

test edilmesinde standart protokollerde yer alan SA-ß-gal (senescence associated ß-galaktosidase)

aktivitesi hücrelere verilen X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galacto-pyranoside) substratının parçalanması

yöntemi ile ölçülmüştür.

Bulgular: Oleuropeinin toksik doz düzeyi 750 µM olarak saptanmıştır. BJ Fibroblast hücrelerinde 24 saat süre

ile H2O2 ile inkübasyonundan kaynaklanan total oksidan durumunda istatistiksel olarak anlamlı olmayan bir

azalma gözlemlenmiştir (p>0,05). Oleuropein ile muamele edilen BJ Fibroblast hücre gruplarında 24 saat süre

ile H2O2 ile muamele edilen BJ Fibroblast hücre gruplarına göre total antioksidan durumunda istatistiksel

olarak anlamlı bir artış gözlemlenmiştir (p<0,05). H2O2 ile oksidatif stres oluşturulduktan sonra oleuropein

ile muamele edilen hücre gruplarında yaşlanma etkilerinin daha az ortaya çıktığı SA-ß-gal boyama ile tespit

edilmiştir.

Sonuç: Oleuropeinin fibroblast hücrelerinde antioksidan enzim aktivitesini arttırdığı ve buna bağlı olarak oksidatif

stres koşullarında hücrelerde meydana gelen yaşlanma mekanizmalarını azalttığı gözlemlenmiştir.

Anahtar Kelimeler: Oleuropein; Yaşlanma; Oksidatif stres; Fibroblast

ABSTRACT

Aim: In the study, oleuropein was administered to dermal fibroblast cells oxidatively stressed with hydrogen

peroxide at different doses and the effects of oleuropein on oxidative stress and aging mechanism were

investigated.

Materıal Method: The toxic effect of oleuropein on dermal fibroblast cells was determined by MTT

(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) analysis. The effect of oleuropein on total

antioxidant capacity in oxidative stressed dermal fibroblast cells was evaluated with total antioxidant

status determination kit and the effect of oleuropein on total oxidant capacity in oxidative stressed dermal

fibroblast cells was evaluated with total oxidant status determination kit. SA-ß-gal (senescence associated

ß-galactosidase) activity, which is included in standard protocols when senescence is tested, was measured

by the method of disruption of the X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galacto-pyranoside) substrate

given to the cells.

Results: The toxic dose level of oleuropein was determined as 750 µM. A statistically insignificant reduction

in the total oxidant status from incubation with H2O2 for 24 hours was observed in BJ Fibroblast cell line

(p>0,05). A statistically significant increase in the total antioxidant status was observed in oleuropein treated

BJ fibroblast cell groups compared to BJ Fibroblast cell groups treated with H2O2 for 24 hours (p<0,05).

After oxidative stress formation with H2O2, the aging effects in the oleuropein-treated cell groups were less

marked by SA-ß-gal staining.

Conclusion: It has been observed that oleuropein increases the activity of antioxidant enzymes in fibroblast

cells and consequently reduces aging mechanisms in cells under oxidative stress conditions.

Key Words: Oleuropein; Aging; Oxidative stress; Fibroblast

Anahtar Kelimeler

DERMAL FİBROBLAST HÜCRELERİNDE OLEUROPEİNİN ANTİOKSİDAN ÖZELLİĞİNİN VE YAŞLANMA ÜZERİNE ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI The Investigation of the Antioxidant Characterization and the Effects on Aging of Oleuropeinine on the Dermal Fibroblast Cells

Kaynakça

• 1. Öksüzokyar MM, Eryiğit SÇ, Düzen KÖ. et al. Biyolojik Yaşlanma Nedenleri Ve Etkileri. MAKÜ Sağ. Bil. Enst. Derg. 2016; 4(1): 34-41. 2. Skinner JS. Exercise Testing And Exercise Prescription For Special Cases. Lippincott Williams&Wilkýns, Baltimore. Third Edition. 2005; p5. 3. Singal PK, Khaper N, Palace V, Kumar D. The role of oxidative stress in the genesis of heart disease. Cardiovascular Research. 1998; 40: 426 –32 4. Demircan G. Aspirinin Vasküler Endotel Hücre Kültüründe Oksidatif Ve Nitrozatif Stres Üzerine Etkilerinin Araştırılması. Doktora Tezi. Samsun. Ondokuz Mayıs Üniversitesi-Biyoloji Anabilim Dalı. 2011 5. Gökalp H, Kaya M, Zorba Ö. Et Ürünleri İşleme Mühendisliği. Atatürk Üniversitesi Ziraat Fakültesi Yayınları. 2002; 320: 137 6. Sevim D. Antioksidanlar Ve Zeytinyağı. Zeytin Bilimi 1 (1) 2011; 43-47 7. Taner G. Serbest Radikallere Karşı Antioksidan Savunma, Bilim Teknik, 2005; 113: 453 8. Brown JE. Nutrition Now. 2nd Edition, 1999; West/Wadswort, Belmont. 9. Fernandez-Panchon MS, Villano D, Troncoso AM, Garcia-Parrilla MC. Antioxidant Activity Of Phenolic Compounds: From In Vitro Results To In Vivo Evidence. Critical Reviews İn Food Science And Nutrition 2008; 48: 649-671 10. Servili M, Montedoro GF. Contribution Of Phenolic Compounds To Virgin Olive Oil Quality. Eur. J. Lipid Sci. Technol. 2002; 104, 602-613