Investigation of carbapenemase and ESBL status, capsule serotypes, and clinical distribution of virulence genes in Klebsiella pneumoniae isolates

Amaç: Bu çalışmanın iki temel amacı vardır: Birincisi, Türkiye’nin Çukurova bölgesindeki hastanelerde Klebsiella pneumoniae enfeksiyonlarında kapsüler serotipler ve virülans genlerinin prevalansını araştırmak; ikinci olarak karbapenemaz ve ESBL üretimi arasındaki ilişkiyi değerlendirmektir. Gereç ve Yöntem: Toplam 353 K. pneumoniae klinik izolatı yatan ve ayaktan hastaların çeşitli klinik örneklerinden elde edilmiştir. Karbapenem duyarlılığı ve ESBL üretimi, otomatik antimikrobiyal duyarlılık test sistemi kullanılarak ve Kirby–Bauer disk difüzyon yöntemi ile kombinasyon disk testi ile doğrulanarak EUCAST 2025 kılavuzlarına uygun şekilde belirlenmiştir. Genomik DNA, gece boyunca kültürlerden ekstrakte edilmiş ve 16S–23S ITS bölgesine yönelik PCR ile K. pneumoniae varlığı doğrulanmıştır. Kapsüler serotipleri ve virülans genleri, spesifik PCR tabanlı testlerle saptanmıştır. Bulgular: K. pneumoniae izolatlarının %26,1’inde (n=92) karbapenemaz ve %23,2’sinde (n=82) ESBL üretimi saptanmış olup, her ikisi de izolatların %17,3’ünde (n=61) görülmüştür. Kapsüler serotipler izolatların %11,6’sında tespit edilmiş, en sık K2 (%5,1, n=18) ve K5 (%6,5, n=23) gözlenmiş; K1 saptanmamıştır. Virülans genlerinin prevalansı ise mrkD %90, fimH-1 %80, ybtS %92, iutA %78, rmpA %10 ve iroN %2 olarak bulunmuştur. Direnç fenotipleri ile mrkD, ybtS ve iutA arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmış; bu virülans genleri karbapenemaz/ESBL üretimi ile birlikte görülmüştür. Sonuç: Çalışma, Çukurova bölgesindeki K. pneumoniae izolatlarında kapsüler serotipler ve virülans genlerinin dağılımını ortaya koyarak, enfeksiyonların önlenmesi ve akılcı antimikrobiyal tedavi açısından sürekli moleküler izlemenin önemini vurgulamaktadır.

Purpose: This study aimed to (i) determine the prevalence of capsule serotypes and virulence genes in Klebsiella pneumoniae clinical isolates obtained from the Çukurova region of Turkey, and (ii) assess their relationship with carbapenemase and extended-spectrum β-lactamase (ESBL) production. Materials and Methods: A total of 353 K. pneumoniae isolates were recovered from various clinical specimens of both inpatients and outpatients. Carbapenem susceptibility and ESBL production were initially evaluated using an automated antimicrobial susceptibility testing system and subsequently confirmed by the Kirby–Bauer disc diffusion assay and the combined disc method, following EUCAST 2025 guidelines. Genomic DNA was extracted from overnight cultures, and species identification was verified using PCR targeting the 16S–23S ITS region. Capsule serotypes and virulence-associated genes were detected through specific PCR-based assays. Results: Carbapenemase and ESBL production were identified in 26.1% (n = 92) and 23.2% (n = 82) of isolates, respectively, with 17.3% (n = 61) co-producing both enzymes. Capsule serotypes were detected in 11.6% of isolates, predominantly K2 (5.1%, n = 18) and K5 (6.5%, n = 23), whereas K1 was not found. The frequencies of virulence genes were as follows: mrkD (90%), fimH-1 (80%), ybtS (92%), iutA (78%), rmpA (10%), and iroN (2%). A statistically significant association was observed between antimicrobial resistance phenotypes and selected virulence genes, including mrkD, ybtS, and iutA. Conclusion: The findings reveal the distribution of capsule serotypes and virulence determinants among K. pneumoniae isolates circulating in the Çukurova region. These results highlight the importance of sustained molecular surveillance to inform infection control strategies and optimize antimicrobial stewardship.