Kalsiyum elektroporasyonu kolon kanseri hücrelerinde hücre canlılığını, enerji metabolizmasını ve apopitozu düzenler
Öz
Amaç: Bu çalışmada kalsiyum elektroporasyonun kolon kanser hücre hattı DLD-1 üzerinde hücre canlılığı, enerji metabolizması ve hücre hayatta kalma sinyal yolları üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır.
Gereç ve Yöntem: Hücreler, farklı konsantrasyonlarda CaCl2 (1-4 mM) ile tek başına ve elektroporasyon ile kombine edilerek tedavi edildi. Hücre canlılığı MTT analizi ile değerlendirildi. Hücre içi ATP düzeyleri lüminesans temelli yöntem ile belirlendi. PI3K ve PKC protein düzeyleri ELISA yöntemi kullanılarak ölçülürken, apopitotik yanıtın belirlenmesi amacıyla kaspaz-3 aktivitesi florometrik analiz ile değerlendirildi.
Bulgular: Tek başına CaCl2 ile yapılan tedavi hücre canlılığını önemli ölçüde etkilemezken (%92,16), kalsiyum elektroporasyon önemli sitotoksisiteye neden olarak hücre canlılığını 4 mM CaCl2’de %63,16’ya azalttı. Sadece elektroporasyon uygulanan grupta ATP seviyelerinde artış gözlemlenirken, kalsiyum elektroporasyon, kontrol grubundaki 5966,76 nmol/L olan ATP seviyelerini önemli ölçüde azaltarak 1407,78 nmol/L’ye düşürdü. Ayrıca, kalsiyum elektroporasyon PI3K ve PKC protein seviyelerinde azalma meydana getirdi ve kaspaz-3 aktivitesini 1,54 kat artırdı.
Sonuç: Elde edilen bulgular kalsiyum elektroporasyon uygulamasının, DLD-1 hücrelerinde enerji metabolizmasını bozarak, hücre hayatta kalma sinyal yollarını baskıladığı ve apopitotik süreçlerin aktivasyonu ile ilişkili güçlü bir sitotoksik etki oluşturduğunu ortaya koymaktadır.
Anahtar Kelimeler
Kalsiyum elektroporasyon, elektroporasyon, kolon kanseri, hücresel metabolik ve enerji yanıtı
Calcium electroporation modulates cell viability, energy metabolism, and apoptosis in colon cancer cells
Öz
Purpose: This study aimed to evaluate the effects of calcium electroporation on cell viability, energy metabolism, and cell survival signaling pathways in the colon cancer cell line DLD-1.
Materials and Methods: Cells were treated with different concentrations of CaCl2 (1-4 mM) alone and in combination via electroporation. Cell viability was assessed by MTT assay. Intracellular ATP levels were determined using a luminescence-based method. PI3K and PKC protein levels were measured using ELISA, while caspase-3 activity was evaluated by fluorometric analysis to determine the apoptotic response.
Results: While treatment with CaCl2 alone did not significantly affect cell viability (92.16%), calcium electroporation caused significant cytotoxicity, reducing cell viability to 63.16% at 4 mM CaCl2. An increase in ATP levels was observed in the electroporation-only group, whereas calcium electroporation significantly reduced ATP levels from 5966.76 nmol/L in the control group to 1407.78 nmol/L. Furthermore, calcium electroporation decreased PI3K and PKC protein levels and increased caspase-3 activity to 1.54-fold.
Conclusion: The findings indicate that calcium electroporation administration disrupts energy metabolism in DLD-1 cells, suppresses cell survival signaling pathways, and produces a potent cytotoxic effect associated with the activation of apoptotic processes.
Anahtar Kelimeler
Calcium electroporation, electroporation, colon cancer, cellular metabolic and energy response