Yersinia Pestis’ in BioMEMS Tabanlı Elektrokimyasal Cihaz ile Tespiti
Öz
Özet
Yersinia pestis (Y. pestis) tarihsel süreçte yaklaşık 200 milyon insanın ölümüne neden olduğu raporlanan, veba hastalığına neden olan bakteridir. Y.pestis ayrıca kategori A biyolojik ajan olarak sınıflanmaktadır. Hastalığın yayılımı enfekte olmuş insan ya da hayvan yoluyla olmakta, bulaşma sonrası kısa sürede ve yüksek oranda ölümle sonuçlanmaktadır. Bu nedenle müdahele süresini kısaltmak için salgının kaynağını hızlı tespit etmek çok önemlidir. Bu çalışmada, Y. pestis ‘ in hızlı tanısına yönelik biyosensör tabanlı elektrokimyasal ölçüm yöntemi geliştirilmiştir. Elektrokimyasal ölçümler TÜBİTAK BİLGEM’ de geliştirilen elektrokimyasal ölçüm cihazı ile yapılmıştır. Geliştirilen yöntemde mikro işleme teknikleri kullanılarak üretilen altın elektrotların yüzeyine HRP enzimi ile işaretlenmiş ikincil antikora bağlanan Y. pestis in varlığı ve miktarı TMB ile oluşan reaksiyon sonucunda belirlenmiştir. Biyonsensör tabanlı bu yöntem bakteriye spesifik olması, kısa sürede sonuç alınması nedeniyle gün yada saatler mertebesinde gerçekleşen konvansiyonel ölçüm yöntemlerinin yanında önem kazanmaktadır.
Anahtar Kelimeler
Kaynakça
- Cao LK, Anderson GP, Ligler FS, Ezzell J. (1995). Detection of Yersinia pestis fraction 1 antigen with a fiber optic biosensor. J Clin Microbiol. Feb;33(2): 336–41.
- Chase CJ, Ulrich MP, Wasieloski LP, Kondig JP, Garrison J, et al. (2005). Realtime PCR assays targeting a unique chromosomal sequence of Yersinia pestis. Clin Chem. 51:(22), 1778–1785.
- Judy,(2001).J, Microelectromechanical systems (MEMS): Fabrication, design and applications, Smart Materials and Structures. 10(6):1115-1134.
- Lorenz C, Herwegh S, Wallet F, Armand S, Guinet F, Courcol RJ. (2003). Detection of Yersinia pestis in sputum by real-time PCR. J Clin Microbiol.41(10): 4873–5. 22.
- Matero P, Pasanen T, Laukkanen R, Tissari P, Tarkka E, et al. (2009). Real-time multiplex PCR assay for detection of Yersinia pestis and Yersinia pseudotuberculosis. APMIS . 117: 34–44. 26.
- Amoako KK, Goji Nç, McAvin JC, McConathy MA, Rohrer AJ, Huff ,WB, Barnes WJ, et al. (2003). A real-time fluorescence polymerase chain reaction assay for the identification of Yersinia pestis using a field-deployable thermocycler. Mil Med. 168: 852–855. 21.
- Perry, R and Fetherston, J. (1997). Yersinia pestis—Etiologic Agent of Plague, Clinical Microbiology Reviews. 10;1, 35–66.
- Savaş S. (2018). Altın Nanopartikül İşaretli Biyosensör İle E.Coli’nin Hızlı Ve Duyarlı Tespiti. J Biotechnol and Strategic Health Res. 2(2):101-107.
- Savas S, Ersoy A, Gulmez Y, Kilic S, Levent B, Altintas Z. (2018). Nanoparticle Enhanced Antibody and DNA Biosensors for Sensitive Detection of Salmonella. Materials, 11, 1541.
- Simon S, Demeure C, Lamourette P, Filali S, Plaisance M, Cre´minon C, Volland H, Carniel Elisabeth, (2013). Fast and Simple Detection of Yersinia pestis Applicable to Field Investigation of Plague Foci, PLOS ONE. 8;1.