Investigation of Entamoeba histolytica in stool specimens by direct microscopic examination and ELISA in a hospital

Öz

Objectives: Stool antigen assay has been shown to be as sensitive and specific as culture with isoenzyme analysis and to outperform microscopy for the detection of E.histolytica in endemic area. The aim of the present study is to investigate the presence of E.histolytica by di­rect microscopic examination and ELISA in stool samples, comparatively. Materials and methods: Between September 2010 and May 2011, a total of 975 stool samples of patients in dif­ferent age groups were sent to microbiology laboratory of Kızıltepe General Hospital. Native-Lugol method and E.histolytica-specific antigen test (Adhesin Ag, Entamoe­ba CELISA Path) was applied to all stool samples. Results: E.histolytica/dispar cysts and/or trophozoites were observed in 21 out of 975 (2.2%) stool samples ex­amined by native-Lugol method. In addition, E.histolytica-specific antigen in 975 stool specimens was investigated by ELISA. E.histolytica-specific antigen was determined in 4 patients which had E.histolytica/dispar cysts and/or trophozoites at direct microscopic examination. Although at direct microscopy of 3 patients E.histolytica/dispar cysts and/or trophozoites not observed, E.histolytica-specific antigen was found favorable. A total of 7 (0.7%) E.histolytica specific antigen was found in the patient\'s stool samples. Patients with E.histolytica-specific antigen were treated. Conclusion: E.histolytica specific antigen in stool sam­ples should be investigated to avoid unnecessary treat­ment.

Anahtar Kelimeler

• Entamoeba histolytica/dispar, specific anti­gen, ELISA, direct microscopic examination.

Bir hastanede gaita örneklerinde direkt mikroskopik inceleme ve ELISA ile Entamoeba histolitika araştırılması

Öz

Amaç: Dışkı örneklerinde antijen testinin, izoenzim ana­lizi ile birlikte kültür kadar duyarlı ve özgül bir test olduğu ve endemik bölgelerde mikroskopik bakıyı safdışı bıraktı­ğı gösterilmiştir. Bu çalışmanın amacı; dışkı örneklerinde direkt mikroskopik bakı ve ELISA yöntemi ile Entamoeba histolytica varlığının araştırılmasıdır. Gereç ve yöntem: Çalışmaya; Eylül 2010-Mayıs 2011 tarihleri arasında Kızıltepe Devlet Hastanesi Mikrobiyoloji laboratuvarına gönderilen, farklı yaş gruplarındaki hasta­lara ait 975 dışkı örneği dahil edildi. Tüm dışkı örnekleri­ne nativ-Lugol yöntemi ve E.histolytica-özgül antijen testi (Adhesin Ag, Entamoeba CELISA Path) uygulandı. Bulgular: Direkt bakıda nativ-Lugol yöntemi ile incelenen 975 dışkı örneğinin 21\'inde (%2.2) Entamoeba histolytica/dispar kist ve/veya trofozoitleri görüldü. Ayrıca 975 dışkı örneğinde, ELISA yöntemi ile E.histolytica özgül antijeni araştırıldı. Direk mikroskopik bakıda Entamoeba histolyti­ca/dispar kist ve/veya trofozoitleri görülen hastaların sade­ce 4\'ünde E.histolytica özgül antijeninin varlığı tespit edildi. Fakat 3 hastanın direk mikroskopik bakısında Entamoeba histolytica/dispar kist ve/veya trofozoitleri görülmezken E.histolytica özgül antijeni ise pozitif bulundu. Toplam ola­rak 7 (% 0.7) hastanın dışkı örneğinde E.histolytica özgül antijeninin varlığı tespit edildi. E.histolytica özgül antijeni saptanan olgulara uygun tedavi başlandı. Sonuç: Hastaların gereksiz tedavi almasını önlemek için dışkı örneklerinde E.histolytica özgül antijeninin varlığı araştırılmalıdır.

Anahtar Kelimeler

• Entamoeba histolytica/dispar, özgül antijen, ELISA, direk mikroskopik bakı

Kaynakça

1. Fotedar R, Stark D, Beebe N, Marriott D, Ellis J, Harkness J. Laboratory diagnostic techniques for Entamoeba species. Clin Microbiol Rev 2007;20(3):511-32.
2. Stanley SL. Amoebiasis. Lancet 2003;361:1025-34.
3. Gonin P, Trudel L. Detection and differentiation of Entam- oeba histolytica and Entamoeba dispar isolates in clinical samples by PCR and enzyme-linked immunosorbent assay. J Clin Microbiol 2003;41(1):237-41.
4. Nesbitt RA, Mosha FW, Katki HA, Ashraf M, Assenga C, Lee CM. Amebiasis and comparison of microscopy to ELISA technique in detection of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar. J Natl Med Assoc 2004;96(5):671-7.
5. Pillai DR, Keystone JS, Sheppard DC, MacLean JD, MacPherson DW, Kain KC. Entamoeba histolytica and En- tamoeba dispar: epidemiology and comparison of diagnos- tic methods in a setting of nonendemicity. Clin Infect Dis 1999;29(5):1315-8.
6. Pritt BS, Clark CG. Amebiasis. Mayo Clinic Proceedings 2008;83(10):1154-60.
7. Delialioglu N, Aslan G, Ozturk C, Ozturhan H, Sen S, Eme- kdas G. Detection of Entamoeba histolytica antigen in stool samples in Mersin, Turkey. J Parasitol 2008;94(2):530-2.
8. Redondo RB, Martinez Mendez LG, Baer G. Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar: differentiation by En- zyme-Linked Immunosorbet Assay (ELISA) and its clini- cal correlation in pediatrics patients. Parasitol Latinoam 2006;61:37-42.

9. Malatyalı E, Özçelik S, Çeliksöz A. The investigation of En- tamoeba histolytica Prevalance in some villages of Sivas by ELISA method. Turkiye Parazitol Derg 2011;35:6-9.
10. Mengeloglu FZ, Aktas E, Kulah C, Comert Begendik F. De- tection of Entamoeba histolytica in stool specimens with the ELISA Method. Türkiye Parazitol Derg 2009;33(1):1-3.
11. Yildiz Zeyrek F, Ozbilge H, Yüksel MF, Zeyrek CD, Sir- matel F. Parasitic fauna and the frequency of Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar detected by ELISA in stool samples in Sanliurfa, Turkey. Türkiye Parazitol Derg 2006;30(2):95-8.
12. Tuncay S, Inceboz T, Over L, et al. The evaluation of the techniques used for diagnosis of Entamoeba histolytica in stool specimens. Turkiye Parazitol Derg 2007;31(3):188- 93.
13. Tanyuksel M, Petri WA. Laboratory Diagnosis of Amoebia- sis. Clin Microbiol Rev 2003;16(4):713-29.