Damızlık tavuk işletmelerinde tespit edilen mikoplazma infeksiyonları

Öz

Kanatlı hayvanlarda hastalığa neden olan farklı mikoplazma etkenleri bulunmaktadır. Bu etkenlerden Mycoplasma gallisepticum (M. gallisepticum) ve Mycoplasma synoviae (M. synoviae) en önemli türler olup OIE listesinde yer almaktadır. M. gallisepticum ve M. synoviae vertikal bulaşması nedeniyle damızlık sürülerde ayrı bir öneme sahiptir. Özellikle de vertikal bulaşmanın şekillenmesi ve damızlıkların bu infeksiyonlar yönünden ari olması gerektiği için, bu iki infeksiyon etkeninin hızlı, güvenilir bir testle teşhisi neticesinde acil koruma ve kontrol önlemlerinin alınması şarttır. Bu çalışmada 2009 yılında Merkez Veteriner Kontrol ve Araştırma Enstitüsü Kanatlı Hastalıkları Teşhis Laboratuvarı tarafından denetimi yapılan damızlık işletmelerinde polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) ve etken izolasyonu ile tespit edilen mikoplazma infeksiyonları ortaya konmuştur. Enstitümüze bağlı illerde bulunan damızlık işletmelerden alınan kan serumu örnekleri M. gallisepticum ve M. synoviae yönünden serum pleyt aglutinasyon test (SPAT) ve ELISA ile test edildikten sonra, seroloji ile M. synoviae pozitif bulunan damızlık işletmelerden alınan trakeal svap örnekleri PZR ve etken izolasyonu ve identifikasyonu yapılarak incelenmiştir. Damızlık işletmelerin tamamı M. gallisepticum yönünden negatif bulunmuştur. İşletmelerin %8.5’i SPAT, ELISA ve PZR ile M. synoviae pozitif bulunurken ancak %2.5’inden etken izolasyonu yapılabilmiştir. PZR ve etken izolasyonu karşılaştırıldığında ise; PZR ile pozitif bulunan işletmelerin sadece %33.4’ünde etken izolasyonu yapılabilmiştir. M. gallisepticum ve M. synoviae’nın teşhisinde PZR tamamen konvansiyonel kültürel yöntemlerin yerini alamamasına rağmen, bakteriyoloji ile desteklendiğinde erken ve kesin teşhis açısından damızlık sürülerde başta olmak üzere kanatlı endüstrisine faydalı olacaktır.

Anahtar Kelimeler

• Bakteriyoloji
• damızlık sürü
• ELISA
• Mycoplasma synoviae
• PZR
• SPAT

Mycoplasma infections detected in breeder holdings

Öz

Various Mycoplasma species which causes illness at poultry exist. Of the all Mycoplasma spp. Mycoplasma gallisepticum (M. gallisepticum) and Mycoplasma synoviae (M. synoviae) are the most important species and take place in the OIE list. Due to vertical transmission of M. gallisepticum and M. synoviae, they do have an importance at breeder flocks. Urgent protection and control measurements have to be applied according to the results of the diagnosis of rapid and reliable test due to the vertical transmission and Mycoplasma-free required breeder flocks. In this study, Mycoplasma infections diagnosed by polymerase chain reaction (PCR) and agent isolation at the breeder flocks which are controlled by Poultry Diagnosis Laboratory of Central Veterinary Control and Research Institute were introduced. After the serum samples which had been taken from the breeder flocks in the provinces under the responsibility of our institute were tested for M. gallisepticum and M. synoviae by SPAT, ELISA, tracheal swap samples taken from M. synoviae positive breeder flocks were examined by PCR, agent isolation and identification. All the breeder flocks were found to be M. gallisepticum negative by SPAT and ELISA. Of the holdings, while 8.5% were found to be M. synoviae positive by SPAT, ELISA and PCR, agent identification was achieved from 2.5%. Comparison of PCR and bacteriology, agent isolation was done 33.4% solely from the holdings which are found to be M. synoviae positive by PCR. Although PCR can not replace the conventional cultural methods totally for the diagnosis of Mycoplasma spp. it will be useful for poultry industry, especially, poultry breeders, if it is supported by conventional cultural methods in order to rapid and definite diagnosis of Mycoplasma spp.

Anahtar Kelimeler

• Bacteriology
• breeder flock
• ELISA
• Mycolasma synoviae
• PCR
• SPAT

Kaynakça

1. Akan M, İzgür M, Sareyyüpoğlu B, Çiftçi A, İça T, (2008). Tavuklarda Solunum Sistemi Hastalıklarının Epidemiyolojisi. AnkaraÜniv. BAP Projesi-Ankara.
2. Anonim, (2008). Avian Mycoplasmosis (Mycoplasma gallisepticum, M. synoviae) Chapter 2.3.5 in OIE Terrestrial Manual Online. p. 482 - 496. Erişim: [http://www.oie.int/eng/normes/mmanual/2008/pdf/2.03.0 5_%20AVIAN_MYCO.pdf]. Erişim Tarihi: 30.10.2009.
3. Anonim, (2007a). Kuluçkahane ve Damızlık Kanatlı İşletmeleri Yönetmeliği. 20.03.2007 Tarih ve 26468 sayılı Resmi Gazete.
4. Anonim, (2007b). Kuluçkahane ve Damızlık Kanatlı İşletmeleri Yönetmeliği Uygulama Talimatı. 30.11.2007 Tarih ve 43 Numaralı Talimat.
5. Anonim, (1996). National Poultry Improvement Plan and Auxiliary Provisions. United States Department of Agriculture, Animal and Plant Health Inspection Service. APHIS 91-55-031. USDA, Washington, DC.
6. Anonim, (1990). Council Directive on animal health conditions governing intra-Community trade in, and imports from third countries of, poultry and hatching eggs. Council Directive (90/539/EEC).
7. Mardassi BBA, Mohammed RB, Gueriri I, Boughattas S, Mlik B, (2005). Duplex PCR to Differentiate Between Mycoplasma synoviae and Mycoplasma gallisepticum on the Basis of Conserved Species-Specific Sequences of Their Hemagglutinin Genes. J Clin Microbiol. 43 (2), 948- 958.
8. Carli KT, Eyigor A, (2003). Real-Time Polymerase Chain Reaction for the Detection of Mycoplasma gallisepticum in chicken trachea. Avian Dis. 47, 712-717.

9. Cullen GA, Timms LM, (1972). Diagnosis of mycoplasma infection in poultry previously vaccinated with killed adjuvant vaccines. Br Vet J. 128, 94-100.
10. Esendal ÖM, (2002). Mikoplazma infeksiyonları, 79-92, In: Arda, M., Minbay, A., Aydın, N., İzgür, M., Yardımcı, H., Esendal, Ö.M., Erdeğer, J. ve Akan, M., Kanatlı Hayvan Hastalıkları. Medisan Yayınları, No, 26, Ankara.
11. Ewing ML, Laurmen LH, Kleven SH, Brown MB, (1996). Evaluation of diagnostic procedures to detect Mycoplasma synoviae in commercial multiplier-breeder farms and commercial hatcheries in Florida. Avian Dis. 40 (4), 798-806.
12. Frey M L, Hanson RP, Anderson DP, (1968). A Medium for the isolation of Avian Mycoplasmas. Am J Vet Res. 29, 2163-2171.
13. Garcia M, Ikuto N, Levisohn SS, Kleven S.H, (2005). Evaluation and Comparison of Various PCR Methods for Detection of Mycoplasma gallisepticum Infection in Chickens. Avian Dis. 49, 125-132.
14. Garcia M, Jackwood MW, Levisohn S, Kleven SH, (1995). Detection of Mycoplasma gallisepticum, M. synoviae, and M. iowae by Multi-Species Polymerase Chain Reaction and Restriction Fragment Length Polymorphism. Avian Dis. 39, 606-616.
15. Glisson JR, Dawe JF, Kleven SH, (1984). The effect of oil-emulsion vaccines on the occurrence of nonspecific plate agglutination reactions for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae. Avian Dis. 28, 397-405.
16. Gökçelik G, (2008). Mikoplazma infeksiyonlarının teşhisi ve serolojik izleme programlarının önemi. Veteriner Tavukçuluk. Derneği Mektup Ankara 6 (1), 6-11.
17. Heidelberg JF, Shahamat M, Levin M, Rahman I, Stema G, Grim C, Colwell RR, (1997). Effect of aerolization on culturabişklity and viability of gram-negative bacteria. Appl Environ Microbiol. 63, 3585-3588.
18. Kempf I, (1998). DNA Amplification Methods for Diagnosis and Epidemiological Investigations of Avian Mycoplasmosis. Avian Pathol. 27, 7-14.
19. Kleven SH, (2003). Mycoplasma synoviae infection. In: Diseases of Poultry, Saif Y.M., Barnes H.J., Glisson J.R., Fadly A.M., McDougald L.R. & Swayne D.E., eds. Iowa State University Press, Ames, Iowa, USA, 756–766.
20. Kleven SH, (1998). Mycoplasmosis. In D. E. Swayne, J. R. Glisson, M. W. Jackwood, J. E. Pearson, and W. M. Reed (eds.). A laboratory manual for the isolation and identification of avian pathogens, Fourth ed. American Association of Avian Pathologists: Kennett Square, PA, 74—80.
21. Kleven SH, (1997). Changing expectations in the control of Mycoplasma gallisepticum. Acta Vet Hung. 45, 299- 305.
22. Kleven SH, Levisohn S, (1996). Mycoplasma infections of poultry. In J. G. Tully (ed.). Molecular and diagnostic procedures in mycoplasmology. Volume II-Diagnostic Procedures, Vol. II. Academic Press, Inc.: New York, 283- 292.
23. Ley DH, (2003). Mycoplasma gallisepticum infection. In: Diseases of Poultry, Saif Y.M., Barnes H.J., Glisson J.R., Fadly A.M., McDougald L.R. & Swayne D.E., eds. Iowa State University Press, Ames, Iowa, USA, 722–744.
24. Marois C, Picault JP, Kobisch M, Kempf I, (2005). Experimental Evidence of Indirect Transmission of Mycoplasma synoviae. Vet Res. 36, 759-769.
25. Mekkes DR, Feberwee A, (2005). Real-Time Polymerase Chain Reaction for the Qualitative and Quantitative Detection of Mycoplasma gallisepticum. Avian Pathol. 34 (4), 348-354.
26. Noormohammadi AH, Markham PF, Kanci A, Whithear KG, Browning GF, (2000). A novel mechanism for control of antigenic variation in the haemagglutinin gene family of mycoplasma synoviae. Mol Microbiol. 35 (4), 911-23.
27. Roberts DH, Olesiuk OM, (1967). Serological studies with Mycoplasma synoviae. Avian Dis. 11, 104-119.
28. Yoder HW, (1989). Nonspecific reactions to Mycoplasma serum plate antigens induced by inactivated poultry disease vaccines. Avian Dis. 33, 60-8. Geliş Tarihi / Received: 02.11.2009 Kabul Tarihi / Accepted: 13.11.2009 Yazışma adresi / Corresponding author Dr. Asiye Dakman Merkez Veteriner Kontrol ve Araştırma Enstitüsü, Kanatlı Hastalıkları Teşhis Laboratuvarı, 06020, Etlik, Ankara, Türkiye E-posta: [e-mail]