Bacillus Anthracis'in Proteolitik Olmayan,Avirulan, Kapsülsüz Mutant Suşu (29/1 a) ile Hazırlanmış Sapaninli ve Aluıninium Hidroksitli AşıIann Dayanma Müdderleri ve Bağışıklık Sürelerinin Tayini

Öz

B. anthracis'in avirulan, kapsülsüz, proteolitik olmayan mutant suşu (29/la) ile ml. lerinde 10 milyon canlı spor bulunan 2 çeşit (a - %40 gliserin, %60 serum fizyolojik ve %0,1 saponin; b - %30 aluminium hidroksit, %70 serum fizyolojik) aşı hazırlandı Aşıların bağışıklık sürelerini tayin için her bir aşıyla 0,5 ml. deri altı verilmek suretiyle 12 şer baş akkaraman, 12 şer baş merinos olmak üzere 48 baş koyun kullanıldı. Aşılamadan 3, 6, 9 ve 12 ay sonra her bir aşıyla aşılanmış 6 şar baş koyun takriben 10- 100 MLD B. anthracis'in virulan bir suşu ile eprüve edildi. Aşılanmamış 6 şar kontrol koyunda aynı zamanlarda eprüve edildi. Aşılamadan 3 ay sonra yapılan eprüvasyonu takiben aşılı bütün koyunlar hayatta kaldı ve aşılanmamış kontrol koyunlar anthrax'tan öldü, fakat aşılamadan 6, 9 ve 12 ay sonra yapılan eprüvasyonlan takiben saponinli aşıyla aşılanmış koyunların 1/6 ı, Aluminiuro hidroksitli aşıyla aşılanmış koyunların 2/6 ı 3-4 gün içerisinde anthrax'tan öldü, eprüveden sonra . diğerleri hayatta kaldı. Bir tanesi hariç kontrol koyunların hepside anthrax'tan öldü. Ba,ğışıklık testlerinde akkaraman ve merinos koyunlar arasında bir farka rastlanılmadı.Aşıların dayanma müddetlerini tesbit için mutant· suş.la (29/la) hazırlanan saponinli ve alumini um hidroksitli aşılada Türkiye' de· hazırlanan Steme anthrax aşısı oda derecesi ve +4°C. buzdolabında saklandı. Bir yıl boyunca bu aşılardan 2 ayda bir spor sayımları yapıldı. Bağışıklık denemeleri içinde dozda 0,5 ml. olmak üzere 6 şar başlık guruplar halindeki kobaylara deri altı injeksiyon yapık dı. Bu aşılamalar aşıların hazırlandıkları tarihten itibaren 1, 3, 6, 9 ve 12 nci aylarda yapıldı. Aşılamalardan 21 gün sonra kabaylar 100-200 MLD B. anthracis'in Pasteur II suşu ile eprüve edildiler. Aşılanmamış 6 · şar kontrol kobayda keza aynı zamanlarda eprüve dozunu aldılar. , Alınan sonuçlarda: +4°C. de saklanan bütün aşılar 12 ay içerisinde ·gerek canlılıklanndan ve gerekse bağışıklık .verme güçle~ in~en bir ş~y kaybetmediler. Oda derecesinde bekletilen aluminiuro hidroksitli aşı 6 ay, saponinli ve Steme aşısı 8 ay sonra canlılık) arı ile bağışıklık verme kudretlerinden birazını kaybettiler. ·Oda derecesinde 12 ay bekletilen aşıların herbirinden kabayIara 5 milyon spor verilmek suretiyle teste tabi tutulduğunda; bağışıklık verme kudrelerindeki kaybın spor sayısının azalmasına bağlı olduğunu ortaya koydu.

Anahtar Kelimeler

• BACiLLUS ANTHRACiS
• Proteolitik
• Avirulan

Determination of Duration of lmmunity and the Stability of Vaccines with Saponin and Aluminium Hydroxide Prepared by Avirulent, Noncapsulated, Nonproteolytic Mutant Strain (29/ 1 a) of B.Anthracis

Öz

(Determination of vaccines with saponin rule~t, ·noncapsulated, anth'I·acis.) ,- SUMMARY duration of immu~ity a~d the stability of and aluminiuro hydroxide prepared by avinonproteolytic mutant strain (29/la) of B. Two kinds of antrax spore · vaccines (a - 40% glycerol, 60% physlological saline, and 0,1 o/o sapoı'ıin; b - 30% aluminiuro hydroxide, 70% physiological saline) which are contained 10 million viable spores in 1 ml. of each, were prepared by avirulent, noncapsulated, nonproteolytic mutant strain (29/la) of B. anthracis. Determining of duration of immunity 48 sheep were used, each of 12 akkaraman, and f2 Turkish merino sheep were vaccinated subcutaneously with 0,5 ml. of each vaccine. 3, 6, 9, and 12 months after vaccination 6 sheep of each vaccine were challenged with about 10- 100 lethal doses of a virulent strain of B. anthracis.At the same times 6 unvaccinated sheep alsa received the challenge dose. 3 months after vaccination all the vaccinated sheep withstood the chaallenge and the unvaccinated control sheep died from anthrax, but, 6, 9, and 12 months after vaccination about 1/6 of sheep which were vaccinated by saponized vaccine, 2/6 of sheep which were vaccinated by aluminium hydroxide gel vaccine died from anthrax within 3 -4 days, the atlıers withstood after challenge. All control sheep except one died from anthrax. There were no differences in immunity test between akkaraman and merinos sheep. Saponized and aliminium hydroxide gel vaccines which were prepared by mutant strain (29/la) and Sterne's anthrax vaccine which is prepared in Turkey were kept at both room temperature and +4°C. in refrigerator for detection of the stability of the vaccines. Spore counts have been made from these vaccines every 2 months for a year. Test for potency have been made by injecting subcutaneously each of 6 healty guinea pigs groups, with a dose 0,5 ml. of the 3 vaccines. These vaccination have been done at 1, 3, 6, 9, and 12 months from the time of preparation. They were challenged with about 100- 200 lethal doses of Pasteur II strain of B. anthracis after 21 days of vaccination. At the same times 6 unvaccinated guinea pigs have alsa received the challenge dose. The results showed that all the vaccines kept at +4°C. retained their viability and potency for 12 months from the time of preparatioıı. The vaccines kept at room teperature lost same of their viability and potency after 6 months for aluminium hydroxide vaccine, and after 8 n:ı,onths for saponized vaccine and Sterne's vaccine fron) the time of prepaı_:-ation. When anather test was made on guinea pigs which were vaccinated by injecting about S million spores from each vaccine which had been kept at room temperature for about 12 months. li: showed that the lass of potency depended on the reduction of the spore count.

Kaynakça

1. 1 - Alboiv, M., Serban, M., Prodan, D., .1972: (Effect of freeze drying on the resistance of Bacillus anthracis s po res) - Lucrarile inst. de Cercetari Vet~ rinare si Biopreparate <
2. 2 - Anon., 1968 : Bornova Veteriner Kontrol ve Araştırma Enstitüsünün 540- 1/1584 sayıl ·ı raporu.
3. 3 - Avcıt, F. ve Emre, M. N., 1964: Türkiye'de hazırlanan Max-Sterne anthrax aşısı. - Etlik Vet. Bak. Enst. Dergisi 2, 239- 246.
4. 4 - Emre, M.N., ve Durukan, Ş., 1969 : Protaolitik olmayan, avirulan, Bacillus anthracis mutantlarının izolasyonu ve kobaylarda muıkayeseli bağışıklık denemesi ile bu mutantlardan canlı aşı hazırlanması, - Etlik Vet. Bak. Enst. Dergisi 3, 23- 54.
5. 5 - Fubra, E. S., 1966: Nonproteolytic, avirulent Bacill·us anthracis .as a live vaccine. - J. Bacteriol., 91, 930- 933.
6. 6 - Grosso, A. M. and Perez, A.A., 1961 : (Sterne's avirulent anthrax vaccine, testson laboratory animals.) Rev. lnvest. Ganad. No: ll, 51-62. Ref. Vet. Bull ;- 1962 : 32, 1730.
7. 7 - Grosso, A. M. and Perez, A. A., 1963 : (Behaviour of Sterne anthrax vaccine prepared with different vehicles.) - Rev. lnvest. Ganad. No: 18, pp . 324- 328. Ref. Vet. Bull., 1964: 34, 2057.
8. 8 - Guercio, V. and NoJ?ili, i., 1960: La liofilizzazione del vaccino alla saponina contro il carbonchio ematico. - Atti. Soc. ital . Sci. Vet. 14, 763- 766.

9. 9 - Gulrajani, T. S., Misra, R. P., Verma, J. C. and Ahuja, M. L., 1968: Effect of adjuvants on immunising efficacy of Baciil'us anthracis protective antigen .indian Vet. J. 45, 465- 476.
10. 10 - Jacotot, H., et Vi rat, B., 1963 : Vacination contre L'infection charbonneus par injection de bacteridies Tuees en excipient huileux. -Ann. inst . Pasteur., ı 04, 823- 826.
11. 11 - Klei·n, F., De Armon, i. A. Jr., Lincoln, R. E., Mahlaııdt, B .. G. and Ferııelius, A. L., 1962 : immunological studies of Bacillus anthracis ob~ained with protective antigen and live vaccine. - J. lmmunol·. 88, 15 -·19.
12. 12 - Kolesov, S. G. and Mikhailov, N. A., 1956 : ( 1 -:- Trial of aluminium hydroxide anthrax vaccine under field conditions. ll - lmmunogenic properties of aluminium hydroxide vaccine and results of large scale Trials.)Trud. nauchno kont. ins . Vet. Preparatcv. 6, 242- 249, 250- 255. Ref. Vet. BuiL 158 : 28, 1307, 1308.
13. 13 - Kolesov, S. G., 1957 : (Method s of obtaining anthrax vaccine.) - Trud . nauchno kontrol lnst. Vet. Preparatov. 7, 177- 193. Ref. Vet. · Bul i. 1959 : 29, 927.
14. 14 - Kolesov, S. G., Mikhailov, N. A. and Presnov, 1. N., 1961 : (Preparation and use of freeze dried anthrax vaccines.) - Trud: nauchno - Kontrol inst. Vet. Preparatov, 9, 159- 165. Ref. Vet. Bull., 1962: 32, 983.
15. 15 - Lindley, W. H., 1963: Anthrax vaccination.- J. Amer. Vet. Med. Asso. 142, 621 - 623.
16. 16 - 'Lolin, M., 1970 · ~·. ( Reaction of guinea pigs to the S/C 'injection of anthrax vaccine of the South African 34 F2 strain .) -Vet. Gi'asn, 24, 253- 259. Ref. Vet . Bull ., 1970 : 40, 4736.
17. 17 - Molnar, i., 1959 : . immunization experiments with the protective antigen of the anthrax bacillus. - Acta. Vet. Acad. Sci. Hung. 9, 175- 182. Ref. Vet. Bull., 1960 : 30, 327.
18. 18 - Personeus, G., Cooper, M. S. and Percival, R. C., 1956 : Studies on anthrax prepared from non encapsulated variants of Bacillus anthracis . - Amer. J. Vet: Res. 17, ·153 - 156.
19. 19 - Sokol, A., 1"957: (Use of adsorbed live vaccine against anthrax in sheep.)Vet. Cas ., 6, 305-314. Ref. Vet. Bull., 1958; 29, 1306.
20. 20 - Spears, H. N. and Davidson, , J. C., 1959: Anthrax . ·The Vet. Record. 71, 637 - 643.
21. 21 - Sterne, M., 1939: The use of anthrax vacc'ines prepared from avirul~::nt (uncapsulated) variants of Bacillus anthracis.- Onderst. J . Vet. Sci. 13, 307-312.
22. 22 - Ster:ne, M., and Robinson, ·E. M., 1939: The preparation of anthrai< spore · vaccines '(for cattle and Sheep) in south Africa. - Ond~rst . J. Vet . Sci. 12, .9- 20.
23. 23 - Sterne, M., Robinson, E. M. a•~d Nicol, J., 1939 : The use of saponin spore ' vaccine for inoculııtion against ·anthrax in south Africa., - Onderst. J. Vet. S ci. 12, 279 ~ 304.
24. 24 - Sterne, M., 1946: Avi.rulent anth~ax vaccine.- Onderst . J. Vet. Sci. 21,41-44.
25. 25 - Sterne, M., 1948 a : The effect of inflammation on the survival •of guinea pigs infected w ith anthrax.- .Onderst. J . Vet. Sc i. 23, 157 - 164.
26. 26 - Sterna, M., 1948 b : The effect of inflammation on the development of immunity to anthrax in guinea pigs.- Onderst. J . Vet: Sc i., ·23, 165- 170.
27. 27 - Szent • ivanyi, , t, 1960 : Studies on the immunizing properties of non - encapsulated strains of Bacillus anthracis.- Acta. Vet. Acad. Sci. Hung., 10, 239 - 246. Ref. Vet. Bull., ·1961 : 31, 610.
28. 28 - Van-Ness, G. B, ·Piotkin, . S. A., Huffaker, R. H. and Evans, W. G., 1959 : The Oklahoma - Kansas anthrax epizootic of 1957 - J. Vet. Med. Ass., 134, 125 - 129.
29. 29 - Wright, G. G., Hedberg, M. A., and Feinberg, R. J., 1951 : Studies on immunity in anthrax ll - in vitr.o elaboration of protective antigen, by nonproteolytic mutants of Bacillus anthracis.- J. Exp. Med., 93, 523- 527.
30. 30 - Wright, G. G., Puziss, M., and .:Neely, W. B., 1962 : Studies on immunity in anthra:ı< IX - Effect of variations in culturel conditions on etaboration of protective antigen by strains of B. anthracis. - J . Bact. 83, 515 - 522.