CD19 EKSİKLİĞİ TANISINDA RFLP YÖNTEMİNİN KULLANIMI
Öz
B lenfosit yüzeyinde bulunan CD19 molekülü olgun B hücrelerinde CD21, CD81, CD225 ile birlikte CD19 kompleksini oluşturur ve antijen uyarısı ile birlikte B lenfosit aktivasyonunu düzenler. CD19 molekülünü kodlayan gende oluşacak mutasyonlar, CD19 protein ekspresyonunu etkilemekte ve primer immün yetmezlik (PIY) tablosu ortaya çıkmaktadır. Bu çalışmada CD19 eksikliği tanısıyla izlediğimiz hastamızın 3 aylık bebeğinin, RFLP yöntemiyle aynı gen mutasyonu yönünden değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Çalışmaya bilinen CD19 mutasyonlu hasta, bu hastanın yeni doğan bebeği ile hastanın annesi ve iki sağlıklı kontrol dahil edilmiştir. Mutasyon analizi için ilk olarak CD19 genindeki mutasyon bölgesini kapsayan primerler dizayn edilip PZR-RFLP işlemi gerçekleştirilmiştir. Oluşan DNA fragmentleri agaroz jel elektoroforezinde görüntülenip genotiplemesi yapılmıştır. Hastamızın CD19 geninin ekzon 6’da saptanan çerçeve kayması mutasyonu (c.973_973insA) yönünden bebeğinin ve annesinin taşıyıcı olduğu PZR-RFLP yöntemi ile gösterilmiştir. PZR-RFLP yönteminin, bilinen mutasyonların belirlenmesinde kullanılabilecek ucuz, hızlı ve güvenilir bir yöntem olduğu kanısındayız.
Anahtar Kelimeler
Destekleyen Kurum
Necmettin Erbakan Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinatörlüğü
Proje Numarası
182018008
Teşekkür
Necmettin Erbakan Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinatörlüğü
Kaynakça
- 1. Picard C, BobbyGaspar H, Al-Herz W, Bousfiha A, CasanovaJL,ChatilaT,Crow YJ, Cunningham-RundlesC,EtzioniA,FrancoJL, Holland SM,KleinC,MorioT,Ochs HD, OksenhendlerE,PuckJ,TangMLK,TangyeSG,TorgersonTR,SullivanKE.InternationalUnion of Immunological Societies:2017 PrimaryImmunodeficiencyDiseasesCommittee Report on InbornErrors of Immunity.JClin Immunol.2018 Jan;38(1):96-128.
- 2. Ballow M. Primaryimmunodeficiencydisorders:antibodydeficiency. J AllergyClinImmunol 2002;109:581-91.
- 3. Wang K, Wei G, Liu D. CD19: Abiomarkerfor B celldevelopment,lymphomadiagnosisandtherapy.ExpHematolOncol 2012; 29;1(1):36.
- 4. Şekerel BE. Çocukluk Çağında Allerji Astım İmmünoloji.Bilnet Matbaacılık ve Ambalaj A.Ş. 2015;99-126.
- 5. VanZelmMC.Reisli I. Van der Burg M.CastañoD. ve ark.An antibody-deficiencysyndromeduetomutations in the CD19 gene.NEng JMed.2006;354(18):1901-12.
- 6. Reisli İ,ArtaçH,PekcanS,KaraR,YümlüK,KaragölC,ÇimenÖ,ŞenM,ArtaçM.CD19 molekül eksikliği:Bir köy taraması. Tur Arch Ped. 2009;44: 127-30.
- 7. Dib C,Faure S, Fizames C, Samson D, Drouot N, VignalA, ve ark. A comprehensivegeneticmap of thehumangenomebased on 5,264 microsatellites. Nature. 1996;380(6570):152-54.
- 8. Ota M.,Fukushima H., Kulski JK., Inoko H. Singlenucleotidepolymorphismdetectionbypolymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism. NatProtocols. 2007;2(11):2857-64.
- 9. Karaselek MA, Kapaklı H, Keleş S, Güner ŞN, Çelik ŞÇ, Kurar E, Reisli İ. Intrauterinedetection of DCLRE1C (Artemis) mutationbyrestrictionfragmentlengthpolymorphism. Pediatr AllergyImmunol. 2019;30(6):668-71.