Araştırma Makalesi

Yüksek Çözünürlüklü Kütle Spektrometrenin Eşzamanlı Çoklu Mantar Toksin Tayinleri Üzerindeki Etkisi

Cilt: 10 Sayı: 4 15 Ekim 2020
PDF İndir
TR EN

Yüksek Çözünürlüklü Kütle Spektrometrenin Eşzamanlı Çoklu Mantar Toksin Tayinleri Üzerindeki Etkisi

Öz

Amatoksinler, insanlarda ishalden organ işlev bozukluğuna kadar ciddi zehirlenmelere neden olan ölümcül yabani mantar toksinleridir. Spesifik bir tedavi uygulanmazsa mortalite %80 kadar yüksek olabilir. Bu çalışmada Amanita phalloides' e ait 7 tane toksinin eş zamanda belirlenmesi için ayırma ve tayin yöntemleri geliştirildi. Amanita phalloides (ölüm kapağı) yabani mantarının ekstraksiyonu ve saflaştırılmasının ardından toksinler, HPLC-ESI MS ve LC-doğru kütle uçuş zamanlı MS (TOF-MS) pozitif iyonizasyon modu kullanılarak tespit edildi. Ayrıca α- ve β-amanitin toksinlerinin LC'de birbirlerine çok yakın alıkonmaları (Rt) durumunda HR-MS özellikteki dedeksiyon sayesinde birbirlerinden ayırt edilmesinin mümkün olduğu görüldü. Kromatogramda aynı alıkonma noktasında iki toksin varlığı HR-MS sayesinde α-amanitinin C13 izotop kütlesi (920.3696 DA) ile β-amanitinin moleküler iyon kütlesinin (920.3514 DA) farklandırılması yapılarak tespit edildi. Optimize edilmiş her iki yöntem birbirleriyle karşılaştırılarak mevcut yöntemlere göre daha hızlı ve geniş spektrumlu toksin tanımlaması geçekleştirildi. Bu çalışmada aynı yöntem ile eş zamanda yedi adet toksinin hızlı ve doğru tanımlanması büyük önem taşımaktadır. Özellikle zehirlenmenin yabani mantardan kaynaklı olduğunun belirlenmesi ile tedavi sürecinde önemli katkılar sağlayacaktır.

Anahtar Kelimeler

Amanitin , Amatoksin , HPLC ESI/MS , LC-TOF MS , Mantar Zehirlenmesi , Falloidin

Kaynakça

  1. Barceloux, D.G., 2008. Medical Toxicology of Natural Substances Part 2: FUNGAL TOXINS/ Mushrooms/Chapter 37:Amatoxin - Containing Mushrooms, 265-284pages.
  2. Beavis, R.C., 1993. Chemical Mass of Carbon in Proteins. Analytical Chemistry 65 (4): 496–97. https://doi.org/10.1021/ac00052a030.
  3. Burlingame, A. L., Whitney, J.O. ve Russell D.H.,1984. Mass Spectrometry. Analytical Chemistry. Vol. 56. https://doi.org/10.1021/ac00269a027.
  4. Clarke, D.B., Lloyd, A.S. ve Robb, P., 2012. Application of Liquid Chromatography Coupled to Time-of-Flight Mass Spectrometry Separation for Rapid Assessment of Toxins in Amanita Mushrooms. Analytical Methods 4 (5): 1298. https://doi.org/10.1039/c2ay05575a.
  5. Damme, T.V., Blancquaert, D., Couturon, P., V.D.S., Dominique, Sandra, P. ve Lynen, F., 2014. Wounding Stress Causes Rapid Increase in Concentration of the Naturally Occurring 2′,3′-Isomers of Cyclic Guanosine- and Cyclic Adenosine Monophosphate (CGMP and CAMP) in Plant Tissues. Phytochemistry. https://doi.org/10.1016/j.phytochem.2014.03.013.
  6. Defendenti, C., Bonacina, E., Mauroni, M. ve Gelosa, L., 1998. Validation of a High Performance Liquid Chromatographic Method for Alpha Amanitin Determination in Urine. Forensic Science International 92 (1): 59–68. https://doi.org/10.1016/S0379-0738(98)00006-1.
  7. Garcia, J., Vera, M.C., Baptista, P., Bastos, M.de L., ve Carvalho, F., 2015. Quantification of Alpha-Amanitin in Biological Samples by HPLC Using Simultaneous UV- Diode Array and Electrochemical Detection. Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences 997: 85–95. https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2015.06.001.
  8. Gicquel, T., Lepage, S., Fradin, M., Tribut, O., Duretz, B. ve Morel, I., 2014. Amatoxins (Amanitin) and Phallotoxin (Phalloidin) Analyses in Urines Using High-Resolution Accurate Mass LC-MS Technology. Journal of Analytical Toxicology 38 (6): 335–40. https://doi.org/10.1093/jat/bku035.
  9. Gonmori, K., Fujita, H., Yokoyama, K., Watanabe, K. ve Suzuki, O., 2011. Mushroom Toxins: A Forensic Toxicological Review. Forensic Toxicology 29 (2): 85–94. https://doi.org/10.1007/s11419-011-0115-4.
  10. Gonmori, K., Minakata, K., Suzuki, M., Yamagishi, I., Nozawa, H., Hasegawa, K., Wurita, A., Watanabe, K. ve Suzuki, O., 2012. MALDI-TOF Mass Spectrometric Analysis of α-Amanitin, β-Amanitin, and Phalloidin in Urine. Forensic Toxicology 30 (2): 179–84. https://doi.org/10.1007/s11419-012-0145-6.

Kaynak Göster

APA
Numanoğlu Çevik, Y. (2020). Yüksek Çözünürlüklü Kütle Spektrometrenin Eşzamanlı Çoklu Mantar Toksin Tayinleri Üzerindeki Etkisi. Gümüşhane Üniversitesi Fen Bilimleri Dergisi, 10(4), 878-886. https://doi.org/10.17714/gumusfenbil.680816