Kan Kültürlerinden İzole Edilen Candida Suşlarında Virulans Faktörlerinin ve Antifungal Duyarlılıklarının Değerlendirilmesi

Öz

Amaç: Bu çalışmanın amacı kankültürlerinden izole edilen Candida albicans ve albicans dışı Candida suşlarında çeşitli virulans faktörlerinin değerlendirilmesi ve bu suşların antifungal duyarlılıkların saptanması amaçlanmıştır.

Gereç ve Yöntem: Bu çalışmada kan kültürlerinden izole edilen 34 Candida suşu fosfolipaz, esteraz, hemolitik aktivite, slime üretimleri ve antifungal duyarlılık açısından değerlendirilmiştir. Çalışmaya kontrol grubu olarak, sağlıklı bireylerin oral florasından izole edilen 39 Candida suşu dahil edilmiştir. Bulgular: İzole edilen 34 kandida suşunun 15’i Candidaalbicans, 9’u Candida parapsilosis, 2’si Candida tropicalis, 3’ü Candida glabrata, 2’si Candida famata, 1’i Candida sake, 1’i Candida krusei ve 1’ si  Candida kefyr olarak tespit edilmiştir. C.albicans suşlarında fosfolipaz, esteraz, β  hemolitik aktivite ve slime üretimleri sırasıyla %93.3  %73.3  %93.3 ve %6.6, albicans dışı Candida suşlarında ise  %73.6 ,%21, %68.4 ve %26.3 olarak tespit edilmiştir. Hasta grubunda izole edilen C.albicans ve albicans dışı Candida suşlarında fosfolipaz ve β hemolitik aktivitenin kontrol grubuna göre anlamlı şekilde yüksek olduğu saptanmıştır (p<0.05). Tüm Candida suşları amfoterisin  B  ve  flusitozine duyarlı iken, bir C. glabrata suşunun sadece flukonazole dirençli, dört C. albicans, bir C. tropicalis ve bir C. crusei suşunun flukanazol ve itrakonazole dirençli, bir C. famata suşunun  flukonazole dirençli ve itrakonazole orta duyarlı, bir C. glabrata suşunun  itrakonazole dirençli olduğu görülmüştür. 

Sonuç: Virulans faktörlerinin belirlenmesinin Candida infeksiyonlarının patogenezinin açıklanmasına ve yeni antikandidal tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olabilir. Candida türlerinin tiplendirilmesinin ve antifungal duyarlılık testlerinin yapılmasının tedaviye önemli katkı sağlayacaktır. İzole edilen tüm suşların amfoterisin B ve flusitozine duyarlı olmasından dolayı amfoterisin B ve flusitozinin ampirik tedavide kullanılabileceği kanaati oluşmuştur.

Anahtar Kelimeler

• Candida,kan kültürü,virulans fantörleri,antifungal duyarlılık

Evaluation Of Virulence Factors and Antifungal Susceptibility in Candida Strains İsolated From Blood Cultures

Öz

Aim: The aim of this study was to evaluate various virulence factors in Candida albicans and non-albicans Candida strains isolated from blood cultures and to determine the antifungal susceptibilities of these strains.

Material and Methods:  In this study, 34 Candida strains isolated from blood cultures were evaluated for phospholipase, esterase, hemolytic activity, slime production, and antifungal susceptibility.  A total of 39 Candida strains isolated from oral flora of healthy individuals were included in the study as a control group. Results: The distribution of detected overall 34 candida species was as follows: Candida albicans (n=15), Candida parapsilosis (n=9), Candida glabrata (n=3), Candida tropicalis (n=2), and Candida famata  (n=2), Candida sake (n=1), Candida krusei (n=1) and Candida kefyr (n=1). Phospholipase, esterase, β hemolytic activity and slime production was detected 93.3%, 73.3%, 93.3% and 6.6% in C.albicans strains and 73.6%, 21%, 68.4% and 26.3%in non-albicans Candida strains respectively. Phospholipase and β hemolytic activity were significantly higher in the C.albicans and non-albicans Candida strains isolated in the patient group compared to the control group (p <0.05). While all Candidastrains were susceptible to amphotericin B and flucytosine, one C. glabrata strain was resistant to fluconazole, four C. albicans, one C.tropicalis and one  C. crusei strain were resistant to fluconazole and itraconazole,  one C. famata strain was resistant to fluconazole and intermediately susceptible to itraconazole and one  C. glabrata was resistant to itraconazole. 

Conclusion: In the study, it was determined that the production of phospholipase and β hemolysin in C. albicans and non-albicans Candida strains isolated from the patient group was higher than the controlt group. Determination of virulence factors may help explain the pathogenesis of Candida infections and develop new anticandidal treatments.Identification and anti fungal susceptibility testing are important for management of appropriate therapy.As all strains were susceptible to amphotericin B and flucytosine, it was concluded that it could be used in empirical treatment.

Anahtar Kelimeler

• Candida,blood-cultures,virulence factors,antifungal susceptibility

Kaynakça

1. 1. Ener B. Hastane İnfeksiyonu Etkeni Olarak Mantarlar. Ş. UstaÁelebi (ed) Temel ve Klinik Mikrobiyoloji. Ankara. 1999:1123-8.
2. 2. Fridkin SK, Jarvis WR. Epidemiology of nosocomial fungal infections. Clin Microbiol Rev. 1996;9(4):499-511.
3. 3. Lewis RE, Klepser ME.The changing face of nosocomial candidemia: epidemiology, resistance, and drug therapy. Am J Health Syst Pharm. 1999;15;56(6):525-33.
4. 4. Wright WL, Wenzel RP.Nosocomial Candida. Epidemiology, transmission, and prevention. Infect Dis Clin North Am. 1997;11(2):411-25.
5. 5. Cheng MF, Yang YL, Yao TJ, Lin CY, Liu JS, Tang RB, Yu KW, Fan YH, Hsieh KS, Ho M, Lo HJ. Risk factors for fatal candidemia caused by Candida albicans and non-albicans Candida species.BMC Infect. Dis. 2005;7(5):22.
6. 6. Espinel-Ingroff A, White T, Pfaller MA. Antifungal agents and susceptibility test methods. In: Murray PR, Baron EJ, Tenover FC, Yolken RH, editors. Manual of Clinical Microbiology 2003. 8th ed. ASM Press; Washington, DC: pp. 1859–80.
7. 7. Kuştimur S. Candida patogenezinde rol oynayan faktörler. Mikrobiyoloji Bülteni. 1994; 28: 175-81.
8. 8. Cutler JE. Putative virulence factors of Candida albicans. Annu. Rev. Microbiol. 1991;45:187-218.

9. 9. Clinical and Laboratory Standards Institute. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts, Approved Standard. CLSI Document M27-A3. Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA, USA 2008.
10. 10. Mutlu Sarıgüzel F, Koç AN, Karagöz S. Kan Kültürlerinden İzole Edilen Maya Türlerinin Vitek 2 Sistemi ile Tanımlanması ve Antifungal Duyarlılıkları Harran Üniv. Tıp Fak Derg. 2015;12(2):261-8.
11. 11. Etiz P, Kibar F, Ekenoğlu Y, Yaman A. Kan kültürlerinden izole edilen Candida türlerinin dağılımının ve antifungal duyarlılıklarının retrospektif olarak değerlendirilmesi. ANKEM. 2015;29(3):105-113
12. 12. Almirante B1, Rodríguez D, Cuenca-Estrella M, Almela M, Sanchez F, Ayats J, Alonso-Tarres C, Rodriguez-Tudela JL, Pahissa A. Epidemiology, risk factors, and prognosis of Candida parapsilosis bloodstream infections: case-control population-based surveillance study of patients in Barcelona, Spain, from 2002 to 2003. J Clin Microbiol. 2006;44(5):1681-5.
13. 13. Çalışkan E, Dede A, Biten Güven G. Kan kültürlerinde saptanan Candida türlerinin dağılımı ve antifungal duyarlılıkları ANKEM Derg. 2013;27(1):25-30.
14. 14. Monroy-Pérez E, Paniagua-Contreras GL, Rodríguez-Purata P, Vaca-Paniagua F, Vázquez-Villaseñor M, Díaz-Velásquez C, Uribe-García A, Vaca S High Virulence and Antifungal Resistance in Clinical Strains of Candida albicans. Can J Infect Dis Med Microbiol. 2016;2016:5930489. doi: 10.1155/2016/5930489. Epub 2016 Dec 12.
15. 15. Dabiri S, Shams-Ghahfarokhi M, Razzaghi-Abyaneh M. Comparative analysis of proteinase, phospholipase, hydrophobicity and biofilm forming ability in Candida species isolated from clinical specimens.J Mycol Med. 2018;28(3):437-42.
16. 16. Borst A, Fluit AC. High levels of hydrolytic enzymes secreted by Candida albicans isolates involved in respiratory infections.J Med Microbiol. 2003;52(Pt 11):971-4.
17. 17. Dağdeviren M, Çerikçioğlu N, Karavuş M. Hastanede yatan fungemili hastalardan izole edilen Candida parapsilosiskökenlerinin virülans faktörleri. Türk Mikrobiyol Cem Derg. 2003;33(4):315-22.
18. 18. Ibrahim AS, Mirbod F, Filler SG, Banno Y, Cole GT, Kitajima Y, Edwards JE Jr, Nozawa Y, Ghannoum MA Evidence implicating phospholipase as a virulence factor of Candida albicans.Infect Immun. 1995;63(5):1993-8.
19. 19. Slifkin M. Tween 80 opacity test responses of various Candida species. J Clin Microbiol. 2000;38(12):4626-8.
20. 20. Yücesoy M, Marol S. Candida türlerinin esteraz aktivitesinin belirlenmesi. Mikrobiyol Bul. 2003;37:59-63.
21. 21. Manns JM, Mosser DM, Buckley HR. Production of hemolytic factor by Candida albicans. Infection and Immunity. 1994;62(11):5154-6.
22. 22. Luo G, Samaranayake LP, Yau JY. Candida species exhibit differential in vitro hemolytic activities.J Clin Microbiol. 2001;39(8):2971-4.
23. 23. Alan MS, Caron A (eds): A Practical Quide to Medically Important Fungi and the Diseases They Cause. Philedephia, Lippincott-Raven Publishers (1996).
24. 24. Pfaller MA, Messer SA, Hollis RJ.Variations in DNA subtype, antifungal susceptibility, and slime production among clinical isolates of Candida parapsilosis. Diagn Microbiol Infect Dis. 1995;21(1):9-14.
25. 25. Yakupoğulları Y, Aşçı Toraman Z.Çeşitli Klinik Örneklerden Soyutlanan Candida Kökenlerinde Slime Faktörü Üretiminin Araştırılması. Türk Mikrobiyol Cem Derg. 2004;34:178-81.