Tc99m Kullanımının Kütle Spektrometri Tekniğiyle Ölçülen Takrolimus, Everolimus, Sirolimus ve Siklosporin A Düzeylerine Etkisinin Değerlendirilmesi

Öz

Amaç: Sintigrafik görüntüleme tekniklerinde kullanılan Tc99m maruziyetinin kan LC/MS-MS ile ölçümü yapılan takrolimus, everolimus, sirolimus ve siklosporin A düzeylerine etkisinin deneysel araştırılmasıdır.

Materyal ve Metod: Çalışma için HPLC solvent ve reaktifleri (Jasem, Türkiye) ilekalibratör ve kontrol solüsyonları kullanıldı. İnterferans çalışması için Tc99m preparatı kullanıldı. İmmunsupresan ölçümü ShimadzuNexera X2 ultra yüksek performans likit kromatografi (UHPLC) ile entegrasyonu sağlanmış Shimadzu 8045 triplequadrupole kütle spektrometrisi (MS/MS) (Shimadzu, Japan) ile yapıldı. Cihaz verileri Shimadzu Software ile hesaplandı. Örnek hazırlama için, 500 mikrolitre(uL) kontrol solusyonu santrifüj tüpüne alındı. Üzerine 25 uLinternalstandard eklenip 5 saniye vorteksle karıştırıldı. İnterferans çalışması için tüm işlemler level1, level2 ve level3 kontrol solüyonları için tekrarlandı ve cihaza okutuldu. Her seviye kontrole 50 uLdistile su eklenerek interferans çalışması tekrarlandı.

Bulgular: Sirolimus ölçümlerinde %6,28 - %47,21 aralığında bias tespit edildi. Takrolimus düzeyleri %21,81 ile %44,62 aralığında hedef değerden saptı. Siklosporin A seviyeleri için %9,30- %43,16 oranları arasında bias hesaplandı. En az sapma %6,28 ile Sirolimus seviye 3 de, en fazla sapma sirolimus seviye 1 de gözlendi.

Sonuç: Sintagrafik çekimlerde kullanılan Tc99m radyonüklidinin LC/MS-MS cihazlarıyla ölçümü yapılan immunsüpresan düzeylerini etkileyebilme potansiyeli bulunmaktadır. Bu konuda numune alımı yapan sağlık personelleri bilgilendirilmeli, şüpheli sonuçlarda hekimler interferans ihtimalini düşünmelidir.

Anahtar Kelimeler

• tc99m
• interferans
• LC/MS-MS

Evaluation of the Effect of Tc99m Usage on Tacrolimus, Everolimus, Sirolimus and Cyclosporin a Levels Measured by Mass Spectrometry

Öz

Background:To investigate the effect of Tc99m exposure on tacrolimus, everolimus, sirolimus and cyclosporin A levels measured by blood LC / MSMS used in scintigraphic imaging techniques.

Methods: HPLC solvents, reagents (I Jasem, Turkey), calibrator and control solutions for the study were employed. The Tc99m preparation was used for the interference study. Immunosuppressant measurement was performed by Shimadzu 8045 triple quadrupole mass spectrometry (MS / MS) (Shimadzu, Japan), which was integrated with Shimadzu Nexera X2 ultra high-performance liquid chromatography (UHPLC). Device data was calculated with Shimadzu Software. For sample preparation, 500 microliters (LL) of control solution was transferred to the centrifuge tube. 25 uL of internal standard was added and mixed with vortex for 5 seconds. All procedures for interference study were repeated for level1, level2 and level3 control solutions and performed by LC/MS-MS. Interference protocol was repeated by adding 50uL of distilled water to each level of control.

Results:Bias was detected in the range of 6.28% to 47.21% in all sirolimus measurements. Tacrolimus levels deviated from the target value in the range of 21.81% to 44.62%. For cyclosporine A levels, bias was calculated between 9,30% - 43,16%. The least deviation was observed in Sirolimus level 3 with 6.28% and the maximum deviation was observed in sirolimus level 1.

Conclusion:The Tc99m radionuclide used in scintigraphic imaging has the potential to affect immunosuppressant levels measured by LC / MS-MS devices. Health service staffs making sampling should be informed about this and physicians should consider the interference posibility in suspicious immunosuppressant concentrations.

Anahtar Kelimeler

• Tc99m
• Interference
• LC/MS-MS

Kaynakça

1. [30] Bonfiglio, R.; King, R.C.; Olah, T.V.; Merkle, K., The effects of sample preparation methods on the variability of the electrospray ionization response for model drug compounds. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 1999, 13, (12), 1175-1185.[31] King, R.; Bonfiglio, R.; Fernandez-Metzler, C.; Miller-Stein, C.; Olah, T., Mechanistic investigation of ionization suppression in electrospray ionization. Journal of the American Society for Mass Spectrometry, 2000, 11, (11), 942-950.[32] Tong, X.S.; Wang, J.; Zheng, S.; Pivnichny, J.V.; Griffin, P.R.; Shen, X.; Donnelly, M.; Vakerich, K.; Nunes, C.; Fenyk-Melody, J., Effect of signal interference from dosing excipients on pharmacokinetic screening of drug candidates by liquid chromatography/mass spectrometry. Analytical chemistry, 2002, 74, (24), 6305-6313.