C6 SIÇAN GLİOMA HÜCRELERİ ÜZERİNE ALOE EMODİN VE CİSPLATİNİN ETKİLERİNİN İKİ VE ÜÇ BOYUTLU HÜCRE KÜLTÜR MODELLERİNDE İNCELENMESİ

Öz

Amaç: Bu çalışmanın amacı, doğal bir antrakinon türevi olan aloe emodin ve organoplatinler grubundan kemoteropatik bir ilaç olan cisplatinin ayrı ayrı ve birarada kullanıldıklarında C6 glioma hücre soyu üzerine etkilerini iki ve üç boyutlu tümör hücre kültür modelleri kullanılarak incelemekti. Gereç ve yöntem: İki boyutlu kültürlerde iki ilacın ayrı ayrı ve birlikte kullanımları 12, 24, 48, 72. saatlerde hem hücre çoğalması, hem de hücre siklusu sentez fazı açısından incelendi. Üç boyutlu hücre kültürü modelinde ise her iki ilacın ayrı ayrı ve kombine kullanımları 72. saatte hücre siklusu sentez fazı ve hücre ince yapısı açısından değerlendirildi. Bulgular: Aloe emodin, iki boyutlu kültürde hücre çoğalmasını azaltıcı etki gösterdi ve hücre siklusu sentez fazı işaretlenmesinde azalma meydana getirdi (p < 0,0125). Üç boyutlu kültürde de sentez fazında azalmaya yol açtığı görüldü (p < 0,0125). Sferoid morfolojisinde belirgin bir bozukluk tespit edilmedi. Cisplatin de iki boyutlu kültürde hücre çoğalmasını azalttı ve hücre siklusu sentez fazı işaretlenmesinde daha belirgin azalma meydana getirdi (p < 0,0125). Üç boyutlu kültürde de sentez fazında daha etkin azalmaya yol açtığı görüldü (p < 0,0125). Sferoidlerin genel morfolojileri kontrol ve aloe emodin grubuna göre bozuktu. Kombinasyon grubunda iki ve üç boyutlu kültürlerde elde edilen bulgular cisplatin grubunda elde edilen bulgularla benzerdi. Sonuç: Aloe emodin ve cisplatin kombine uygulandıklarında C6 glioma hücreleri üzerine etkileri iki ve üç boyutlu kültür modellerinde incelendiğinde hücre siklusunda sentez fazındaki hücrelerin sayısında azalmaya yol açarak hücre proliferasyonunu azalttığı ve hücre yapısında bozulmaya yol açtığı gözlendi. Ancak aloe emodinin cisplatinin etkisini arttırıcı ya da azaltıcı yönde bir etkisinin bulunmadığı da tespit edildi.

Anahtar Kelimeler

• Aloe emodin, cisplatin, C6 glioma, sferoid, hücre kültürü

Kaynakça

1. Algier LA., Hanoğlu Z, Özden G, Kara F. The use of comple- mentary and alternative (non-conventional) medicine in cancer patient in Turkey. Eur J Oncol Nurs 2005;9: 138-146.
2. Bell HS, Whittle IR, Walker M, Leaver HA, Wharton SB. The development of necrosis and apoptosis in glioma: experimental findings using spheroid culture systems. Neuropathol Appl Ne- urobiol 2001; 27:291-304.
3. Fenig E, Nordenberg J, Beery E, Sulkes J, Wasserman L. Com- bined effect of aloe-emodin and chemotheraeputic agents on the proliferation of an adherent variant cell line of Merkel cell carci- noma. Oncol Rep 2004;11:213-217.
4. Graham AC, Cloughesy TF. Brain tumor treatment: chemothe- rapy and other new developments. Semin Oncol Nurs 2004; 20:260-272.
5. Grobben B, De Deyn, PP, Slegers H. Rat C6 glioma as experi- mental model system for the study of glioblastoma growth and invasion. Cell Tissue Res 2002;310:257-270.
6. Hall MD, Martin C, Ferguson DJP, Phillips RM, Hambley TW, Callaghan R. Comperative efficacy of novel platinum (IV) com- pounds with established chemotherpeutic drugs in solid tumour models. Biochem Pharmaco 2004; 67:17-30.
7. Krajcı D, Mares V, Lisa V, Bottone MG. Pelliciari C. Intranucle- ar microtubules are hallmarks of an usual form of cell death in cisplatin-treated C6 glioma cells. Histochem. Cell Biol 2005;125:183-191.
8. Kunz-Schughart LA, Freyer JP, Hofstaedter F, Ebner R. The use of 3-D cultures for high-throughput screening: the multicellular spheroid model. J Biomol Screen 2004; 9: 273-285.

9. Kuo PL, Lin TC, Lin CC. The antiproliferative activity of aloe- emodin is through p53-dependent and p21-dependent apoptotic pathway in human hepatoma cell lines. Life Sci 2002; 71:1879- 1892.
10. Maity TK, Mandal SC, Bhakta T, Pal M, Saha BP. Metabolism of 1,8-Dihidroxy 3-Hydroxy Methyl Anthraquinone (Aloe-emo- din) isolated from the leaves of Cassia tora in albino rats. Phytot- her Res 2001;15:459-460.
11. Mijatovic S, Maksimovic-Ivanic D, Radovic J, Miljkovic Dj, Harhaji L, Vuckovic O, Stosic-Grujicic S. Stojkovic MM, Traj- kovic V. Antiglioma action of aloe emodin: The role of ERK in- hibition. Cell Mol. Life Sci 2005; 62: 589-598.
12. Mijatovic S, Maksimovic-Ivanic D, Radovic J, Miljkovic D, Ka- ludjerovic Sabo, TJ, Trajkovic V. Aloe emodin decreases the ERK- dependent anticancer activity of cisplatin, Cell Mol Life Sci 2005; 62:1275-1282.
13. Molassiotis A, Fernandez-Ortega P, Pud D, Ozden G. Use of complementary and alternative medicine in cancer patients: A European survey. Annals of Oncology 2005; 16: 655-663.
14. Niggeman B, Grüber C. Side effects of complementary and al- ternative medicine. Allergy 2003;58:707-716.
15. Noda S, Yoshimura S, Sawada M, Naganawa T, Iwama T, Na- kashima, S, Sakai N. Role of ceramide during cisplatin-induced apoptosis in C6 glioma cells. J Neurooncol 2001; 52:11-21.
16. Pecere T, Gazzola MV, Mucignat C, Parolin C, Vecchia FD, Ca- vaggioni A, Basso G, Diaspro A, Salvato B, Carli M, Palu G. Aloe-emodin is a new type of anticancer agent with selective ac- tivity against neuroectodermal tumors. Cancer Res 2000;60:2800-2804.
17. Rang HP, Dale MM: Cancer Chemotherapy. ln: Pharmacology ELBS, Hon-Kong, 1993, pp. 781-803.
18. Saleem R, Faizi S, Deeba F, Sıddıquı BS, Qazi MH. Anthrones from aloe barbadensis. Phytochem 1997;45:1279-1282.
19. Salmon SE, Sartorelli AC. Cancer Chemotherapy. ln: Katzung BG (ed): Basic & Clinical Pharmacology, San Francisco 2001, pp. 923-958.
20. Santini MT, Gabriella R. Three-dimensional spheroid model in tumor biology. Pathobiology 1999;67:148-157.
21. Yeh FT, Wu CH, Lee HZ. Signaling pathway for aloe-emodin- induced apoptosis in human H460 lung nonsmall carcinoma cell. Int J Cancer 2003; 106:26-33.