The evaluation of Recombinant Immunoblot assay (RIBA) and HCV-RNA test results in patients with low titer Anti-HCV positivity

Abstract

Objectives: Laboratory diagnosis of hepatitis C virus (HCV) infection is based on the detection of anti-HCV antibodies by enzyme immunoassay (EIA) or chemiluminescence immunoassay (CIA) techniques. However, a consensus related to the problem of low titer (Serum/Cut-off; S/C= 1.0) anti-HCV antibodies is still lacking. The study attempts to evaluate the clinical status of the patients with low titer anti-HCV antibodies detected by third generation anti-HCV tests during February 2013- May 2014 retrospectively. Methods: Serum samples were studied by Advia Centaur XP autoanalyser (Bayer-Siemens, Germany) for anti-HCV, and line immunoassay (Inno-LIATM HCV Score, İnnogenetics, Belgium) for anti-HCV confirmatory test, Cobas AmpliPre/Cobas AMPLICOR HCV Test (Roche diagnostics, Switzerland) for HCV RNA. Results: A total of 55.631 serum samples were studied, and 55 of them were anti-HCV positive of which with low antibody levels (sample/cutoff [S/CO]). S/CO values ranged from 1.15 to 6.15. Seventeen (31%) of patients who have low antibody levels were defined as positive and 2 (4%) patients were intermittent and 36 (65%) patients were negative with line immunoassay. HCV-RNA was not detected in any of the samples. Conclusions: It is thought that antibody positivity must be verified in cases of recurrent reactivity when considering the cost-effectiveness of molecular tests. In the study was concluded that the use of molecular tests would be appropriate diagnosis, and the effectiveness of treatment if necessary after evaluation of patients with biochemical analysis. J Clin Exp Invest 2014; 5 (4): 553-556

Keywords

• Anti-HCV, HCV RNA, Hepatitis C virus, S/C ratio, RIBA.

Düşük titrede Anti-HCV pozitifliği bulunan hastalarda Rekombinant İmmunoblot (RIBA) ve HCV RNA test sonuçlarının değerlendirilmesi

Öz

Amaç: Hepatit C virüsü (HCV) enfeksiyonlarının laboratuvar tanısında, anti-HCV antikorlarının enzim immun assay (EIA) veya kemilüminesans immün yöntemler ile saptanması dünyada ve ülkemizde yaygın olarak kullanılmaktadır. Ancak rutin tanı laboratuvarlarında ciddi sorun oluşturan anti-HCV testlerinde sınır değerine (Serum/Cut-off; S/C= 1,0) yakın pozitif sonuçların elde edilmesi konusunda ortak bir yaklaşım geliştirilmemiştir. Bu çalışmada, Şubat 2013-Mayıs 2014 tarihleri arasında üçüncü jenerasyon anti-HCV testleri ile “düşük titrede pozitif” olarak saptanan hastaların retrospektif olarak incelenmesi amaçlanmıştır. Yöntemler: Serum örnekleri anti-HCV açısından Advia Centaur XP (Bayer-Siemens, Germany) otoanalizörü ile, anti-HCV doğrulaması line immunoassay (Inno-LIATM HCV Score, İnnogenetics, Belçika) ile, HCV RNA testi ise COBAS AmpliPrep/COBAS AMPLICOR HCV Test (Roche, İsviçre) ile çalışılmıştır. Bulgular: Toplam 55.631 serum örneği incelenmiştir. Bunların 55 (%0,10)\'i anti-HCV düşük pozitiftir (sample/cutoff [S/CO]). S/CO değerleri 1,15-6,15 arasında değişmektedir. Düşük pozitiflik saptanan hastaların 17\'si (%31) line immunoassay ile pozitif, 2\'si (%4) şüpheli, 36 hasta (%65) negatif olarak tanımlanmıştır. Düşük pozitif ve line immunoblot test pozitif örneklerin hiçbirisinde HCV-RNA saptanmamıştır. Sonuç: Moleküler testlerin maliyet etkinliği düşünüldüğünde, tekrarlayan reaktiflik durumlarında antikor pozitifliğinin doğrulanması gerektiği düşünülmüştür. Sonrasında gerekirse, biyokimyasal analizlerle birlikte hasta değerlendirildikten sonra tanı, takip ve tedavi etkinliği için moleküler testlerin kullanılmasının uygun olacağı sonucuna varılmıştır.

Anahtar Kelimeler

• Anti-HCV, HCV RNA, Hepatit C virüs, S/C oranı, RIBA.

Kaynakça

1. http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs164/en/
2. İnci M, Aksebzeci AT, Yağmur G, ve ark. Hastane çalışanlarında HBV, HCV ve HIV seropozitifliğinin araştırılması. Turk Hij Den Biyol Derg 2009;66:59-66.
3. Uzun B, Güngör S, Demirci M. Seroprevalence of transfusion transmissible infections among blood donors in western part of Turkey: A six-year study. Transfus Apher Sci 2013;49:511-515. http://dx.doi. org/10.1016/j.transci.2013.02.039.
4. Uzun B, Güngör S, Demirci M. Parameters of ınfectıon in replacement and voluntary donors in the west- ern part of Turkey. Transfus Apher Sci http://dx.doi. org/10.1016/j.transci.2014.02.024.
5. Karaayak Uzun B, Güngör S, Er H, ve ark. Atatürk Eğitim Araştırma hastanesine başvuran poliklinik has- talarinda HBsAg, Anti-HCV, Anti-HIV seroprevalansı. Viral Hepatit Dergisi 2013;19:123-125.
6. Karaayak Uzun B, Er H, Güngör S, ve ark. Pre- operatif hastalarda HBsAg, anti-HCV ve anti-HIV seropozitifliği. J Clin Exp Invest 2013;4:449-452.
7. Alter MJ, Kuhnert WL, Finelli L. Guidelines for laborato- ry testing and result reporting of antibody to hepatitis C virus. Centers for Disease Control and Prevention. MMWR 2003;52(RR03):1-16.
8. Altuğlu İ. HCV testleri: Tanıda standardizasyon ve strateji belirleme, s: 139-41. 3. Ulusal Viroloji Kon- gresi. 9-13 Aralık 2007, Kongre Kitabı, Uludağ, Bursa.

9. Scott JD, Gretch DR. Hepatit C ve G virusları. Çeviri: Abacıoğlu H. In: Klinik Mikrobiyoloji (Manual of Clini- cal Microbiology) editors. Murray PR, Baron EJ, Jor- gensen JH, et al. [Çeviri editörü: Başustaoğlu A] An- kara: Atlas Kitapçılık 2009. s: 1437-1452.
10. Turkoğlu S. Hepatit C virusu viroloji ve seroloji, s: 228- 45. Tabak F, Balık İ, Tekeli E (eds), Viral Hepatit 2007. Viral Hepatitle Savaşım Derneği, İstanbul.
11. Dufour DR, Talastas M, Fernandez MDA, et al. Low- positive anti-hepatitis C virüs enzyme immunoassay results: an important predictor of low likelihood of hep- atitis C infection. Clin Chem 2003;43:479-486.
12. Zer Y, Karaoğlan İ, Çiçek H, ve ark. Düşük titrede Anti- HCV pozitifliği tespit edilen hastaların irdelenmesi. Mi- krobiyol Bul 2009;43:133-139.
13. Mikrobiyolojik Tarama Testleri. Ulusal Kan ve Kan Ürünleri Rehberi 2011:264
14. Lange C, Sarrazin C. Diagnostic Tests in Acute and Chronic Hepatitis C. In: Mauss S, Berg T, Rocks-troh J, Sarrazin C, Wedemeyer H eds. Short Gui-de to Hepatitis C. Germany Flying Publisher, 2011:26-31.
15. Myrmel H, Navaratnam V, Asjİ B. Detection of an- tibodies to hepatitis C virus: False-negative results in an automated chemiluminescent microparticle im- munoassay (Architect® Anti-HCV) compared to a mi- croparticle enzyme immunoassay (AxSYM HCV Ver- sion 3.0). J Clin Virol 2005;34:211-215.
16. Afşar İ, Şener GA, Gönül B, Kurultay N. Tam otoma- tik kemiluminesans immunassay ile düşük düzeyde an-ti-hepatit C virus (anti-HCV) pozitif saptanan ör- neklerin HCV RNA düzeylerinin değerlendirilmesi. İn- feksiyon Derg 2007;21:85-88.
17. Köse Ş, Ece G, Şamlıoğlu P, Topaloğlu S. Tepecik Eğitim ve Araştırma Hastanesi’nde düşük düzeyde anti-hepatit C pozitifliği saptanan örneklerin HCV RNA düzeylerinin değerlendirilmesi. Turk Hij Den Biyol Derg 2011;68:191-196.
18. Sayan M, Meriç M, Mutlu B, ve ark. Mikropartikül enzim immunoassay ile düşük titrede saptanan An- ti-HCV pozitifliği hepatit C Virus enfeksiyonunun tanı- sında kullanılabilir mi? Mikrobiyol Bul 2006;40:81-84.