Van Bölgesindeki Köpeklerde Giardia duodenalis Yaygınlığının Mikroskobik ve Moleküler Yöntemlerle Araştırılması

Öz

Bu çalışmanın amacı, Van bölgesindeki köpeklerde bulunan Giardia duodenalis yaygınlığının mikroskobik ve moleküler yöntemlerle araştırılmasıdır. Çalışmanın hayvan materyalini 2020-2021 tarihlerinde Van ilindeki özel veteriner kliniklerine getirilen 0-3 yaş arası toplam 200 köpek dışkı örneği oluşturmaktadır. Köpeklerin rektumlarından dışkı örnekleri alındı ve soğuk zincirle laboratuvara getirildi. Giardia spp. yönünden mikroskobik inceleme gerçekleştirilip sonrasında 200 örneğin tamamından DNA ekstraksiyonu yapıldı. Çalışmaya ilgili primerlerle Nested PCR uygulandı. Çalışmanın mikroskobik sonucu 200 örnekte 12'sinde (% 6) iken Nested PCR sonucu ise 18 (%9)’inde Giardia spp. kistleri tespit edildi. Sonuç olarak Van ilinde köpeklerde Giardia spp. yaygınlığının moleküler olarak araştırılması ilk defa kayıt altına alındı. Ayrıca Nested PCR metodunun mikroskobik inceleme ile karşılaştırıldığında daha güvenilir olduğu görüldü. Araştırmanın verilerine göre köpeklerde Giardiasisin yaygın olduğu ve koruma kontrolleri için gerekli tedbirlerin alınması gerektiği rapor edildi.

Anahtar Kelimeler

• Giardia spp.
• Nested PCR
• Köpek
• Türkiye

Investigation of The Prevalence of Giardia duodenalis in Dogs in Van Region By Microscopic and Molecular Methods

Öz

The purpose of this study is to investigate the prevalence of Giardia duodenalis in dogs in the Van region by microscopic and molecular methods. The animal samples of the study consists of a total of 200 dog aged 0-3 years feces samples, which were brought to private veterinary clinics in Van province between 2020-2021. Stool samples were taken from the rectums of dogs and brought to the laboratory in a cold chain. Then, microscopic examination of Giardia spp. was performed. Microscopic examination was performed for Giardia spp, and then DNA extraction was performed from all 200 samples Nested PCR with the relevant primers was applied to the study. While the microscopic result of the study was 12 (6%) of 200 samples, Giardia spp cysts were detected in 18 (9%) of the Nested PCR results. In conclusion, molecular investigation of the prevalence of Giardia spp in dogs in Van province was recorded for the first time. In addition, the Nested PCR method was found to be more reliable when compared to microscopic examination. According to the data of the study, it was reported that Giardiasis is common in dogs and that necessary precautions should be taken for protection controls.

Anahtar Kelimeler

• Giardia duodenalis
• Nested PCR
• Dog
• Türkiye

Kaynakça

1. Agresti, A., Berrilli, F., Maestrini, M., Guadano Procesi, I., Loretti, E., Vonci, N., Perrucci, S. (2022). Prevalence, risk factors and genotypes of Giardia duodenalis in sheltered dogs in Tuscany (Central Italy). Pathogens,11(1), 12.
2. Ak M, Türk M, Günes K. Giardiasis. In: Özcel MA (eds). Tıbbi Parazit Hastalıkları. Türk. Parazitoloji Dern, İzmir, 2007; 22: 323- 344.
3. Ayan, A., Alic Ural, D., Erdogan, H., Orunc Kilinc, O., Gültekin, M., Ural, K. (2019). Prevalance and Molecular Characterization of Giardia duodenalis in Livestock in Van, Turkey. IJEES; 9(2):289-296.
4. Bahramdoost, Z., Mirjalali, H., Yavari, P., Haghighi, A. (2021). Development of HRM real-time PCR for assemblage characterization of Giardia lamblia. Acta Tropica, 22(4), 106-109.
5. Bilgiç, B., Bayrakal, A., Dokuzeylül, B., Dodurka, H. T., Erman, O. R. (2020). Zoonotic importance of G. duodenalis . infections in asymptomatic dogs. Van Veterinary Journal, 31(3), 158-160.
6. Bouzid, M., Halai, K., Jeffreys, D., Hunter, P. R. (2015). The prevalence of Giardia infection in dogs and cats, a systematic review and metaanalysis of prevalence studies from stool samples. Veterinary parasitology, 207(3-4), 181-202.
7. Caccio, S. M., de Giacomo, M., Pozio, E. (2002). Sequence analysis of the giardin gene and development of a PCRRFLP assay to genotype Giardia duodenalis cysts from human faecal samples. International Journal of Parasitology. 32: 1023-1030.
8. Cao, Y., Fang, C., Deng, J., Yu, F., Ma, D., Chuai, L., Li, J. (2022). Molecular characterization of Cryptosporidium spp. and Giardia duodenalis in pet dogs in Xinjiang, China. Parasitology Research,121(5), 1429-1435.

9. Dos Santos Silva, A. C., Martins, F. D. C., Ladeia, W. A., Kakimori, M. T. A., Lucas, J. I., Sasse, J. P., Garcia, J. L. (2022). First report of Giardia duodenalis assemblage F in humans and dogs in southern Brazil. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases, 89, 101-878.
10. Drake, J., Sweet, S., Baxendale, K., Hegarty, E., Horr, S., Friis, H., von Samson-Himmelstjerna, G. (2022). Detection of Giardia and helminths in Western Europe at local K9 (canine) sites (DOGWALKS Study). Parasites Vectors, 15(1), 311.
11. Dumanlı N. (1984). Elazığ Yöresinde Köpeklerde Görülen Protozoonların İnsidensi Üzerinde Bir Araştırma. Ankara Univ Vet Fak Derg. 31: 383-387. 35.
12. Ertaş, F. ve Ayan, A. (2022). Türkiye’nin Van İlinde Giardiozis Klinik Belirtileri Olan Van Kedilerinde Giardia duodenalis Yaygınlığının Araştırılması. Turkiye Klinikleri J Vet Sci, 13(1), 1-5. Gharekhani, J. (2014). Study on gastrointestinal zoonotic parasites in pet dogs in Western Iran. Türkiye Parazitolojii Dergisi, 38(3), 172.
13. Gültekin, M., Ural, K., Aysul, N., Ayan, A., Balikci, C., Akyildiz, G. (2017). Prevalence and molecular characterization of Giardia duodenalis in dogs in Aydin, Turkey. Int J Environ Health Res. 27(3):161-168.
14. Hackett, T. ve Lappin, M.R. (2003). Prevalence of enteric pathogens in dogs of north-central Colorado. J. Am. Anim. Hosp. Assoc. 39, 52–56.
15. Lalle, M., Pozio, E., Capelli, G., Bruschi, F., Crotti, D. Cacció, S. M. (2005). Genetic heterogeneity at the ß-giardin locus among human and animal isolates of Giardia duodenalis and identification of potentially zoonotic subgenotypes. International Journal of Parasitology. 35: 207-213.
16. Lass, A., Szostakowska, B., Korzeniewski, K., & Karanis, P. (2017). Detection of Giardia intestinalis in water samples collected from natural water reservoirs and wells in northern and north-eastern Poland using LAMP, real-time PCR and nested PCR. Journal of water and health, 15(5), 775-787.
17. Mayer CL, Palmer CJ. Evaluation of PCR, Nested PCR, and Fluorescent Antibodies for Detection of Giardia and Cryptosporidium Species in Wastewater. Appl Environ Microbiol 1996;62(6): 2081-2085.
18. Mircean, V., Györke, A., Cozma, V. (2012). Prevalence and risk factors of Giardia duodenalis in dogs from Romania. Veterinary Parasitology, 184(2-4), 325-329.
19. Murnik, L. C., Daugschies, A., Delling, C. (2023). Gastrointestinal parasites in young dogs and risk factors associated with infection. Parasitology Research, 122(2), 585-596.
20. Özbel Y, Dağcı H. Giardiasisin laboratuvar tanısı. In: Özcel MA, Üner A. (Eds). Giardiosis. Türkiye Parazitoloji Derneği Yay no:14; İzmir: 1997. p. 79-117.
21. Özekinci, T., Uzun, A., Suay, A., Elçi, S., Akpolat, N., Atmaca, S. 2005. Giardiasisin Tanısında Enzym İmmun Assay (EIA) ve Direkt İnceleme Yöntemlerinin Karşılaştırılması. Türkiye Parazitoloji Dergisi, 29 (2): 89-92
22. Periago, M.V., García, R, Astudillo, O.G., Cabrera, M., Abril, M.C. (2018). Prevalence of intestinal parasites and the absence of soil-transmitted helminths in Añatuya, Santiago del Estero, Argentina. Parasit Vectors.11:63-68.
23. Sahagún, J., Clavel, A., Goni, P., Seral, C., llorente, M.T., Castillo, F.J., Capilla, S., Arias, A., Gomez-Lus, R. (2007). Correlation between the presence of symptoms and the Giardia duodenalis genotype. Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 27(1):81-83.
24. Sarı, M. ve Onmaz, A.C. (2011). Giardıosis’li Köpeklerde Hematolojik Ve Biyokimyasal Göstergelerin Değerlendirilmesi. Sağlık Bilimleri Dergisi, 20(2), 129-136.
25. Soran, M.M, Ionita, M, Mitrea, I.L. (2021). A Rapid Antigen Test Screening For Giardia duodenalis Infection in Dogs And Cats with Digestive Disorders. Scientific Works. Series C. Veterinary Medicine. LXVII(1):127-132.
26. Sui, Y., Zhang, X., Wang, H., Yu, F., Zheng, L., Guo, Y., Zhang, L. (2022). Prevalence and genetic diversity of Giardia duodenalis in pet dogs from Zhengzhou, central China and the association between gut microbiota and fecal characteristics during infection. One Health,14, 100401.
27. Tarqui-Terrones, K., Silva-Molina, J. I., Beltrán-Fabián, M., Zevallos-Vara, S., & Mayta-Huatuco, E. (2019). Comparison of methods of DNA extraction from Giardia spp. measured by conventional PCR. Revista peruana de medicina experimental y salud publica, 36(3), 423.
28. Thompson, R.C., Monis P. (2012). Giardia-from genome to proteome. Adv Parasitol, 78, 57-95.
29. Uslu, U., Ceylan, C., Ceylan, O., Küçükyağlıoğlu, A., Demirci, N. (2022). Konya’da 2-6 Aylık Köpek Yavrularında Tespit Edilen Gastrointestinal Protozoon ve Helmintler. Dicle Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 15(2), 74-78.
30. Visscher, D., Porter, E., Sweet, S., Szlosek, D., Horr, S. (2022). Canine nematode and Giardia spp. infections in dogs in Edmonton, Alberta, the “Canıda” study. Parasites Vectors, 15(1), 294.
31. Westermarck E. (2016). Chronic diarrhea in dogs: what do we actually know about it? Top Companion Anim Med. 31:78- 84.
32. Yılmaz, A. B., Orunç Kılınç, Ö., Göz, Y., Denizhan, V. (2017). Van İlinde Dışkı Muayenesine Göre Sokak Köpeklerinde Görülen Mide-Bağırsak Parazitleri. Muş Alparslan Üniversitesi Fen Bilimleri Dergisi, 5(2), 425-429