HEPATOSELLÜLER KARSİNOM HÜCRELERİNDE KARMOFURUN SİTOTOKSİK VE APOPTOTİK ETKİLERİ

Yıl 2017, , 55 - 60, 17.04.2017

Gökhan Kuş

https://doi.org/10.18229/kocatepetip.344603

Cited By: 1

Öz

ÖZ

Bedende istenmeyen ve potansiyel olarak tehkike arzeden hücrelerin ölümünü sağlayan apoptotik hücre ölümü genetik olarak kontrol edilir ve bu yolla bedendeki hücrelerin sayısı kontrol altında tutulur. Apoptoz ölüm yolağındaki yetersizlik otoimmun sistem hastalıklarından kansere kadar birçok hastalığa yol açabilir. Her türlü tedavi şekline rağmen hepatosellüler kanserler, karaciğer kanserlerine bağlı ölümlerin başında gelmektedir. Kanser tedavisindeki temel amaç kanserli hücrelerin çoğalmasını önlemek ve bu hücrelerin apoptozlarını uyarmaktır. Son zamanlarda kanserin önlenebilmesi yönünde yapılan birçok çalışmada kanser oluşumu ile sfingolipidler arasındaki ilişkinin önemi ortaya konmuştur. Çalışmamızda, 5-flourasil türevi ve bir seramidaz enzim baskılayıcısı olan karmofurun kanserli insan karaciğer hücre hattındaki (HepG2) hücrelerinin yaşam oranların ve apoptoz uyarım üzerine etkilerini araştırdık. Karmofurun hücre yaşam oranlarına etkisi MTT yöntemiyle, apoptoz uyarım etkisi flow sitometri yöntemiyle, hücrelerdeki morfolojik değişiklikler ise konfokal mikroskobuyla incelendi. Karmofurun çeşitli konsantrasyonlarının (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 ve 60 μM) 24 saat uygulanması sonucunda kontrol grubuna göre (% 100) hücrelerdeki yaşam oranları sırasıyla % 100, 77, 65, 64, 46, 38, 34, 30, 26, 20, 14 ve 9 olarak tespit edildi. Karmofurun 24 μM (IC50) dozunun 24 saat uygulanması sonucunda bu hücre populasyonundaki apoptotik hücrelerin yüzdesinin kontrol grubuna göre arttığı belirlendi. Kontrol grubu (yaklaşık % 1) ile karşılaştırıldığında karmofurun 24 saat uygulanması sonucunda kanserli karaciğer hücrelerinde flow sitometrik olarak ölçülen toplam ölüm oranı % 28 dir. Hücrelerdeki bu apoptotik değişimler konfokal mikroskobuyla kromatin yoğunlaşması, hücrelerin büzüşmesi, hücre iskeletinin bozulması ve DNA’nın parçalanması, hücre zarlarının şekil değişikliği şeklinde tespit edildi. Bu çalışma sonucunda karmofurun HepG2 hücrelerinin çoğalmasını baskıladığı ve apoptozunu uyardığı gösterildi.

Anahtar Kelimeler

Karmofur, Apoptotik, Antiproliferatif, Hepatoma.

Kaynakça

• KAYNAKLAR
• Günay Y, Güler N, Akyıldız M ve ark. Hepatosellüler karsinoma ve canlı vericili karaciğer nakli:kanser nüksü ve hasta sağkalımını etkileyen faktörler. Tek merkez deneyimi. Gaziantep Tıp Dergisi 2013;19(3):173-9.
• Pathil A, Armeanu S, Venturelli S, et al. HDAC inhibitontreatment of hepatoma cells induces both TRAIL-independent apoptosis and restoration of sensitivity to TRAIL. Hepatology 2006;43(3):425-34.
• Balkan BM, Sel T. Vitamin C’nin HepG2 hücrelerinde apoptozis üzerine etkileri. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 2014;61:237-41.
• Reynolds CP, Maurera, BJ, Kolesnick RN. Ceramide synthesisand metabolism as a target for cancer therapy. Cancer Lett 2004;206:169–80.
• Albi E and Mgni MV. Sphingolipid metabolism inhibitors andcell function. The Open Enzyme Inhibition Journal 2008;1,72-9.
• Beckham TH, Elojeimy S, Cheng JC, et al. Targetingsphingolipid metabolism in head and neck cancer: rational therapeutic potentials. Expert Opin Ther Targets. 2010;14:529-39.
• Chalfant CE, Rathman K, Pinkerman RL and et al. De novoceramide regulates the alternative splicing of caspase 9 and Bcl-x in A549 lung adenocarcinoma cells. Dependence on protein phosphatase-1. J Biol Chem 2002;277,12587-95.
• Mao C, Obeid LM. Ceramidases: regulators of cellular responses mediated by ceramide, sphingosine, and sphingosine-1-phosphate. Biochim Biophys Acta 2008;1781:424-34.
• Strelow A, Bernardo K, Klages SA, et al. Overexpression ofacid ceramidase protects from tumor necrosis factor induced cell death. J Exp Med 2000;192:601-11.
• Kolesnick R. The therapeutic potential of modulating theceramide/sphingomyelin pathway, J Clin Invest 2000;110:3–8.
• Liu X, Cheng JC, Turner LS, et al. Acid ceramidase upregulation in prostate cancer: role in tumor development and implications for therapy. Expert Opin Ther Targets 2009;13:1449-1458.
• Mahdy AEM, Cheng JC, Li Jun. Acid ceramidase upregulation in prostate cancer cells confers resistance to radiation:AC inhibition, a potential radiosensitizier. Mol Ther 2009;17:430-8.
• Huerta S, Gaulet EJ, Huerta-Yepez S, Livingston EH. Screening and detection of apoptosis. J Surg Res 2007;139:143–56
• Engedal N, Saatcioglu F. Ceramide-induced cell death in the prostate cancer cell line LNCaP has both necrotic and apoptotic features. Prostate 2001;46:289-97
• Realini N, Solorzano C, Pagliuca C, et al. Discovery ofhighly potent acid ceramidase inhibitors with in vitro tumor chemosensitizing activity. Scientific Reports 2013;3:1-7.
• Hu W, Xu R, Sun W, et al. Alkaline ceramidase 3 hydolyzesunsaturated lon chain ceramides and its down regulation inhibits both cell proliferation and apoptosis. J Biol Chem 2010;285:7964-76.
• Zweelan Ratnan S, Quian C, Yokomiza, A, et al. Human acidceramidase is overexpressed but not mutataed in prostate cancer, Genes, Chromosomes and Cancer. 2000;29:137-46.
• Proksch D, Klein JJ, Arenz C, et al. Potent inhibition of acidceramidase by novel B-13 analogues. J Lipids 2011;971618:1-8.
• Holman DH, Turner LS. Lysosomotropic acid ceramidaseinhibitor induces apoptosis in prostate cancer cells. Cancer Chem Pharm 2008; 61:231-42.
• Saad AF, Meachham WD, Bai A, et al.. The functional effects of acid ceramidase overexpression in prostate cancer progression and resistance to chemotherapy. Cancer Biol Ther 2007;9:1455-60.
• Morales A, Paris R, Villanueva A, et al. Pharmacologicalinhibition or small interfering RNA targeting acid ceramidase sensitizes hepatoma cells to chemotherapy and reduces tumor growth in vivo. Oncogene 2006: 26;905-16.
• Domracheva I, Muhamadejev R, Petrova M, et al. 1,2-Dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DMPC) increases Carmofur stability and in vitro antiproliferative effect. Toxicology report 2015: 2, 377-383.60