In Vitro Evaluatıon of Frozen Bull Sperm Thawed in The Different Systems

Öz

In Vitro Evaluatıon of Frozen Bull Sperm Thawed in The Different Systems The aim of this study was to evaluate the effect of frozen bull sperm thawed in a water bath and dry thawing system within certain time at a certain temperature on spermological parameters. Ten straws (0.25 ml) containing of the frozen bull sperm belonging to same bull, frozen at the same date and stored under same conditions were used in the study. Straws were thawed at 37.5 ºC for 25 sec in a water bath and dry thawing system. Sperm samples were obtained from the each thawed sperm and evaluated for spermatological parameters. There was no difference in the percentage of motility, dead/live spermatozoa rate, hypo-osmotic swelling test (HOST) values, abnormal spermatozoa rates (head, middle, tail parts of spermatozoa and total abnormal spermatozoa) in the study. Although acrosomal disorders of spermatozoa thawed in dry thawing system (1.5%±0.30) were significantly higher (P<0.05) than those of thawing in warm water thawing system (0.5%±0.16), acrosomal disorders of the spermatozoa were acceptable. In conclusion, the dry thawing system can have some advantages due to the fact that dry thawing system device can sustain its heat longer time (~10 min), there is no risk of mixing sperm with water, lack of difficulty in adjusting the water temperature in the barn conditions or keeping the certain water temperature in cold weather conditions

Anahtar Kelimeler

• Bull Thawing

Farklı Sistemlerde Çözdürülen Dondurulmuş Boğa Spermasının İnvitro Değerlendirilmesi

Öz

Bu çalışmada dondurulmuş boğa spermasının belirli sıcaklıkta ve belirli sürede, su banyosu içerisinde ve kuru sistemde çözdürülmesinin spermatolojik parametreler üzerine etkisinin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Çalışmada aynı boğaya ait, aynı tarihte dondurulan ve aynı şartlarda saklanan dondurulmuş spermalardan her iki çözdürme yöntemi için 10’ar adet payet (0,25 ml) kullanılmıştır. Spermalar sulu sistemde 37,5 OC’lik su banyosunda 25 sn.’de, kuru sistemde ise 37,5 OC’de 25 sn.’ye ayarlanmış cihaz içinde çözdürülmüştür. Çözdürülen spermalardan, spermatolojik muayeneler için numuneler alınmış ve incelenmiştir. Spermatolojik parametrelerin incelenmesi sonucu motilite, ölü/canlı oranı, hipo-ozmotik şişme testi (HOST) değerleri ile baş, orta, kuyruk ve toplam anormal spermatozoa oranları yönünden her iki yöntem arasında önemli bir fark saptanmamıştır. Her iki yöntem arasında sadece akrozom bozuklukları yönünden önemli bir farklılık bulunmuştur. Kuru sistemde çözdürülen spermatozoonlardaki akrozom bozuklukları (%1,5±0,30) sulu sistemde çözdürülenlerden (%0,5±0,16) daha yüksek (P<0,05) bulunmasına rağmen kabul edilebilir sınırlar içerisindedir. Sonuç olarak kuru sistem cihazının, içindeki ısıyı daha uzun süre muhafaza edebilmesi (~10 dakika), çözdürmede spermaya su karışma riskinin olmaması, ahır şartlarında su sıcaklığının ayarlanması ve soğuk havalarda bunun muhafaza zorluğunun bulunmaması gibi nedenlerden dolayı spermanın kuru sistemde çözdürülmesinin daha avantajlı olabileceği düşünülmektedir. ●●●

Anahtar Kelimeler

• -

Kaynakça

1. Brito LFC, Barth AD, Bilodeau-Goeseels S, Panich PL, Kastelic JP. Comparison of methods to evaluate the plasmalemma of bovine sperm and their relationship with in vitro fertilization rate. Theriogenology. 2003; 60: 1539‒1551.
2. Correa JR, Pace MM, Zavos PM. Relationships among frozen-thawed sperm characteristics assessed via the routine semen analysis, sperm functional tests and fertility of bulls in an artificial insemination program. Theriogenology. 1997; 48: 721-731.
3. Correa JR, Zavos PM. Frozen-thawed bovine spermatozoa diluted by slow or rapid dilution method: measurements on occurrence of osmotic Theriogenology. 1995;44: 963-971. sperm viability.
4. DeJarnette JM, Barnes DA, Marshall CE. Effects of pre- and post-thaw thermal insults on viability characteristic of cryopreserved bovine semen. Theriogenology. 2000; 53: 1225-1238.
5. DeJarnette JM, Marshall CE. Straw-thawing method interacts with sire and extender to influence sperm motility and conception rates of dairy cows. J Dairy Sci. 2005; 88: 3868-3875.
6. Dhami AJ, Sahni KL, Mohan G. Effect of various cooling rates (from 30 ◦C to 5◦C) and thawing temperatures on the deep-freezing of Bos Taurus and Bos Bubalis semen. Theriogenology. 1992;38: 565–574.
7. Gadea J, Selles E, Marco MA, Coy P, Matas C, Romar R, Ruiz S. Decrease in glutathione content in boar sperm after cryopreservation . Effect of the addition of reduced glutathione to the Theriogenology. 2004; 62: 690-701. thawing extenders.
8. Hafez ESE. Semen evaluation, In : Reproduction in farm animals, Ed; Hafez ESE, 6th edition, Lea and Febiger, Philadelphia. 1993;pp: 405-423. 1993.

9. İleri IK, Ak K. Payet yöntemine göre dondurulmuş boğa spermasının eritilmesinde eritme ısısı ve sürelerinin spermatozoitlerin motilite ve akrozom yapıları üzerine etkileri. İstanbul Universitesi Veteriner Fakultesi ve Munich Ludwing-Maximilian Universitesi Veteriner Fakultesi Turk-Alman Gunleri, 29-30 Nisan- Mayıs Tebliğler, 58-62. 1993.
10. Martinez CO, Mosqueda MLJ, Hernandez J, Valencia J. Cryopreservation of bull spermatozoa alters the perinuclear theca. Theriogenology. 2006; 66:1969–1975
11. Moore DS, McCabe GP. Introduction to the practice of statistics. Second Ed. W.H. Freeman and Company New York. 1993; pp: 854.
12. Muino R, Rivera MM, Rigau T, Rodriguez-Gil JE, Pena AI. Effect of different thawing rates on post-thaw sperm viability, kinematic parameters and motile sperm subpopulations structure of bull semen. Anim Reprod Sci. 2008; 109: 50-64.
13. Nur Z, Dogan I, Soylu MK, Ak K. Effect of different thawing procedures on the quality of bull semen. Revue Med Vet. 2003; 154: 487- 490.
14. Padrik P, Hallap T, Kaart T, Bulitro T, Jaakma Ü. Relationship between the results of hypo- osmotic swelling tests, sperm motility, and fertility in Estonian Holstein dairy bulls. Czech J Anim Sci. 2012; 57: 490-497.
15. Revell SG, Mrode RA.. An osmotic resistance test for bovine semen. Anim Reprod Sci. 1994; 36: 77-96
16. Robbins PK, Saacke RG, Chandler PT. Influence of freeze rate and glycerol level on acrosomal retention and survival of bovine spermatozoa frozen in frech straws. J Anim Sci. 1976; 42: 145–154.
17. Rodriguez OL, Berndtson WE, Ennen BD, Pickett BW. Effect of rates of freezing, thawing and level of glycerol on the survival of bovine spermatozoa in straws. J Anim Sci. 1975; 41: 129-135.
18. SAS SAS Stat Sofware. SAS Campus Drive Cary, NC. 27513, USA. 2009.
19. Senger PL. Handling frozen bovine semen-factors which influence viability and fertility. Theriogenology. 1980; 13: 51-62.
20. Tartaglione CM, Ritta MN. 2004. Prognostic value of spermatological parameters as predictors of in vitro fertility of frozen-thawed bull semen. Theriogenology, 62, 1245‒1252. Tekin N. değerlendirilmesi. Reprodüksiyon, Sun’i Tohumlama, Doğum ve İnfertilite (Alaçam A, ed). Dizgievi, Konya, Turkey. 67-79. 1994. muayenesi ve Evcil Hayvanlarda
21. Tuncer PB, Çevik M, Demiral ÖO, Kinet H. Boğa spermalarının iki farklı sulandırıcı ile dondurulması ve in vitro değerlendirilmesi. Erciyes Üniv Vet Fak Derg. 2005; 2 (2), 65-71.
22. Underwood SL, Bathgate R, Ebsworth M, Maxwell WMC, Evans G. Pregnancy loss in heifers after artificial insemination with frozen- thawed, sex-sorted, re-frozen-thawed dairy bull sperm. Anim Reprod Scie. 2010; 118: 7-12.
23. Yavasca I, Ak K, Ileri IK. Einwirkungen verschiedener umgebungstermperaturen und besamungszeiten auf die fertilität der nach paillettenverfahren aufgetauten bullenspermien (in German). J Fac Vet Med Istanbul Univ. 1999; 25: 215-223.
24. Vazquez JM, Maertinez EA, Martinez P, Garciaartiga C, Roca J. Hypo-osmotic swelling of boar spermatozoa compared to other methods for analyzing the sperm membrane. Theriogenology. 1997; 47: 913-922.
25. Yıldız C, Ataman MB, Kaya A, Tepeli C, Lehimcioğlu N. Köpek ve koçlarda akrozom bozukluklarının belirlenmesi amacıyla farklı tespit ve boyama yöntemlerinin karşılaştırılması. Y.Y.Ü. Vet. Fak. Derg. 2000; 11(2):7-11
26. Zeng WX, Terada T. Protection of boar spermatozoa from cold shock damage by 2- hydroxypropyl-beta-cyclodextrin. Theriogenology. 2001; 55: 615-627.